本文選題：皮質(zhì)神經(jīng)元 + 原代培養(yǎng)�。� 參考：《神經(jīng)損傷與功能重建》2016年06期

【摘要】：目的:建立一種簡(jiǎn)便高效的原代神經(jīng)元培養(yǎng)方法。方法:出生12 h內(nèi)的Wistar乳鼠,分離皮質(zhì)后剪碎,0.25%胰酶消化30 min,漂洗后輕柔吹散細(xì)胞,過(guò)濾后1 000 rpm離心5 min,棄上清,加接種液吹勻后過(guò)濾,靜置3~5 min,取上層液體計(jì)數(shù)并接種。接種后4、45、96 h全量換液,之后每3 d半量換液1次。培養(yǎng)第5天評(píng)估神經(jīng)元,NSE染色、NMDAR1染色和臺(tái)盼蘭染色。結(jié)果:神經(jīng)元純度高(95%),死亡率低(5%),細(xì)胞形態(tài)好,交聯(lián)充分,背景干凈。結(jié)論:利用新生大鼠皮質(zhì)建立了高質(zhì)量、高產(chǎn)量、簡(jiǎn)便的神經(jīng)元培養(yǎng)模型。
[Abstract]:Objective: to establish a simple and effective method for primary neuron culture. Methods: Wistar suckling rats were born within 12 hours. After separating the cortex and digesting 0.25% trypsin for 30 minutes, rinsing and gently blowing away the cells, filtering for 1 000 rpm, centrifuging for 5 minutes, dissolving the supernatant, adding the inoculant, blowing and filtering, resting for 3 minutes, then counting and inoculating the upper liquid. After inoculation, the whole fluid was changed from 45 to 96 hours after inoculation, and then changed once every 3 days and half a day. NSE staining and Trypan blue staining were evaluated on the 5th day of culture. Results: the purity of neurons was high, the mortality was low, the cell morphology was good, the cross-linking was sufficient, and the background was clean. Conclusion: a high quality, high yield and simple neuron culture model was established by using the cortex of newborn rats.
【作者單位】： 濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院;解放軍第303醫(yī)院;第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所;
【基金】：十二五全軍重點(diǎn)項(xiàng)目No.BWS11J062
【分類(lèi)號(hào)】：R741

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本文編號(hào)：1829135