本文選題：高壓氧 + 不同介入時(shí)間　； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：目的：高壓氧治療（Hyperbaric oxygen therapy，HBOT）定義為在超過(guò)1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓（Atmospheric pressure）的高氣壓艙內(nèi)，患者通過(guò)呼吸與艙內(nèi)壓力一致的純氧或混合氧，增加機(jī)體內(nèi)氧含量以達(dá)到治療疾病的物理治療方法。腦出血（Intracerebral hemorrhage，ICH）是指原發(fā)的非外界暴力引起的腦實(shí)質(zhì)內(nèi)的出血，在急性腦血管疾病的發(fā)病中約占20%-30%，發(fā)病后急性期內(nèi)的患者有較高的病死率約為30%-40%。手術(shù)減壓治療已成為公認(rèn)的挽救腦出血急性期患者生命的重要治療方法，但目前尚未證明任何藥物或手術(shù)治療對(duì)腦出血的患者有明確有效的治療效果。腦出血后發(fā)生的一連串由原發(fā)性損害及繼發(fā)性損害引起腦水腫，是腦出血后最主要的繼發(fā)性病理生理過(guò)程，常引起神經(jīng)損傷的再次惡化，導(dǎo)致死亡率增加，因此減輕腦水腫已成為臨床上治療腦出血的主要目標(biāo)。臨床及基礎(chǔ)研究顯示腦出血后介入高壓氧治療可減輕腦水腫，促進(jìn)患者受損的神經(jīng)功能得到改善，但目前并無(wú)大量臨床及基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)的支持。 由四聚體結(jié)構(gòu)組成的水通道蛋白(Aquaporins，AQPs)是具有維持細(xì)胞內(nèi)外水平衡的一種轉(zhuǎn)運(yùn)膜蛋白，其主要通過(guò)改變細(xì)胞膜對(duì)水分子通透能力發(fā)揮作用。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system，CNS)中水通道蛋白4主要分布在星形膠質(zhì)細(xì)胞和室管膜細(xì)胞的細(xì)胞膜上，其次它也大量表達(dá)在下丘腦的室旁核、視上核及口渴中樞所在的區(qū)域。研究發(fā)現(xiàn)，AQP4表達(dá)水平的升高，可以使血腦屏障對(duì)水分子的通透性增加，參與了因血腦屏障破壞而導(dǎo)致腦組織水腫產(chǎn)生的過(guò)程。有基礎(chǔ)研究顯示，高壓氧治療可以降低腦出血后的腦水腫的程度，可能與其降低出血灶周圍AQP4含量有關(guān)。 本課題組的前期研究顯示腦出血大鼠在2.0絕對(duì)大氣壓（Atmosphereabsolute，ATA）的壓力下行高壓氧治療的療效最好。本實(shí)驗(yàn)的腦出血大鼠的模型采用膠原酶誘導(dǎo)法建立，高壓氧治療壓力采用2.0ATA，研究不同時(shí)間點(diǎn)介入高壓氧治療對(duì)腦水含量及AQP4變化的影響，探討腦出血后何時(shí)介入高壓氧治療效果最佳。 方法： 1動(dòng)物分組：將185只Wista大鼠隨機(jī)分為正常組（Normal）5只、假手術(shù)組（Sham）60只、腦出血對(duì)照組（Control）60只和高壓氧治療組（HBO）60只。高壓氧治療組，按不同的高壓氧治療介入時(shí)間分為6h介入組（HBO+6h）、1d介入組（HBO+1d）、2d介入組（HBO+2d）和3d介入組（HBO+3d）4個(gè)亞組，每組15只，再按不同的治療次數(shù)分為高壓氧治療后1d、3d、5d組，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各5只，制模成功后按不同的介入時(shí)間放入高壓氧艙內(nèi)進(jìn)行治療，高壓氧組進(jìn)行吸氧治療，1次/d，各HBO治療組大鼠分別于高壓氧治療結(jié)束24小時(shí)后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死。假手術(shù)組、腦出血對(duì)照組分組與HBO治療組相同。正常組、假手術(shù)組和腦出血對(duì)照組不進(jìn)行任何治療，與HBO治療組大鼠在相同時(shí)間點(diǎn)處死。 2大鼠腦出血模型的制備：選用大鼠尾殼核內(nèi)定位注射Ⅶ型膠原酶法造模型。 3神經(jīng)功能的評(píng)定：在大鼠腦出血模型制備6h后，采用LongaFZ評(píng)分法，對(duì)腦出血后的大鼠進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分：0分，無(wú)任何明顯體征；1分，不能完全伸展進(jìn)針對(duì)側(cè)肢體（左側(cè)）；2分，進(jìn)針對(duì)側(cè)肢體癱瘓，向進(jìn)針對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)圈，有追尾現(xiàn)象；3分，不能站立向進(jìn)針對(duì)側(cè)傾倒；4分，有意識(shí)障礙。