本文選題：癲癇 + N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體��； 參考：《中國老年學(xué)雜志》2017年23期

【摘要】：目的觀察N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體阻斷對大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電模型神經(jīng)元細(xì)胞活力,凋亡及泛連接蛋白(Panx)-1表達(dá)的影響。方法取SD新生乳鼠雙側(cè)海馬,體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元至第9天,經(jīng)鑒定的海馬神經(jīng)元隨機分為正常對照組、模型組和MK-801(地卓西平,NMDA受體拮抗劑)組。正常對照組為正常細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)3 h后恢復(fù)維持培養(yǎng)液;模型組為無鎂細(xì)胞外液培養(yǎng)3 h后恢復(fù)維持培養(yǎng)液;MK-801組加入含10μmol/L MK-801維持培養(yǎng)液預(yù)保護30 min,更換為無鎂細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)3 h后恢復(fù)維持培養(yǎng)液。模型建立24 h后,采用細(xì)胞計數(shù)試劑盒(CCK-8)檢測神經(jīng)元細(xì)胞活力,分別采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的d UTP缺口末端標(biāo)記測定法(TUNEL)法和流式細(xì)胞儀膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)雙染法檢測神經(jīng)元凋亡,采用蛋白質(zhì)印跡法(Western印跡)檢測神經(jīng)元Panx-1表達(dá),采用實時熒光定量PCR(Real Time-PCR)檢測神經(jīng)元Panx-1 mRNA表達(dá)。結(jié)果與模型組比較,MK-801組神經(jīng)元細(xì)胞活力顯著升高(P0.05),神經(jīng)元凋亡指數(shù)和凋亡率、Panx-1表達(dá)、Panx-1 mRNA表達(dá)顯著降低(P0.05)。結(jié)論 NMDA受體阻斷可抑制大鼠海馬神經(jīng)元癲癇樣放電模型神經(jīng)元損傷,發(fā)揮神經(jīng)元保護作用,并抑制神經(jīng)元Panx-1表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of N- methyl-Daspartic acid (NMDA) receptor blockade on neuronal viability, apoptosis and Panx-1 expression of hippocampal neurons in epileptiform discharges model.Methods the hippocampal neurons of neonatal SD rats were cultured in vitro for 9 days. The identified hippocampal neurons were randomly divided into normal control group, model group and MK-801 (didroxepine NMDA receptor antagonist) group.The normal control group was cultured in the normal cell culture medium for 3 hours and then recovered to maintain the culture medium.The model group was treated with Mg-free extracellular medium for 3 h and then restored the maintenance medium (MK-801) for 30 mins with 10 渭 mol/L MK-801. The MK-801 group was replaced with Mg-free cell culture medium for 3 h and then restored to the maintenance medium.After the model was established for 24 hours, the cell viability was detected by the cell count kit CCK-8.Neuronal apoptosis was detected by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d UTP Nick end labeling (Tunel) assay and flow cytometry (FCM) double staining of fluorescein Visothiocyanate / Annexin V-FITC / Pi.The expression of Panx-1 in neurons was detected by Western blot, and the expression of Panx-1 mRNA in neurons was detected by real-time quantitative PCR(Real (Time-PCR).Results compared with the model group, the neuronal viability of MK-801 group increased significantly (P 0.05), and the expression of Panx-1 mRNA decreased significantly (P 0.05).Conclusion blockade of NMDA receptor can inhibit neuronal injury, play a protective role and inhibit the expression of Panx-1 in hippocampal neurons.
【作者單位】： 牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：黑龍江省衛(wèi)生計生委科研課題(2016-382) 黑龍江省中醫(yī)藥科研項目(2HY16-019) 牡丹江市科學(xué)技術(shù)計劃項目(Z2016s0084)
【分類號】：R742.1

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本文編號：1751907