P-糖蛋白在大鼠腦缺血再灌注后的表達(dá)變化
本文選題:P-糖蛋白 切入點(diǎn):腦缺血 出處:《重慶醫(yī)學(xué)》2017年32期
【摘要】:目的觀察大鼠局灶性腦缺血90min再灌注后P-糖蛋白(P-gp)在腦組織中的表達(dá)及其變化規(guī)律。方法采用線栓法建立大鼠腦缺血再灌注模型,選取26只成年健康SD雄性大鼠,其中1只用于2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色,其余25只隨機(jī)分為對照組(n=5)、假手術(shù)組(n=5)、腦缺血再灌注1、3、7d組(n=5)。用免疫組織化學(xué)DAB單標(biāo),觀察P-gp在正常腦組織和缺血腦組織中的分布變化;用Mdr-1抗體分別和神經(jīng)元標(biāo)記物(Neun)、星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物(GFAP)、微血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物(CD31)進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo),觀察P-gp在缺血再灌注后腦組織的表達(dá);用實(shí)時定量PCR技術(shù)檢測腦缺血再灌注后大腦皮質(zhì)及紋狀體微血管P-gp mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果對照組僅在腦組織微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)P-gp,缺血再灌注組除微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)P-gp外,在部分神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞的突起也有表達(dá)。腦缺血再灌注后1d皮質(zhì)P-gp mRNA表達(dá)降低,但3d表達(dá)明顯增高,7d又下降,其升高和降低水平與對照組及假手術(shù)組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。腦缺血再灌注后1、3、7d紋狀體P-gp mRNA表達(dá)均增多,其中以1、3d增多明顯,與對照組和假手術(shù)組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論腦缺血再灌注后P-gp在大腦皮層及紋狀體微血管P-gp的表達(dá)呈現(xiàn)不同的趨勢,這可能是腦組織的自我保護(hù)機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective to observe the expression and changes of P-gp in rat brain after focal cerebral ischemia (90min) reperfusion.Methods A rat model of cerebral ischemia-reperfusion was established by the method of thread embolization. 26 adult male SD rats were selected, one of them was used for TTCstaining of 2-titriphenyl 5-triphenyl tetrazolium chloride (TTC).The other 25 rats were randomly divided into control group (n = 5), sham operation group (n = 5), cerebral ischemia reperfusion group (n = 5) and cerebral ischemia reperfusion group (n = 5).Immunohistochemical DAB was used to observe the distribution of P-gp in normal brain tissue and ischemic brain tissue, and immunofluorescence double labeling was performed with Mdr-1 antibody and neuronal marker, astrocyte marker, microvascular endothelial cell marker (CD31), respectively.To observe the expression of P-gp in cerebral tissue after ischemia-reperfusion, and to detect the expression of P-gp mRNA in cerebral cortex and striatum by real-time quantitative PCR.Results in the control group, P-gp was expressed only in the microvascular endothelial cells of the brain, and in the ischemic reperfusion group, the expression of P-gp was also found in some neurons and astrocytes in addition to the expression of P-gp in the microvascular endothelial cells.The expression of P-gp mRNA decreased at 1 day after cerebral ischemia and reperfusion, but increased significantly at day 3 and decreased again on day 7. There was a significant difference in the level of P-gp expression between the control group and the sham operation group (P 0.05).The expression of P-gp mRNA in striatum was increased on the 7th day after cerebral ischemia-reperfusion, especially on the 1st day after reperfusion. The difference was statistically significant compared with the control group and sham-operation group (P 0.05).Conclusion the expression of microvascular P-gp in cerebral cortex and striatum is different after cerebral ischemia reperfusion, which may be one of the self-protective mechanisms of brain tissue.
【作者單位】: 昆明醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)與組織胚胎學(xué)系;昆明醫(yī)科大學(xué)科研中心;昆明醫(yī)科大學(xué)高等教育研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81060101) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2013FZ056) 昆明醫(yī)科大學(xué)青年教師培養(yǎng)特殊支持計(jì)劃項(xiàng)目(J1301306612)
【分類號】:R743
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,本文編號:1716425
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