本文關(guān)鍵詞：VEGF、bFGF濃度梯度對(duì)豬血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞增殖移行的影響

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【摘要】：目的創(chuàng)傷愈合學(xué)會(huì)對(duì)于慢性創(chuàng)面的定義是一個(gè)無(wú)法通過(guò)正常有序而及時(shí)的修復(fù)過(guò)程達(dá)到解剖和功能上的完整狀態(tài)的創(chuàng)面。臨床上多指各種原因形成的創(chuàng)面經(jīng)1個(gè)月以上治療未能愈合、也無(wú)愈合傾向者。導(dǎo)致慢性創(chuàng)面其主要原因有兩個(gè)方面,第一是創(chuàng)面局部微循環(huán)紊亂,細(xì)胞自我修復(fù)創(chuàng)面能力減弱;第二是內(nèi)源性生長(zhǎng)因子水平顯著降低。在所有的生長(zhǎng)因子中,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b FGF)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)起到了十分重要的作用。b FGF能夠促進(jìn)創(chuàng)面成纖維細(xì)胞的增殖、膠原的沉積,從而促進(jìn)肉芽組織形成,加速創(chuàng)面愈合;VEGF能夠增加創(chuàng)面局部的毛細(xì)血管密度,從而提高了創(chuàng)面的血流灌注及新陳代謝,最終促進(jìn)創(chuàng)面愈合。有研究表明,角質(zhì)形成細(xì)胞在表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子濃度梯度誘導(dǎo)下,能夠由低濃度向高濃度加速增殖移行。近年來(lái),針對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子濃度梯度誘導(dǎo)細(xì)胞加速增殖移行進(jìn)而縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間的研究,國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道。本文旨在利用細(xì)胞生長(zhǎng)因子濃度梯度誘導(dǎo)技術(shù),探討成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞能否在生長(zhǎng)因子濃度梯度誘導(dǎo)下快速地由低濃度向高濃度增殖移行,為加速慢性創(chuàng)面的修復(fù)提供一定的理論基礎(chǔ)。方法1.體外培養(yǎng)豬血管內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。2.用MTT法及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度VEGF對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和移行的影響及不同濃度b FGF對(duì)成纖維細(xì)胞增殖和移行的影響。3.以浸泡法將VEGF和b FGF分別加載于膠原支架,用ELISA法通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算VEGF和b FGF于膠原支架的結(jié)合率和緩釋性。4.篩選出在各時(shí)間點(diǎn)增殖和移行活性均有差異的不同濃度的VEGF或b FGF加載于膠原支架構(gòu)成濃度梯度。5.血管內(nèi)皮細(xì)胞與加載VEGF濃度梯度的圓形膠原支架共同培養(yǎng),通過(guò)MTT法和測(cè)量細(xì)胞距中心點(diǎn)距離的差值檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移活力.6.成纖維細(xì)胞與加載b FGF濃度梯度的圓形膠原支架共同培養(yǎng),通過(guò)MTT法和測(cè)量細(xì)胞距中心點(diǎn)距離的差值檢測(cè)成纖維細(xì)胞增殖和遷移活力.結(jié)果1.在不同濃度VEGF刺激下,血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移活性均受到影響,對(duì)兩組數(shù)據(jù)分別進(jìn)行單因素方差分析,篩選出5ng/ml,25ng/ml,100ng/ml三組,三組組間在各時(shí)間點(diǎn)增殖和遷移活力都有顯著差異(P0.05)。2.在不同濃度b FGF刺激下,成纖維細(xì)胞的增殖和遷移活性均受到影響,對(duì)兩組數(shù)據(jù)分別進(jìn)行單因素方差分析,篩選出10ng/ml,50ng/ml,100ng/ml三組,三組組間在各時(shí)間點(diǎn)增殖和遷移活力都有顯著差異(P0.05)。3.VEGF與膠原支架結(jié)合率為42.35%,b FGF與膠原膜片結(jié)合率為38.23%,且有一定的緩釋性。4.VEGF濃度梯度組(5ng/ml,25ng/ml,100ng/ml)與VEGF單一濃度組相比較,對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖活性沒(méi)有顯著影響,而對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移活性有顯著影響(P0.05)。5.b FGF濃度梯度組(10ng/ml,50ng/ml,100ng/ml)與b FGF單一濃度組相比較,對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖活性沒(méi)有顯著影響,而對(duì)成纖維細(xì)胞的遷移活性有顯著影響(P0.05)。結(jié)論在一定濃度下,VEGF對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和移行活性有促進(jìn)作用,VEGF濃度梯度對(duì)于血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移活性的促進(jìn)作用強(qiáng)于單一濃度VEGF。同樣,在一定濃度下b FGF對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖和移行活性有促進(jìn)作用,b FGF濃度梯度對(duì)于成纖維遷移活性的促進(jìn)作用強(qiáng)于單一濃度b FGF。
【關(guān)鍵詞】：VEGF bFGF 血管內(nèi)皮細(xì)胞 成纖維細(xì)胞 濃度梯度 增殖 移行
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R641
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 縮略詞表10-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-22
• 結(jié)果22-32
• 討論32-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 文獻(xiàn)綜述39-53
• 生長(zhǎng)因子濃度梯度影響細(xì)胞遷移在組織修復(fù)中的研究進(jìn)展39-44
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)的研究進(jìn)展44-53
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 在讀期間文章發(fā)表情況53-54
• 致謝54-55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 王爭(zhēng),張紀(jì)蔚,張柏根;糖尿病足動(dòng)脈缺血患者骨骼肌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因表達(dá)[J];中華外科雜志;2002年07期

2 沈銳,利天增,祁少海,梁惠珍,徐盈斌,謝舉臨,吳義方,馮祥生,杜永軍;靶向血管治療增生性瘢痕的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華整形外科雜志;2003年04期

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本文編號(hào)：943058