【摘要】：第一部分 氯化鋰-匹羅卡品致癇慢性癲癇大鼠模型建立目的：建立氯化鋰-匹羅卡品慢性癲癇大鼠模型,通過行為學(xué)和腦電圖監(jiān)測,評價該模型的成功率。方法：采用6-8周成年SD大鼠,氯化鋰(127mg/kg)腹腔注射,24h后予以匹羅卡品(45mg/kg)腹腔注射,待模型組大鼠癲癇發(fā)作級別達到RacineⅣ級以上,并持續(xù)30min后地西泮(10mg/kg)終止癇性發(fā)作,對照組大鼠采用生理鹽水代替匹羅卡品腹腔注射。于建模后第10天開始Video連續(xù)120h監(jiān)測慢性癲癇組和對照組行為學(xué)變化,了解大鼠癇樣發(fā)作情況,于造模后第28天采用腦電圖(EEG)檢測慢性癲癇組大鼠和同期對照組大鼠1.5h的腦電情況。結(jié)果：本實驗共致癇大鼠14只,對照組6只,致癇組中13只大鼠于注射匹羅卡品后約20-35min出現(xiàn)癇樣發(fā)作,發(fā)作級別達到RacineⅣ級以上,并持續(xù)30min,致癇組中3只于建模后1周內(nèi)死亡,癲癇持續(xù)狀態(tài)(Status epilepticus, SE)建模成功率為71.4%,對照組大鼠均未出現(xiàn)癇樣發(fā)作或死亡。于建模后12±2天,可觀察到致癇組大鼠面部咀嚼運動、點頭運動或一側(cè)前肢陣攣；且呈自發(fā)性反復(fù)性發(fā)作(spontaneous recurrent seizures, SRS)。視頻錄像分析發(fā)現(xiàn)致癇組7只大鼠出現(xiàn)RacineⅢ級以上癇性發(fā)作,3只有RacineⅡ級癇性發(fā)作,同期對照組無癇樣發(fā)作情況,慢性癲癇組入組7只大鼠,慢性癲癇(spontaneous recurrent seizures, SRS)模型建模成功率為50%。建模后第21天,對慢性癲癇組和對照組大鼠均進行腦電極埋放手術(shù),術(shù)后3天內(nèi)慢性癲癇組3只未達RacineⅢ級以上癇性發(fā)作的大鼠死亡,對照組死亡1只。于建模后第28天,腦電圖結(jié)果提示對照組大鼠腦電圖基本節(jié)律以a,p波為主,少量e,6波,并且未觀察到尖波發(fā)放,癲癇組的腦電圖檢測以θ,δ波為主,α,p波減少,并且觀察到尖波發(fā)放。結(jié)論：本實驗成功建立氯化鋰-匹羅卡品致癇慢性癲癇模型,癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)建模成功率為71.4%,慢性癲癇(SRS)模型建模成功率為50%。第二部分 氯化鋰-匹羅卡品致病慢性癲癇大鼠與同期對照大鼠海馬區(qū)DTI隨訪研究目的：本研究采用核磁共振擴散張量成像(Diffusion Tensor Imaging, DTI)技術(shù)檢測并比較氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)的慢性癲癇大鼠組及正常對照組在建模前后海馬區(qū)的改變情況。方法：慢性癲癇大鼠模型建立及分組同第一部分。在氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇建模前7天和建模后第56±4天,用GE公司3.0 T磁共振掃描儀對兩組大鼠進行T1WI, T2WI和DTI檢查,并用Image J軟件采用ROI (region of interest)法測量并比較慢性癲癇組和對照組大鼠海馬區(qū)域的ADC值((Apparent diffusion coefficient, ADC)及FA值(Fractional anisotropy, FA)。結(jié)果：建模前7天致癇組(n=7)ADC值和FA值較對照組(n=5)ADC值和FA值無統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05。慢性癲癇(SRS)組大鼠建模后2月ADC值為10.686E-10±3.121E-10較建模前7天ADC值：6.493E-10±1.451E-10,ADC值顯著升高,P0.01。慢性癲癇(SRS)組大鼠建模后2月FA值為0.370±0.127較建模前7天FA值：0.459±0.080,FA值顯著下降,P0.01。對照組大鼠建模后2月ADC值和FA值較建模前7天ADC值和FA值無統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05。