2分以上認(rèn)為造模成功。 4高壓氧治療：高壓氧治療組大鼠于術(shù)后6h評(píng)分確定造模成功后于相應(yīng)的介入時(shí)間進(jìn)艙治療。將動(dòng)物放置于特制的木箱中，木箱置于高壓氧艙內(nèi)，壓力設(shè)定在2.0ATA，30分鐘加壓時(shí)間,達(dá)到穩(wěn)壓前的5分鐘采用直排式給氧，氧流量設(shè)定為10L/min（穩(wěn)壓時(shí)氧濃度可達(dá)90%），穩(wěn)壓吸氧60分鐘，停止吸氧，開始減壓，速率約為0.01Mpa/min，1次/d。 5腦出血后出血灶周圍腦組織的水含量應(yīng)用干濕比重法檢測(cè)，血腫周圍腦組織中AQP4的表達(dá)量則利用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)。 結(jié)果：出血灶周圍腦水含量測(cè)定的結(jié)果：各時(shí)間點(diǎn)的假手術(shù)組大鼠腦組織的水含量雖較正常組大鼠（73.49±0.89%）有升高的趨勢(shì)，但差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而對(duì)照組和高壓氧治療組各時(shí)間點(diǎn)大鼠出血灶周圍腦組織水含量均高于正常組及假手術(shù)組大鼠腦水含量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。對(duì)照組可觀察到腦出血后大鼠血腫周圍的腦組織水含量在腦出血后第1天開始升高，3天達(dá)到高峰，之后逐漸下降。高壓氧治療組各時(shí)間點(diǎn)腦水含量均較對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。高壓氧治療組之間的比較：HBO+6h在高壓氧治療1d后，腦組織水含量明顯降低，且這種差異一直延續(xù)到高壓氧治療3d、5d后，，與HBO+1d、HBO+2d或HBO+3d比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；HBO+1d在高壓氧治療1d后，腦組織水含量降低，并持續(xù)到高壓氧治療3d和5d后，與HBO+2d或HBO+3d比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；但HBO+2d與HBO+3d比較腦組織水含量減輕不明顯（P＞0.05）。 2出血灶周圍AQP4表達(dá)的結(jié)果：假手術(shù)組大鼠腦組織中反映AQP4表達(dá)水平的OD值于各時(shí)間點(diǎn)雖較正常組大鼠（0.076±0.011）有升高趨勢(shì)，但差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而對(duì)照組和高壓氧治療組各時(shí)間點(diǎn)大鼠出血灶周圍反映AQP4表達(dá)水平的OD值均高于正常組及假手術(shù)組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。由對(duì)照組可觀察到腦出血后大鼠出血灶周圍腦組織中AQP4的含量在腦出血后1天開始升高，3天達(dá)到高峰，之后逐漸下降。高壓氧治療組各組大鼠出血灶周圍腦組織中AQP4的含量均較對(duì)照組減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。高壓氧治療組之間比較：HBO+6h在高壓氧治療1天后，AQP4表達(dá)明顯減少，且這種差異一直持續(xù)到高壓氧治療3d、5d后，與HBO+1d、HBO+2d或HBO+3d比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；HBO+1d在高壓氧治療1天后，AQP4表達(dá)減少，并持續(xù)到高壓氧治療3d、5d后，與HBO+2d或HBO+3比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；但HBO+2d與HBO+3d比較AQP4表達(dá)的減少不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 結(jié)論：通過(guò)尾殼核內(nèi)注入膠原酶法建立腦出血大鼠模型，觀察不同高壓氧介入治療時(shí)間對(duì)腦出血大鼠出血灶周圍腦組織水含量及AQP4表達(dá)水平的變化。驗(yàn)證了腦出血后出血灶周圍腦水含量的變化與AQP4表達(dá)水平的變化相一致，同時(shí)說(shuō)明高壓氧在腦出血的輔助治療中，特別是對(duì)腦出血后繼發(fā)性腦水腫的治療療效是肯定的，且早期介入高壓氧治療可明顯減輕腦水腫的程度，其機(jī)制可能與抑制了出血灶周圍AQP4的表達(dá)水平相關(guān)。
[Abstract]:Objective : Hyperbaric oxygen therapy ( HBOT ) is defined as the physical therapy for the treatment of cerebral hemorrhage .

