【摘要】：目的：癲癇是神經(jīng)系統(tǒng)中一種常見的綜合征，可發(fā)生于各個年齡階段的人群，流行病學(xué)調(diào)查顯示：全世界大約有5000萬癲癇患者，我國的癲癇患病率為3.5‰-4.8‰。癲癇具有反復(fù)發(fā)作的特點(diǎn)，其病理生理基礎(chǔ)是腦部神經(jīng)元高度同步化異常放電導(dǎo)致正常的生理功能紊亂。短暫的反復(fù)發(fā)作或者一次持續(xù)發(fā)作均可導(dǎo)致嚴(yán)重的神經(jīng)元凋亡,尤其是海馬等邊緣系統(tǒng)的神經(jīng)元凋亡更為明顯。研究表明，神經(jīng)元凋亡和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增多能夠促使海馬硬化，海馬硬化導(dǎo)致癲癇頻繁發(fā)作甚至形成難治性癲癇。因此，深入研究癲癇發(fā)作后神經(jīng)元凋亡的分子機(jī)制，探索新型有效的抗神經(jīng)元凋亡的藥物具有深遠(yuǎn)的意義。 本實(shí)驗(yàn)以杏仁核電點(diǎn)燃的慢性癲癇大鼠模型作為研究對象，以α-硫辛酸（α-lipoic acid,α-LA）作為干預(yù)劑。分別檢測大鼠點(diǎn)燃前后的后發(fā)放閾值（ADT)，達(dá)到每個發(fā)作等級所需的累積刺激數(shù)及累積后發(fā)放持續(xù)時間(ADD)，應(yīng)用Western Blot方法檢測p38MAPK及p-p38MAPK在海馬組織中的表達(dá)情況，應(yīng)用流式細(xì)胞分析碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)染色技術(shù)檢測海馬神經(jīng)元凋亡率。從而研究α-LA對杏仁核電點(diǎn)燃癲癇大鼠的行為及海馬p38MAPK表達(dá)的影響，并初步探討α-LA對杏仁核電點(diǎn)燃致癇大鼠的腦保護(hù)作用及分子機(jī)制。 方法：選用雄性健康清潔的Wistar大鼠36只，體重在250-300g之間。隨機(jī)分為正常對照組:不予以任何處理；α-LA組：每天給予α-LA（40mg/kg）腹腔注射一次；假手術(shù)組：杏仁核植入電極后不予以任何處理；電刺激模型組：植入電極后每天給予120%的點(diǎn)燃前ADT刺激一次；電刺激+α-LA低劑量組：植入電極后每天給予α-LA （20mg/kg）腹腔注射30min后以120%的點(diǎn)燃前ADT刺激一次；電刺激+α-LA高劑量組：植入電極后每天給予α-LA （40mg/kg）腹腔注射30min后以120%的點(diǎn)燃前ADT刺激一次，連續(xù)刺激15天，每組6只大鼠。依據(jù)Racine六級評價標(biāo)準(zhǔn)觀察大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)，記錄大鼠每天的發(fā)作等級及ADD。造模結(jié)束后對大鼠采用斷頭取腦并快速分離海馬組織，用Western Blot方法檢測p38MAPK及p-p38MAPK的表達(dá)水平，并用流式細(xì)胞術(shù)PI染色技術(shù)檢測海馬神經(jīng)元凋亡率。 結(jié)果： 1.行為學(xué)觀察①達(dá)到第一次Ⅴ級發(fā)作所需的累積電刺激數(shù)：與模型組（10.17±0.31）相比，電刺激+α-LA高劑量組（11.50±0.43）明顯增多（P0.05）；電刺激+α-LA低劑量組（11.17±0.31）與模型組和電刺激+α-LA高劑量組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05)。②達(dá)到第一次Ⅴ級發(fā)作所需的累積ADD：與模型組（235.83±5.00）相比，電刺激+α-LA低劑量組（191.17±5.82）和電刺激+α-LA高劑量組（184.83±7.60）明顯縮短（P0.05）；電刺激+α-LA高劑量組與電刺激+α-LA低劑量組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。③點(diǎn)燃前后的ADT：模型組點(diǎn)燃后的ADT（133.33±12.29）較點(diǎn)燃前（273.33±24.59）明顯降低（P0.05）；電刺激+α-LA高劑量組點(diǎn)燃后的ADT（200.00±17.13）較點(diǎn)燃前（286.67±22.31）明顯降低（P0.05）；電刺激+α-LA低劑量組點(diǎn)燃后ADT（153.33±19.78）較點(diǎn)燃前（280.00±30.55）明顯降低（P0.05）。④點(diǎn)燃后ADT：與模型組相比，電刺激+α-LA高劑量組明顯增高（P0.05）；電刺激+α-LA低劑量組與模型組和電刺激+α-LA高劑量組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。假手術(shù)組、正常對照組、α-LA組大鼠均無癲癇發(fā)作。 2.Western Blot檢測結(jié)果假手術(shù)組、正常對照組、α-LA組的海馬組織內(nèi)p-p38MAPK表達(dá)水平分別為0.55±0.06、0.62±0.05、0.64±0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。與電刺激+α-LA低劑量組(2.20±0.04)和電刺激+α-LA高劑量組(1.26±0.93)相比，模型組海馬p-p38MAPK表達(dá)水平(3.39±0.09)明顯增高（P0.05）；與電刺激+α-LA高劑量組相比，電刺激+α-LA低劑量組的海馬p-p38MAPK表達(dá)水平明顯增高（P0.05）；與假手術(shù)組、正常對照組、α-LA組相比，模型組、電刺激+α-LA低劑量組、電刺激+α-LA高劑量組的海馬p-p38MAPK表達(dá)水平明顯增高（P0.05）。 3. PI染色結(jié)果假手術(shù)組、正常對照組、α-LA組的海馬神經(jīng)元凋亡率分別為1.91±0.60、1.72±0.46、1.53±0.37，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。與電刺激+α-LA低劑量組(11.71±0.52)和電刺激+α-LA高劑量組(8.65±0.38)相比，模型組海馬神經(jīng)元凋亡率（14.83±0.60）明顯增高（P0.05）；與電刺激+α-LA高劑量組相比，電刺激+α-LA低劑量組的海馬神經(jīng)元凋亡率明顯增高（P0.05）；與假手術(shù)組、正常對照組和α-LA組相比，模型組、電刺激+α-LA低劑量組、電刺激+α-LA高劑量組的海馬神經(jīng)元凋亡率明顯增高（P0.05）。 結(jié)論: 1.本實(shí)驗(yàn)采用杏仁核電點(diǎn)燃方法成功建立了慢性癲癇大鼠模型。 2.癲癇發(fā)作可導(dǎo)致海馬組織中p-p38MAPK表達(dá)上調(diào)、神經(jīng)元凋亡數(shù)量增加。 3.α-硫辛酸能夠降低癲癇發(fā)作等級、縮短后發(fā)放持續(xù)時間、下調(diào)海馬組織內(nèi)p-p38MAPK的表達(dá)水平、降低神經(jīng)元凋亡率。從而推測α-硫辛酸可能通過抗凋亡途徑來發(fā)揮癲癇后的神經(jīng)保護(hù)作用，，進(jìn)而降低癲癇大鼠對電刺激的敏感性。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R742.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 閔運(yùn)兵;王丹;黃燕萍;;α-硫辛酸治療糖尿病足17例療效觀察[J];廣東醫(yī)學(xué);2009年01期

