本文選題：白蛋白 + 血腦屏障�。� 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：缺血性腦卒中是臨床常見(jiàn)的急危重癥,缺血缺氧可以直接對(duì)腦組織造成損害,同時(shí)缺血再灌注可以增加血腦屏障的通透性使腦組織遭受二次打擊以及持續(xù)性損傷。目前有許多關(guān)于神經(jīng)保護(hù)藥物的研究,其作用原理多與降低血腦屏障通透性相關(guān),其中白蛋白是近期研究比較熱門的一種,有部分基礎(chǔ)研究表明白蛋白有明顯減小腦組織缺血再灌注梗死灶,減輕腦水腫的作用;而近期的多項(xiàng)關(guān)于白蛋白在腦血管疾病中應(yīng)用的大規(guī)模多中心臨床研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)白蛋白組的預(yù)后較生理鹽水組差,死亡率較生理鹽水組高。因此,我們覺(jué)得有必要再次通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)研究白蛋白對(duì)于腦組織缺血再灌注損傷的作用。目的:探討人血白蛋白對(duì)缺血-再灌注(IR)大鼠的血腦屏障(Blood Brain Barrier,BBB)通透性的影響及其可能機(jī)制。材料與方法:采用右側(cè)大腦中動(dòng)脈栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法制作缺血再灌注大鼠模型,2h后拔出線栓再灌注為治療起點(diǎn),采用尾緣靜脈注射法注射藥物。選用健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠36只,按隨機(jī)數(shù)字表法分為6組(n=6):假手術(shù)6h組、24h組(Sham組:分離出頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈以及頸外動(dòng)脈然后縫合皮膚),生理鹽水組6h組、24h組(NS組:生理鹽水5ml/kg),白蛋白組6h組、24h組(Alb組:25%人血白蛋白1.25g/kg)。分別于治療后用ELISA檢測(cè)大鼠血清中S100B蛋白的濃度從而評(píng)估腦損傷的嚴(yán)重程度;通過(guò)分光光度法測(cè)量腦組織中伊文氏藍(lán)(Evans blue)染料的含量;6 h,24 h進(jìn)行大鼠神經(jīng)功能缺陷評(píng)分;觀察治療后大鼠腦組織梗死體積、水腫體積以及rADC等MRI影像學(xué)變化,通過(guò)透射電鏡觀察血腦屏障相關(guān)超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)變化:采用Westernblot法測(cè)定大鼠腦組織缺血半暗帶ZO-1,Occludin以及AQP4蛋白的表達(dá)情況。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)采用單因素方差分析,用LSD法進(jìn)行組間兩兩比較,如果方差不齊則用近似方差分析的Dunnett T3法進(jìn)行比較。P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:在MCAO術(shù)后Alb組6h(196.67±20.11 vs.160.04±14.00,P=0.000)與24h(145.81±8.88vs.122.49±12.69,P=0.000)血清S100B的濃度明顯高于NS組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;術(shù)后6h(0.97±0.08vs.0.74±0.06,P=0.000)以及24h(2.45±0.07 vs.2.23±0.07,P=0.000)腦組織中伊文氏藍(lán)含量的檢測(cè)Alb組高于NS組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;NS組以及Alb組的神經(jīng)功能缺陷評(píng)分明顯高于Sham組(P=0.000);在6h,24h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn),NS組與Alb組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=1.000)。接受治療6h后NS組與Alb組大鼠頭部核磁共振T2WI圖像的梗死及水腫帶占大腦總體積百分比(%HLA)的比較(25.69±1.19vs.28.51±0.47,P=0.433)以及接受治療 24h 后(27.31±0.15vs.29.21±0.95,P=0.107),差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;通過(guò)分析核磁共振DTI序列計(jì)算的患側(cè)大腦與健側(cè)大腦的 rADC 值得出,分別在 6h(0.83±0.05 vs 0.72±0.06,P =0.000)以及24h(0.67±0.07 0.58±0.01,P=0.001),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;通過(guò)透射電鏡觀察大鼠血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)變化,在治療6h后NS組以及Alb組均出現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫,內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器腫脹,內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接模糊,兩組間形態(tài)學(xué)并無(wú)明顯差異24h后星形膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)空泡化,細(xì)胞器腫脹更加嚴(yán)重,緊密連接松散,組間形態(tài)學(xué)無(wú)明顯差異。與NS組比較Alb組在治療6h后大鼠大腦皮層缺血半暗帶中ZO-1的蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化(P0.05),24h后Alb組明顯減少(P0.05);治療6h后Occludin蛋白在缺血區(qū)的表達(dá)NS組與Alb組比較沒(méi)有明顯差異(P0.05),然而在24h后Alb組Occludin的表達(dá)明顯低于NS組(P0.05)。AQP4在治療6h表達(dá)Alb組高于NS組(P0.05),24h后Alb組表達(dá)同樣高于NS組(P0.05)。結(jié)論:人血白蛋白未發(fā)現(xiàn)有改善缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能以及減小大鼠因大腦缺血再灌注損傷引起梗死灶以及水腫體積,相反白蛋白可以增加缺血再灌注大鼠血腦屏障通透性,其作用機(jī)制可能與其下調(diào)緊密連接蛋白ZO-1、Occludin以及上調(diào)水通道蛋白AQP4的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:The effects of albumin on the permeability of blood brain barrier ( BBB ) in rats with ischemia - reperfusion ( IR ) were studied . The levels of S100B protein in brain tissue of rats were measured by ELISA . The changes of serum S100B in brain tissue were compared with those of NS group ( P = 0.000 ) , and the difference was statistically significant ( P = 0.000 ) . Compared with NS group ( P0.05 ) , there was no significant difference in the expression of protein expression between the two groups ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R743.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 李敏;陳少軍;陳學(xué)群;杜繼曾;;腦水腫的AQP4調(diào)節(jié)機(jī)制研究進(jìn)展[J];浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

2 李季林;盛羅平;;S100B蛋白與顱腦損傷研究的新進(jìn)展[J];創(chuàng)傷外科雜志;2011年02期

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本文編號(hào)：1828991