本文關(guān)鍵詞： 病毒性腦炎腦膜炎 多重PCR 核酸侵入反應(yīng) 納米金顯色　出處：《中國人獸共患病學(xué)報》2017年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的建立一種病毒性腦炎腦膜炎病原體多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色的檢測方法。方法針對幾種重要的腦炎腦膜炎病毒(東方馬腦炎病毒、西方馬腦炎病毒、流行性乙型腦炎病毒、西尼羅病毒和尼帕病毒)保守區(qū)基因設(shè)計引物,進(jìn)行多重PCR反應(yīng)、核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色反應(yīng),對多種腦炎腦膜炎病毒同時進(jìn)行檢測,以森林腦炎病毒、圣路易腦炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒4種病原核酸評價其檢測特異性,以體外轉(zhuǎn)錄的病毒RNA或擴增的PCR片段評價其檢測敏感性,并對流行性乙型腦炎患者臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測。結(jié)果成功建立了一種腦炎腦膜炎病毒多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色的檢測技術(shù)。建立的檢測方法可特異的檢測目的病原體,且與森林腦炎病毒、圣路易腦炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒無交叉反應(yīng)。該方法對不同靶標(biāo)的檢測靈敏度均為103拷貝/μL,臨床標(biāo)本檢測結(jié)果均為陽性。結(jié)論建立的腦炎腦膜炎病毒多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色技術(shù)的檢測方法,具有較高的檢測特異性及靈敏度,檢測通量高,肉眼即可觀察結(jié)果,在傳染病病原體檢測方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
[Abstract]:Objective to establish a method for the detection of viral encephalitis meningitis pathogens with multiple PCR binding nucleic acid invasion and gold nanoparticles. Methods several important encephalitis meningitis viruses (oriental equine encephalitis virus, western equine encephalitis virus) were used. The conserved region of epidemic encephalitis B virus, West Nile virus and Nipavirus) was designed with primers designed for multiplex PCR reaction, nucleic acid invasion reaction and gold nanoparticles reaction, and simultaneous detection of various encephalitis meningitis viruses. The detection specificity was evaluated by four kinds of pathogenic nucleic acids, including Forest Encephalitis virus, St. Louis Encephalitis virus, Kikungunya virus and dengue virus, and its sensitivity was evaluated by in vitro transcription of virus RNA or amplified PCR fragments. The clinical specimens of patients with epidemic encephalitis B were detected. Results A method for detecting the multiple PCR binding nucleic acid invasion of encephalitis meningitis virus and gold nanoparticles was established successfully. The established method can be used specifically for the detection of Japanese encephalitis virus. Detection of the target pathogen, And with the Forest Encephalitis virus, the St. Louis Encephalitis virus, There was no cross reaction between Kikungunya virus and dengue virus. The sensitivity of this method for detecting different targets was 103copies / 渭 L, and the results of clinical specimens were positive. Conclusion the multiplex PCR binding nucleic acid invasion of encephalitis meningitis virus is established. The detection method of the entry reaction and the nanometer gold color development technology, It has high detection specificity and sensitivity, high detection flux, and can be observed with the naked eye, so it has a broad application prospect in the detection of infectious disease pathogens.
【作者單位】： 衛(wèi)生部腸道病原微生物重點實驗室江蘇省疾病預(yù)防控制中心病原微生物研究所;
【基金】：艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治科技重大專項(No.2013ZX10004103)資助~~
【分類號】：R440;R512.3

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6 曹喜s，

本文編號：1506897