2 許娟;高云;岳峰;;α-硫辛酸對糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血管內(nèi)皮生長因子的影響[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2012年04期

3 黃濤,黃開勛;α-硫辛酸的生物醫(yī)學(xué)功能[J];生命的化學(xué);2004年01期

4 劉紅林 ,牛勃 ,常冰梅 ,程牛亮 ,許言午 ,趙建濱;α-硫辛酸與維生素C和維生素E的抗氧化作用比較[J];中國藥物與臨床;2005年01期

5 劉赫;;α-硫辛酸的臨床應(yīng)用[J];實(shí)用糖尿病雜志;2007年01期

6 張鴻;董風(fēng)其;;α-硫辛酸治療糖尿病性周圍神經(jīng)病變的療效觀察[J];中國實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2007年07期

7 楊慶平;王翼華;鐘國慶;;α-硫辛酸注射液治療糖尿病性周圍神經(jīng)病變療效觀察[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊);2008年22期

8 李安林;;α-硫辛酸的研究進(jìn)展[J];食品科技;2008年04期

9 王翼華;丁燕萍;楊慶平;;α-硫辛酸對2型糖尿病微血管病變保護(hù)作用探討[J];中國誤診學(xué)雜志;2009年15期

10 曹萌;王濤;陳雪輝;;α-硫辛酸、溴吡斯的明聯(lián)合治療糖尿病神經(jīng)源性膀胱療效觀察[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2011年15期