Aquaporins ( AQPs ) , which are composed of tetrameric structures , are a kind of transport membrane protein which maintains the water balance inside and outside the cell . The water channel protein 4 in the central nervous system ( CNS ) is mainly distributed on the cell membrane of astrocytes and dymal cells .

The results showed that the effect of hyperbaric oxygen therapy on cerebral hemorrhage in rats with intracerebral hemorrhage was the best . The model of intracerebral hemorrhage rats was established by collagenase method . The effect of hyperbaric oxygen therapy on the contents of cerebral water and AQP4 was studied at different time points .

Method :

Group of HBO + 1d , HBO + 1d , HBO + 2d and HBO + 3d were divided into two groups : HBO + 6h , HBO + 1d , HBO + 2d and HBO + 3d .

2 . Preparation of rat model of intracerebral hemorrhage : A rat tail shell was used to locate the model of collagenase type VII injection .

( 3 ) Evaluation of neurological function : After 6 hours of rat intracerebral hemorrhage model , Longaz scoring method was used to score the behavioral score of rats following intracerebral hemorrhage : 0 , no obvious signs ;
1 minute , not fully extended into the contralateral limb ( left ) ;
2 points , the entry to the side limb paralysis , the forward to the side turn , has the tail phenomenon ;
3 points , unable to stand to the entrance to the side dumping ;
4 points , conscious obstacle . Above thought to be successful .

4 Hyperbaric oxygen therapy : After 6 hours after operation of hyperbaric oxygen therapy group , the rats were treated with the corresponding intervention time . The animals were placed in special wooden cases . The wooden cases were placed in the hyperbaric oxygen chamber . The pressure was set at 2.0ATA and 30 minutes . The pressure was set to 10L / min ( the oxygen concentration can reach 90 % when the pressure is regulated ) , the oxygen flow is regulated for 60 minutes , oxygen inhalation is stopped , the pressure is started , and the rate is about 0.01 Mpa / min and 1 time / d .

The water content of brain tissue surrounding the hemorrhage after intracerebral hemorrhage was detected by dry - wet specific gravity method . AQP4 expression in brain tissue around hematoma was detected by immunohistochemical method .

Results : The water content in brain tissue of rats in sham operation group was higher than that in normal group ( 73.49 鹵 0.89 % ) , but the difference was not statistically significant ( P > 0.05 ) .
HBO + 1d decreased in brain tissue after treatment with hyperbaric oxygen ( HBO + 1d ) and lasted for 3 days and 5 days after hyperbaric oxygen therapy ( P0.05 ) .
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本文編號(hào)：2002085