發(fā)布時間：2018-02-13 00:06

  本文關鍵詞： 膠質瘤 γ-羥丁酸鈉 放療增敏　出處：《蘇州大學》2014年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的：探討γ-羥丁酸鈉（gamma-hydroxybutrate，GHB）對膠質瘤細胞SHG-44增殖抑制及放療增敏機制研究。 方法：以SHG-44細胞為研究對象，MTT法檢測不同濃度GHB（2.5mmol/L、5mmol/L、7.5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L）作用人膠質瘤細胞不同時間（24h、48h、72h）細胞增殖抑制率。Hoechst33258實驗觀察不同濃度GHB（5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L）作用24h后細胞核變化。下列實驗分為對照組、藥物組、照射組、聯(lián)合組（照射+藥物）。流式細胞術（FCM）分析各組細胞周期、凋亡情況�？寺⌒纬蓪嶒灧治鯣HB聯(lián)合不同劑量的X線照射對細胞存活率的影響，擬合存活曲線。細胞免疫熒光檢測SHG-44細胞中HDAC1（Histone deacetylase1，HDAC1）mRNA表達情況。RT-PCR檢測各組細胞HDAC1mRNA、ATM （Ataxiatelangiectasia-mutated gene）mRNA的轉錄水平。 結果：MTT實驗顯示GHB明顯抑制SHG-44細胞的生長，呈濃度和時間依賴性。Hoechst33258鏡下觀察時染色體濃縮，見強藍色熒光。FCM檢測聯(lián)合組細胞周期S期細胞減少，G0/G1期細胞增多，凋亡顯著。克隆形成實驗顯示聯(lián)合組的D0、Dq及SF2各值低于照射組(1.764Vs2.237，，1.251Vs1.873，0.561Vs0.769)，聯(lián)合組SER為1.27。細胞免疫熒光測得HDAC1主要在SHG-44細胞核中表達。RT-PCR結果表明γ-羥丁酸鈉能抑制HDAC1mRNA、ATM mRNA表達。 結論：GHB通過誘導細胞凋亡，改變細胞周期，抑制腫瘤細胞損傷修復，抑制HDAC1、ATM mRNA表達，從而增強膠質瘤細胞放射敏感性。
[Abstract]:Aim: to investigate the mechanism of 緯-hydroxybutyrate sodium gamma-hydroxybutyrate (GHBs) inhibiting the proliferation of glioma cell line SHG-44 and enhancing the sensitivity of radiotherapy. Methods: the proliferation inhibition rate of human glioma cells treated with SHG-44 cells at different concentrations of 2.5 mmol 路L ~ (2.5) mmol 路L ~ (5) mmol 路L ~ (5) mmol 路L ~ (5) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (15) mmol 路L ~ (-1) 路Hoechst33258 (24 h / 24 h) was measured by MTT assay. The following experiments were divided into two groups: control group, drug group, 10 mmol 路L ~ (10) mol 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L). In the irradiation group, the cell cycle and apoptosis were analyzed by flow cytometry (FCM). Clone formation assay was used to analyze the effect of GHB combined with different doses of X-ray irradiation on cell survival. Cell immunofluorescence was used to detect the expression of HDAC1(Histone deacetylase1HDAC1mRNA in SHG-44 cells. RT-PCR was used to detect the transcription level of HDAC1mRNA-Ataxiatelangiectasia-mutated gene)mRNA. Results GHB significantly inhibited the growth of SHG-44 cells in a dose-and time-dependent manner. Chromosome concentration was observed in a dose-and time-dependent manner. Strong blue fluorescence. FCM assay showed that the number of G _ 0 / G _ 1 phase cells decreased in the S phase of cell cycle. The results showed that D0 Dq and SF2 in the combined group were lower than those in the irradiated group (1.764 vs 2.237) and 1.871 vs 1.871 vs 0.561Vs0.769in the combined group. The results of cellular immunofluorescence assay showed that HDAC1 mainly expressed in the nucleus of SHG-44. The results of RT-PCR showed that 緯 -hydroxybutyrate could inhibit the expression of HDAC1mRNAs mRNA. Conclusion by inducing apoptosis, changing cell cycle, inhibiting the repair of tumor cell injury and inhibiting the expression of HDAC1 mRNA, the radiosensitivity of glioma cells can be enhanced.
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R739.41

【共引文獻】

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本文編號：1506872