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動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血神經(jīng)行為、血細(xì)胞及血清蛋白譜的分析

發(fā)布時(shí)間:2019-11-27 12:35
【摘要】:[目的]探討動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血后神經(jīng)行為、血細(xì)胞及血清蛋白的變化,探討血細(xì)胞及血清蛋白的變化對動脈瘤蛛網(wǎng)膜下腔出血神經(jīng)行為的影響,為動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血疾病的防治及機(jī)理研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。[方法]收集2014年11月至2017年4月期間云南省昆明市第一人民醫(yī)院神經(jīng)外科確診為動脈瘤性自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者病例61例(男24例,女37例,年齡20-81歲,平均55.46±13.49歲)。對發(fā)病24h內(nèi)入院的病人,采集其入院立即(病人未受任何干預(yù)治療)的全血及血清,全血用于急診血細(xì)胞分析,血清用于蛋白芯片分析,并在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對病人進(jìn)行行為評分。按Hunt-Hess分級將入院立即的病人分為病情輕組和病情重組。將輕型患者與重型患者分別與正常人進(jìn)行比較及重型患者與輕型患者進(jìn)行比較,對各組血細(xì)胞數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)分析及血清蛋白的生物信息學(xué)分析。[結(jié)果](1)入院立即的血細(xì)胞分析顯示:①病情輕組的病人發(fā)病后與正常人比較,血紅蛋白、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞%、中性粒細(xì)胞數(shù)均呈上升趨勢,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。淋巴細(xì)胞%、單核細(xì)胞%、淋巴細(xì)胞數(shù)、單核細(xì)胞數(shù)均呈下降趨勢,差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。血小板比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。②病情重組的病人發(fā)病后與正常人比較,紅血蛋白、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞%、中性粒細(xì)胞數(shù)均呈上升趨勢、且差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。淋巴細(xì)胞%、單核細(xì)胞%,淋巴細(xì)胞數(shù)均呈下降趨勢,差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。血小板和單核細(xì)胞數(shù)比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。③病情重組的白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞數(shù)及單核細(xì)胞數(shù)均高于病情輕組的病人,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。紅血蛋白、紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞%、單核細(xì)胞%、淋巴細(xì)胞數(shù)、血小板及淋巴細(xì)胞%比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(2)入院立即的血清蛋白芯片分析顯示:①輕型患者與正常人的血清蛋白芯片比較,發(fā)現(xiàn)輕型患者發(fā)病后,有113個(gè)血清蛋白發(fā)生上調(diào),其中排名前十的蛋白分別是ROS、RYK、S100A10、uPA、EphB2、LTK、EphA5、CathepsinB、EphA8 和 Desmin;352個(gè)血清蛋白發(fā)生下調(diào),其前十名分別是Pro-BDNF、IL-36RN、FetuinB、NM23-H1/H2、PAK7、TFF3、HTRA2、CD36、MCP-4/CCL13 和 ActivinRⅡA。