【摘要】：目的：短暫性的輕微腦缺血可對(duì)接下來的嚴(yán)重缺血產(chǎn)生部分保護(hù)作用，此現(xiàn)象稱為腦缺血耐受。近年來研究發(fā)現(xiàn)，不僅僅是缺血，其他多種預(yù)處理方式均可使機(jī)體對(duì)后續(xù)嚴(yán)重缺血產(chǎn)生耐受。而運(yùn)動(dòng)預(yù)處理作為較安全的預(yù)處理方式受到廣泛關(guān)注。以往研究表明缺血性卒中發(fā)生之前進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能夠通過作用于谷氨酸系統(tǒng)使腦組織對(duì)后續(xù)發(fā)生的嚴(yán)重?fù)p傷產(chǎn)生較強(qiáng)的耐受能力，但是其作用于谷氨酸系統(tǒng)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)功能的通路及其所涉及的相關(guān)機(jī)制有待于進(jìn)一步闡明。 谷氨酸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，對(duì)維持正常腦功能非常重要。高濃度的谷氨酸具有嚴(yán)重的神經(jīng)毒性。因此，降低腦缺血時(shí)細(xì)胞外液的谷氨酸濃度對(duì)減輕腦損傷至關(guān)重要。 腦內(nèi)細(xì)胞外沒有谷氨酸代謝酶，腦內(nèi)細(xì)胞外的谷氨酸穩(wěn)態(tài)的維持主要依靠高親和力興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體系統(tǒng)（excitatory amino acidtransporters,EAATs）。目前已經(jīng)克隆出了五種高親和力谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體：EAAT1(GLAST)、EAAT2、EAAT3(EAACl)、EAAT4、EAAT5。EAAT2主要分布于星形膠質(zhì)細(xì)胞膜上，又稱為膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1（glialglutamate transporter-1，GLT-1）。GLT-1在清除突觸間隙谷氨酸、維持谷氨酸低濃度、防止谷氨酸神經(jīng)毒性方面發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究目的之一：缺血前運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練是否通過GLT-1作用于谷氨酸系統(tǒng)而減輕腦缺血發(fā)生后的腦損傷。Watanabe等通過兩種腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ秃鸵环N細(xì)胞氧糖剝奪模型證明mitoKATP在腦缺血耐受機(jī)制中發(fā)揮重要作用。國(guó)內(nèi)學(xué)者Wang和Yang的研究表明：mitoKATP可通過作用于谷氨酸系統(tǒng)而誘發(fā)腦缺血耐受而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。近期研究表明：抑制mitoKATP能夠消除運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的抗心律失常作用，綜上所述，運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能夠通過mitoKATP所介導(dǎo)的信號(hào)通路而作用于谷氨酸系統(tǒng)而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。 關(guān)于mitoKATP的下游通路，有實(shí)驗(yàn)報(bào)道，PI3-K抑制劑wortmannin能夠消除mitoKATP激動(dòng)劑發(fā)揮的對(duì)抗谷氨酸系統(tǒng)神經(jīng)毒性而發(fā)揮的神經(jīng)保護(hù)作用。從而證明PI3-K在谷氨酸介導(dǎo)的腦缺血耐受機(jī)制中發(fā)揮重要作用。Matejíková等研究結(jié)果表明PI3-K/AKT參與了mitoKATP激動(dòng)劑所誘發(fā)的心臟缺血耐受機(jī)制。Li等研究結(jié)果表明，PI3-k能夠調(diào)控GLT-1在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)研究目的是研究運(yùn)動(dòng)預(yù)處理是否通過PI3/AKT作用于GLT-1，增強(qiáng)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸重?cái)z取能力，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)功能。 方法: SD雄性大鼠54只分為三組：假手術(shù)組（n=18），缺血組（n=18），運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練加缺血組（n=18）。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組大鼠經(jīng)過三周跑臺(tái)訓(xùn)練后與另外缺血組大鼠接受大腦中動(dòng)脈梗塞/再灌注的手術(shù)。術(shù)后24小時(shí)，每組6只大鼠用于神經(jīng)行為學(xué)評(píng)定后檢測(cè)腦梗死體積，每組6只大鼠用于westernblot檢測(cè)總蛋白激酶B（total-PKB，亦稱AKT）、磷酸化蛋白激酶B(P-PKB,亦稱p-AKT)及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）的水平，每組6只大鼠用于western blot檢測(cè)谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1（GLT-1）水平.神經(jīng)行為學(xué)評(píng)定及腦梗死體積采用t檢驗(yàn)比較缺血組與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練加缺血組之間的差異，其余各項(xiàng)指標(biāo)的組間比較均采用單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果:神經(jīng)功能缺損評(píng)定：由于假手術(shù)組并未真正發(fā)生腦缺血，故假手術(shù)組大鼠的神經(jīng)行為學(xué)評(píng)定均為0分。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練加缺血組的神經(jīng)功能缺損評(píng)分低于缺血組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 腦梗死體積：由于假手術(shù)組并未真正發(fā)生腦缺血，故假手術(shù)組大鼠的腦梗死體積均為0立方毫米。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練加缺血組的腦梗死體積小于缺血組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05） GLT-1蛋白表達(dá)水平：三組大鼠之間GLT-1表達(dá)水平有差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練加缺血組大鼠GLT-1表達(dá)水平高于缺血組大鼠GLT-1表達(dá)水平，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）； PI3K、P-AKT(p-PKB)蛋白表達(dá)水平：三組大鼠之間的P-AKT蛋白表達(dá)水平有差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練加缺血組的PI3K、P-AKT蛋白表達(dá)水平高于缺血組大鼠PI3K、 P-AKT蛋白表達(dá)水平，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）； 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明運(yùn)動(dòng)預(yù)處理通過PI3K/AKT作用于GLT-1，增強(qiáng)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)谷氨酸的重?cái)z取作用，減輕神經(jīng)毒性，，發(fā)揮腦缺血耐受功能。這一研究結(jié)果為缺血性腦卒中的預(yù)防和治療拓展了思路。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R743.31

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 孫竹梅;DNA-PKcs/Gadd45β及GAP-43/Nogo-A在不同運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度預(yù)處理腦缺血大鼠海馬區(qū)的表達(dá)及意義[D];華北理工大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2564808