【摘要】：背景：偏頭痛是一種以單側(cè)、搏動(dòng)性為特征，疼痛程度為中重度的原發(fā)性頭疼。根據(jù)發(fā)作的頻率分為發(fā)作性偏頭痛及慢性偏頭痛。把偏頭痛發(fā)作頻率每個(gè)月多于15天，持續(xù)3個(gè)月以上，且沒(méi)有藥物濫用，稱之為慢性偏頭痛（Chronic Migraine，CM）（國(guó)際頭痛疾病分類第二版（ICHD－Ⅱ））。慢性偏頭痛是一種常見病和多發(fā)病,在普通人群中的患病率為1-3%，每年有2.5%的偏頭痛患者發(fā)展為CM，已被WHO列為四大最嚴(yán)重的慢性功能障礙性疾病之一。 CM發(fā)病機(jī)制尚不明確，但目前多數(shù)觀點(diǎn)認(rèn)為神經(jīng)源性炎癥引起的“中樞致敏”與慢性偏頭痛發(fā)病密切相關(guān)。最近研究提示神經(jīng)源性炎癥可引起NR2B亞基的N-methyl-D-aspartate受體（NMDAR）異常激活，對(duì)疼痛的維持至關(guān)重要。近期研究表明慢性疼痛的維持中， NR2B酪氨酸磷酸化為最主要的原因之一。 慢性偏頭痛主要與血管活性物質(zhì)降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）有關(guān)，CGRP具有擴(kuò)張顱內(nèi)血管的作用，因此被稱為三叉神經(jīng)微血管激活的標(biāo)志物，偏頭痛發(fā)作時(shí)血液和腦脊液中的CGRP明顯升高。 既然慢性偏頭痛與神經(jīng)源性炎癥引起的中樞致敏有關(guān)。NMDAR的異常激活在炎癥引起的疼痛及痛覺(jué)維持起重要的作用，且可調(diào)節(jié)CGRP釋放，而NR2B酪氨酸磷酸化在很大程度上決定著NMDAR的性質(zhì)慢性疼痛的維持。于是我們提出假設(shè)，NR2B酪氨酸磷酸化參與慢性偏頭痛的發(fā)生，并探討NR2B是否通過(guò)影響CGRP的釋放參與慢性偏頭痛的發(fā)生，以期為臨床治療提供新的治療靶點(diǎn)。 方法： 1、采用56只清潔級(jí)雄性SD大鼠為研究對(duì)象，建立反復(fù)發(fā)作偏頭痛大鼠模擬慢性偏頭痛發(fā)作。 分組： A：Sham組（13只），大鼠硬腦膜滴注20μl PBS，側(cè)腦室5μl PBS； B：CM組（3只），大鼠硬腦膜滴注20μl炎癥湯及硝酸甘油造模； C：CM+vehicle組（10只），大鼠硬腦膜滴注20μl炎癥湯造模，造模完成后側(cè)腦室注射5μl的PBS； D：CM+genistien高劑量組（0.1μl/kg，10只），在CM的大鼠模型基礎(chǔ)上側(cè)腦室注射5μl高濃的genistien； E：CM+genistien低劑量組（0.01μl/kg，10只），在CM的大鼠模型基礎(chǔ)上側(cè)腦室注射5μl高濃的genistien； F：CM+genistien+CGRP組（10只），在CM的大鼠模型基礎(chǔ)上側(cè)腦室注射5μl高濃的genistien同時(shí)給予CGRP激動(dòng)劑。 2、用行為學(xué)及疼痛閾值的變化評(píng)價(jià)治療效果，ELISA檢測(cè)CGRP及NO水平； 3、免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)、Western Blot觀察三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)NR2B酪氨酸磷酸化表達(dá)水平（NR2B-pTry）。 結(jié)果： 1、由炎癥湯及硝酸甘油建成的慢性偏頭痛組較假手術(shù)組的撓頭次數(shù)明顯增多，疼痛閾值明顯減低；予以高劑量NR2B酪氨酸磷酸化抑制劑后疼痛閾值升高，撓頭次數(shù)減少。 2、Western blot檢測(cè)NR2B酪氨酸磷酸化水平，ELISA檢測(cè)CGRP及NO水平結(jié)果顯示。CM+vehicle組NR2B酪氨酸磷酸化水平較假手術(shù)組明顯增高，，予以NR2B酪氨酸磷酸化抑制劑后NR2B酪氨酸磷酸化水平降低。CM+vehicle組CGRP及NO水平較假手術(shù)組升高，予以NR2B酪氨酸磷酸化抑制劑后明顯降低，在給以genistein+CGRP激動(dòng)劑后抑制了降低CGRP及NO的這種保護(hù)作用。 3、免疫熒光雙標(biāo)檢測(cè)NR2B酪氨酸磷酸化定位。結(jié)果顯示CM+vehicle組NR2B酪氨酸磷酸化水平較假手術(shù)組在神經(jīng)元上的表達(dá)增高。 結(jié)論： 1、利用炎癥湯及硝酸甘油構(gòu)建反復(fù)發(fā)作偏頭痛模型模擬慢性偏頭痛發(fā)作模型成功； 2、NR2B酪氨酸磷酸增高促進(jìn)慢性偏頭痛的發(fā)生； 3、NR2B酪氨酸磷酸通過(guò)調(diào)節(jié)CGRP釋放參與慢性偏頭痛的發(fā)生。
[Abstract]:BACKGROUND: Migraine is a primary headache with moderate to severe pain, characterized by unilateral and pulsatile nature. The frequency of onset is divided into the onset of migraine and the chronic migraine. The frequency of migraine attack is more than 15 days per month, lasting for more than 3 months, and there is no drug abuse, called chronic migraine (CM) (International Headache Disease Classification Second Edition (ICHD-II)). Chronic migraine is a common disease and a disease. The prevalence of chronic migraine is 1-3% in the general population. The pathogenesis of CM is not clear, but most of the current point of view is that the 鈥渃entral sensitization鈥

本文編號(hào)：2351691