②重型患者與正常人的血清蛋白芯片比較,發(fā)現(xiàn)重型患者發(fā)病后有130個(gè)血清蛋白發(fā)生上調(diào),前十的蛋白分別是BAFFR/TNFRSF13C、EN-RAGE、IGFBP-5、BLAME、FGFR2、IL-1F8/FIL1eta、SCG3、MMP-9、Kallikrein7 和 Btk;192個(gè)血清蛋白發(fā)生下調(diào),前十名分別是OX40、HTRA2、CCR7、M-CSF、IL-23R、ActivinRIB/ALK-4、IGFBP-6、IL-1ra、MFRP 和 IL-17C。③重型患者相比輕型患者,有248個(gè)血清蛋白發(fā)生上調(diào),前十的蛋白分別是FetuinB、IL-36RN、NM23-H1/H2、CD36、CPN2、VWF、DCBLD2、Follistatin-like1、Btk、FER;112個(gè)血清蛋白發(fā)生下調(diào),前十名分別是ROS、CD74、Desmin、RYK、LTK、pro-Glucagon、uPA、CathepsinB、EphB2 和 EphA8。④通過分別將三組蛋白芯片比較按照差異倍數(shù)篩選出的上下調(diào)前十名蛋白放進(jìn)String網(wǎng)站上搜索蛋白間相互作用及三組蛋白芯片分析結(jié)果互相取交集,我們發(fā)現(xiàn)輕型患者與正常人相比,FetuinB、IL-36RN、NM23-H1/H2 及 CD36 明顯下調(diào),ROS、RYK、uPA、EphB2、LTK、CathepsinB、EphA8和Desmin明顯上調(diào),且與重型患者相比結(jié)果一致,但重型患者相比正常人,FetuinB和uPA表達(dá)上調(diào),IL-36RN、NM23-H1/H2、CD36、ROS、RYK、EphB2、LTK、CathepsinB、EphA8 和 Desmin均無明顯變化。重型患者與正常人相比,Btk蛋白顯著上調(diào),且與輕型患者相比依舊明顯上調(diào),但輕型患者與正常人比較無明顯變化。且EphB2和RYK有直接作用關(guān)系。[結(jié)論](1)發(fā)生aSAH時(shí),神經(jīng)行為會發(fā)生改變,輕者伴神經(jīng)受累,出現(xiàn)腦膜刺激征,重者出現(xiàn)神經(jīng)障礙、意識的障礙和腦膜刺激征,甚至?xí)霈F(xiàn)偏癱。還會帶來神經(jīng)功能的損害,如認(rèn)知功能受損,尤其是執(zhí)行功能,語言和空間記憶等。(2)aSAH發(fā)病后,血紅蛋白,紅細(xì)胞,白細(xì)胞,中性粒細(xì)胞%,中性粒細(xì)胞數(shù)均增多,淋巴細(xì)胞%,單核細(xì)胞%,淋巴細(xì)胞數(shù),單核細(xì)胞數(shù)均減少,且其中,白細(xì)胞,中性粒細(xì)胞數(shù)和單核細(xì)胞數(shù)與神經(jīng)行為有關(guān),病情越重,其數(shù)量越多,炎癥反應(yīng)越強(qiáng)烈,神經(jīng)功能受損越嚴(yán)重。(3)aSAH發(fā)病后,會使得多種蛋白發(fā)生變化,這是一個(gè)復(fù)雜調(diào)節(jié)的過程。且其中,與缺血缺氧、免疫炎癥、細(xì)胞凋亡或生長、血管受損或修復(fù)、神經(jīng)功能等有關(guān)的蛋白質(zhì)變化最明顯。這些蛋白的表達(dá)變化可能與病情的嚴(yán)重程度有關(guān)也可能是疾病的潛在發(fā)病機(jī)制,還有待進(jìn)一步研究。(4)發(fā)生aSAH時(shí),產(chǎn)生的出血性及創(chuàng)傷性急性應(yīng)激炎癥反應(yīng)對血管造成損傷,進(jìn)一步引起局部缺血缺氧,從而對神經(jīng)功能造成一定損害。其炎癥反應(yīng)越重,病情也越嚴(yán)重,其神經(jīng)功能損害也越嚴(yán)重,并且他們之間是相互促進(jìn)的關(guān)系。
【圖文】:

顱內(nèi)動脈瘤,蛛網(wǎng)膜下腔出血


顱內(nèi)動脈瘤圖

步驟,洗液,玻片,芯片分析


4)抽去lx洗液丨,加入lx洗液丨I室溫振蕩,洗玻片3次,每次5)抽去lx洗液丨丨,每孔加入400nL用封閉液1500稀釋的Cy3邋eq避光振蕩孵育2小時(shí)。逡逑6)按照步驟3)和4)洗玻片。逡逑3.邋4.邋5熒光檢測逡逑采用激光掃描儀例如InnoScan邋300掃描信號,采用Cy3或者發(fā)頻率=532nm)逡逑1)掃描儀器:丨nnoScan邋300邋Microarray邋Scanner逡逑2)產(chǎn)地:Parc邋d'Activity邋Activestre邋;邋31邋390邋Carbonne邋-邋France逡逑3)掃描參數(shù):WaveLengh:邋532nm;邋resoLution:邋10pm逡逑采用芯片分析軟件提取數(shù)據(jù),,采用(AAH-BLG-1000)的數(shù)據(jù)分析軟分析。逡逑
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R743.35

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2566612

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