本文關鍵詞： 膠質瘤 凋亡 Galangin Wnt/β-Catenin信號通路 線粒體途徑　出處：《山西醫(yī)科大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:顱腦膠質瘤是人顱內(nèi)最為多見的腫瘤之一,在組織學上可以被分類為:星形細胞瘤、少突神經(jīng)膠質細胞瘤等。其往往呈較惡性,在顱內(nèi)的浸潤性生長有較高的患病率和較高復發(fā)率、死亡率高和治愈率低等的特征。其根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)分級I級膠質瘤大多發(fā)生于兒童并且大多預后良好,而II級膠質瘤大多擁有5-8年的中位生存期,研究表明高級別的星形細胞瘤的中位期大約為3年,而IV級的腦膠質瘤的中位生存期僅有12-18個月。Galangin是一種由高良姜根莖提取并同時存在于蜂膠中的小分子脂溶性的天然類黃酮化合物,其分子量較小,已有的研究表明其在體外試驗中具有抗菌、抗病毒等的作用,如:肝癌、肺癌和食管癌等。Wnt/β-Catenin通路是一種信號通路,有研究指出該通路與組織的生長增殖、凋亡、侵襲和遷移有著相當重要的關系,同時該通路和細胞的線粒體凋亡有緊密的關系。本研究的目的在于實驗Galangin對膠質瘤的增殖和凋亡的效果,在本研究中通過應用MTT測U87、U251的增殖、HOECHST 33342染色凋亡的U251、U87及使用流式}0胞儀法測定凋亡的細胞等方法,詳細測定Galangin在U251、U87凋亡和增殖中的具體變化,并進一步用western blot法測Galangin作用于膠質瘤細胞后其Wnt/β-Catenin信號通路和線粒體凋亡途徑的蛋白表達變化情況,確定Galangin在膠質瘤的體外實驗中對凋亡的誘導和促進作用,并研究分析其有關的機理。方法:1、使用MTT法的實驗方法測該藥物對膠質瘤U251以及U87的增長的抑制。2、應用hoechst33342染色的辦法觀察在非同等濃度下的兩系細胞凋亡的發(fā)生情況。3、使用流式儀法測u251、u87在不同濃度的galangin作用下凋亡的情況。4、應用westernblot技術檢測wnt/β-catenin信號通路、線粒體途徑凋亡相關蛋白β-catenin、bcl-2、bax、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、cytc、parp等的表達變化。結果:本研究結果提示藥物galangin在不同的時間及濃度下對體外培養(yǎng)的u251、u87的生長起到了明顯的抑制效果,并呈現(xiàn)一種與時間及劑量相關的量效關系,在galangin100μm、200μm、300μm和400μm的濃度作用于膠質瘤細胞12h、24h、48h和72h時該藥物galangin對u251細胞的半數(shù)抑制率(ic50)分別為281μm、321μm、276μm和229μm,u87為289.4μm、261.1μm、247.4μm和225.3μm,在藥物galangin的作用下的u251和u87細胞隨著濃度及時間的增加凋亡率相應增加,通過流式儀檢測細胞凋亡發(fā)現(xiàn)了同樣的變化。wnt/β-catenin信號通路及線粒體途徑凋亡相關蛋白β-catenin、bcl-2、bax、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、cytc、parp等蛋白表達量在galangin作用下均有明顯的改變,其結果具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。結論:通過該實驗的研究表明galangin能夠明顯的抑制u251、u87的增殖,并能明顯的誘導u251和u87的凋亡。在不同濃度的galangin作用下體外培養(yǎng)的膠質瘤細胞u251和u87的wnt/β-catenin和線粒體途徑關鍵蛋白的表達有明顯變化。因此galangin能明顯的抑制u251、u87的增殖并能促使其凋亡,westernblot技術檢測發(fā)現(xiàn)細胞凋亡的蛋白變化與wnt/β-catenin蛋白的表達具有一定的關聯(lián)性,由此分析,galangin誘導u251、u87凋亡的作用與wnt/β-catenin通路有著密切的關系。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of Galangin on the proliferation and apoptosis of glioma cells . The results showed that galangin could inhibit the proliferation of u251 and u87 and induce apoptosis of u251 and u87 cells .

【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R739.41

【參考文獻】

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本文編號：1507414