發(fā)布時(shí)間：2017-10-27 01:24

  本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤干細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：第一部分:人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞體內(nèi)誘導(dǎo)鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究目的:將轉(zhuǎn)染紅色熒光蛋白(RFP)基因的人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞SU3-RFP和源于增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)裸小鼠的骨髓細(xì)胞接種于骨髓損毀Balb/c無(wú)熒光裸小鼠顱內(nèi),以雙色熒光示蹤法探究移植瘤中作為腫瘤間質(zhì)細(xì)胞的外源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(Glioma Stem Cells,GSCs)相互作用。方法:直線加速器輻射后功能損毀普通Balb/c裸小鼠骨髓,尾靜脈移植源于EGFP裸小鼠骨髓細(xì)胞,建立骨髓損毀重建模型;將RFP示蹤的SU3細(xì)胞接種于骨髓重建鼠顱內(nèi),致瘤后培養(yǎng)原代腫瘤組織,從中克隆出高增殖力EGFP+細(xì)胞,鑒定其細(xì)胞類型并分析其生物學(xué)特征。結(jié)果:SU3-RFP細(xì)胞在骨髓重建鼠模型的致瘤率為100%(7/7),移植瘤中克隆到高增殖力EGFP+細(xì)胞,表達(dá)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記蛋白—CD44、CD90、CD29,不表達(dá)CD45,具備強(qiáng)增殖能力和侵襲能力,并高表達(dá)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因(Telomerase Reverse Transcriptase,TERT),在Balb/c裸小鼠致瘤率為100%(5/5),將其命名為已轉(zhuǎn)化的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(transformed Bone Mesenchymal Stem Cells,t BMSCs)。結(jié)論:膠質(zhì)瘤干細(xì)胞可誘導(dǎo)移植瘤骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化,后者參與腫瘤重構(gòu)并高表達(dá)TERT基因。第二部分t BMSCs與體外穩(wěn)定轉(zhuǎn)染TERT基因BMSCs的生物學(xué)特征比較目的:體外建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因(Telomerase Reverse Transcriptase,TERT)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并與克隆得到的已轉(zhuǎn)化的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(transformed Bone Mesenchymal Stem Cells,t BMSCs)作比較研究。方法:原代培養(yǎng)源于BALB/c綠色熒光裸小鼠的BMSCs,將攜帶有TERT基因的慢病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染BMSCs細(xì)胞,獲得穩(wěn)定表達(dá)TERT的BMSCs(TERT-BMSCs),以正常BMSCs為對(duì)照,比較TERT-BMSCs和t BMSCs生物學(xué)特征。結(jié)果:1.t BMSCs細(xì)胞增殖力、侵襲能力和致瘤率(5/5,100%)均最強(qiáng);2.TERT-BMSCs細(xì)胞增殖力、侵襲能力較強(qiáng),略低于t BMSCs(P㩳0.05),致瘤率(2/10,20%)明顯低于t BMSCs;3.BMSCs細(xì)胞增殖力、侵襲能力遠(yuǎn)低于t BMSCs及TERT-BMSCs(P㩳0.01),且不致瘤。結(jié)論:t BMSCs惡性轉(zhuǎn)化機(jī)制與TERT基因過(guò)表達(dá)高度相關(guān),但其轉(zhuǎn)化后的惡性表型應(yīng)還包括其他基因異常參與,值得進(jìn)一步深入研究。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 骨髓損毀重建模型 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 TERT 惡性轉(zhuǎn)化 tBMSCs TERT-BMSCs TERT 惡性轉(zhuǎn)化 生物學(xué)特征
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R739.41
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 序言9-12
• 參考文獻(xiàn)10-12
• 第一部分人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞體內(nèi)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究12-27
• 引言12
• 材料和方法12-18
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-24
• 討論24-25
• 參考文獻(xiàn)25-27
• 第二部分t BMSCs與體外穩(wěn)定轉(zhuǎn)染TERT基因BMSCs的生物學(xué)特征比較27-43
• 引言27
• 材料與方法27-31
• 結(jié)果與分析31-38
• 討論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 研究小結(jié)43-44
• 綜述44-52
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 中英文對(duì)照縮略表52-53
• 攻讀碩士學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文53-54
• 攻讀碩士學(xué)位期間參加的學(xué)術(shù)會(huì)議54-55
• 致謝55-56

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