相關(guān)會議論文 前10條

1 葉文銳;仲偉鑒;肖萍;帥怡;;α-硫辛酸的延緩衰老作用研究進(jìn)展[A];第四屆第二次中國毒理學(xué)會食品毒理學(xué)專業(yè)委員會與營養(yǎng)食品所毒理室聯(lián)合召開學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

2 陳新愛;;α-硫辛酸的生物合成研究進(jìn)展[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會2005年學(xué)術(shù)大會、青年學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2005年

3 孟馨;李志明;周一軍;曹艷麗;張錦;;α-硫辛酸對高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

4 馬愛勤;;α-硫辛酸的功能與臨床應(yīng)用[A];山東營養(yǎng)學(xué)會營養(yǎng)產(chǎn)業(yè)與功能食品成分學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2007年

5 喻道軍;徐兆發(fā);王雨;賀安寧;徐斌;楊敬華;;α-硫辛酸和�；撬釋︽k致毒性影響的實(shí)驗(yàn)[A];中國毒理學(xué)會第四屆全國學(xué)術(shù)會議論文（摘要）集[C];2005年

6 吳晨光;沈莉敏;姚翡;柳迎昭;;α-硫辛酸對糖尿病大鼠腎臟保護(hù)作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

7 湯智慧;王波;郭代紅;黃清杰;熊娜;;α-硫辛酸注射液不良反應(yīng)的發(fā)生率及相關(guān)因素分析[A];2012年全國醫(yī)院藥學(xué)學(xué)術(shù)年會暨第72屆世界藥學(xué)大會衛(wèi)星會論文集[C];2012年

8 董維平;丁曉穎;彭永德;程群;王育瑤;;α-硫辛酸對脂肪細(xì)胞引致的胰島炎癥的保護(hù)作用[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

9 顧北令;陳峰;趙瑛;;α-硫辛酸對糖尿病神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)蛋白激酶C活性的影響[A];中國病理生理學(xué)會受體、腫瘤和免疫專業(yè)委員會聯(lián)合學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

10 湯正義;曹相林;寧光;魯艷;;α-硫辛酸對糖尿病神經(jīng)病變的治療作用和臨床應(yīng)用展望[A];2006第六屆中國藥學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 董銀華;α-硫辛酸對大鼠腦缺血再灌注損傷影響及機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

2 謝翠松;α-硫辛酸與丹參治療糖尿病下肢血管病變的療效比較及可能機(jī)制探討[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

3 姜蘇蓉;α-硫辛酸對活性氮介導(dǎo)心肌損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

4 李大偉;α-硫辛酸對帕金森病細(xì)胞模型保護(hù)作用的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2013年

5 鄧超;α-硫辛酸抗大鼠心肌缺血再灌注損傷中的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

6 喻道軍;α-硫辛酸、�；撬釋︽k致大鼠氧化損傷和Bax、JNK基因RNAi對鎘致293細(xì)胞凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李博鵬;α-硫辛酸對糖尿病周圍神經(jīng)病變患者循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 李琳琳;α-硫辛酸治療糖尿病心臟自主神經(jīng)病變患者的臨床療效觀察[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

3 韓濤;α-硫辛酸對鎘致大鼠肝腎損傷的保護(hù)作用[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

4 張曉;α-硫辛酸在小鼠卵母細(xì)胞老化過程中的作用[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

5 段良興;苯酞類及α-硫辛酸類衍生物的合成及其活性研究[D];中國海洋大學(xué);2015年

6 周偉佳;6-羥基-8-氯辛酸乙酯的非水相酶促拆分[D];華東理工大學(xué);2013年

7 楊沫;α-硫辛酸對糖尿病心肌病患者心功能及相關(guān)生化指標(biāo)影響的臨床觀察[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

8 張銘予;α-硫辛酸對2型糖尿病腎病患者血清TNFR1濃度和尿PCX排泄的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

9 王菲;H_2O_2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞氧化應(yīng)激對脫碘酶活性的影響及α-硫辛酸干預(yù)作用的機(jī)制探究[D];江南大學(xué);2016年

10 李玉桂;α-硫辛酸治療2型糖尿病周圍神經(jīng)病變的療效及機(jī)制探討[D];石河子大學(xué);2016年

本文編號：2255215