慢性癲癇(SRS)組大鼠建模后2月ADC值為10.686E-10±3.121E-10較同期對照組ADC值：7.258E-10±0.576E-10,ADC值顯著升高,P0.01。慢性癲癇(SRS)組大鼠建模后2月FA值為0.370±0.127較同期對照組FA值：0.419±0.135,FA值顯著下降,P0.05。結(jié)論：DTI檢測結(jié)果顯示氯化鋰-匹羅卡品致慢性癲癇模型組致癇2月后海馬區(qū)較正常對照組FA值顯著下降,ADC值顯著升高,提示海馬區(qū)域可能存在白質(zhì)損傷。第三部分 氯化鋰-匹羅卡品致癇慢性癲癇大鼠與同期對照大鼠海馬區(qū)少突膠質(zhì)細胞變化的研究目的：采用免疫熒光染色法研究慢性癲癇組和對照組大鼠海馬區(qū)域少突膠質(zhì)細胞及其前體細胞的變化,探討海馬區(qū)域DTI改變的可能機制。方法：慢性癲癇大鼠模型建立及分組同第一部分,于建模后第56±4天DTI掃描后,進行大鼠灌流取腦組織制備冰凍切片,采用免疫熒光染色方法和計算機軟件Image Pro Plus進行定量分析和比較慢性癲癇組和同期對照組海馬區(qū)域髓鞘堿性蛋白(Myelin basic protein, MBP)和硫酸軟骨素蛋白多糖(Chondroitin sulfate proteoglycan NG2)的表達情況。結(jié)果：慢性癲癇(SRS)組MBP在海馬CA1區(qū)熒光強度為0.0235±0.000842較同期對照組0.0315±±0.000780,顯著下降,P0.01。慢性癲癇(SRS)組MBP在海馬CA3區(qū)熒光強度為0.0190±±0.000947較同期對照組0.0271±0.00104,顯著下降,P0.0l。慢性癲癇(SRS)組MBP在海馬DG區(qū)熒光強度為0.0149±0.000901較同期對照組0.0282±0.000862,顯著下降,P0.01。慢性癲癇(SRS)組NG2在海馬CA1區(qū)熒光強度為0.00456±0.000291較同期對照組0.00320±0.000390,顯著升高,P0.05。慢性癲癇(SRS)組NG2在海馬CA3區(qū)熒光強度為0.00319±0.000178較同期對照組0.00196±0.000170,顯著升高,P0.01。慢性癲癇(SRS)組NG2在海馬DG區(qū)熒光強度為0.00923±0.000591較同期對照組0.00257±0.000273,顯著升高,P0.01。結(jié)論：氯化鋰-匹羅卡品致慢性癲癇模型組海馬CA1, CA3, DG區(qū)MBP較正常對照組顯著下降,NG2較正常對照組顯著升高,提示海馬區(qū)域少突膠質(zhì)細胞可能參與了海馬區(qū)域的白質(zhì)損傷。全文小結(jié)1.本實驗成功建立氯化鋰-匹羅卡品致癇慢性癲癇模型,慢性癲癇(SRS)模型建模成功率為50%。2.本實驗DTI檢測結(jié)果顯示氯化鋰-匹羅卡品致慢性癲癇模型組海馬區(qū)FA值較正常對照組顯著下降,ADC值顯著升高,提示海馬區(qū)域可能存在白質(zhì)損傷。3.本實驗氯化鋰-匹羅卡品致慢性癲癇模型組海馬區(qū)MBP較正常對照組顯著下降,NG2較正常對照組顯著升高,提示海馬區(qū)域少突膠質(zhì)細胞可能參與了海馬區(qū)域的白質(zhì)損傷。
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【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R742.1

【參考文獻】

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1 張泉;張云亭;張敬;李威;郭慧;張權(quán);;MR擴散張量成像在顳葉癲癇的初步研究[J];臨床放射學(xué)雜志;2007年10期

2 白卓杰;張志強;盧光明;鐘元;成文蓮;王正閣;陳志立;朱建國;;基于體素分析的擴散張量成像在內(nèi)側(cè)顳葉癲癇中的應(yīng)用[J];臨床放射學(xué)雜志;2009年07期

3 伍猶梁;梁軍潮;詹純列;楊傳紅;賴晃文;吳小麗;王捷;肖育華;;鋰-匹羅卡品顳葉癲沲模型的建立及苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2009年06期

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本文編號：2369180