Cs菌絲粉對大鼠膿毒性急性腎損傷中klotho蛋白表達(dá)的影響
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【摘要】:目的通過檢測膿毒血癥急性腎損傷大鼠腎組織中klotho蛋白的表達(dá)情況,并應(yīng)用Cs菌絲粉干預(yù),來研究klotho蛋白在膿毒血癥急性腎損傷發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法選取健康雄性SD大鼠72只(等級:SPF),體重250g左右,4周齡,隨機(jī)分為空白對照組(n=16)、CLP組(模型組)(n=28)、Cs菌絲粉干預(yù)組(n=28)。對照組普通進(jìn)食水,開腹后找到盲腸只作輕輕擠壓,不結(jié)扎穿刺,模型組普通進(jìn)食水,行CLP術(shù);干預(yù)組為Cs菌絲粉干預(yù)組,于術(shù)前1周開始冬蟲夏草[Cs]組5g/(kg·d)灌胃,,行CLP術(shù)。對照組術(shù)前15min、術(shù)后3h皮下注射生理鹽水20mg/kg,后2組分別于術(shù)前15min、術(shù)后3h皮下注射鹽酸左氧氟沙星20mg/kg,術(shù)后為補(bǔ)充手術(shù)過程中丟失體液量給以生理鹽水5ml/kg皮下注射。每組分別于術(shù)后6h、12h、24h通過腹主動(dòng)脈采血(對照組每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)2只,其余每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只),然后分離血清(用3000r/min離心機(jī)離心15min),檢測血清肌酐及尿素氮,ELISA法測定腎組織勻漿中的klotho蛋白、MDA、CAT水平;取靜脈血做細(xì)菌培養(yǎng);取出腎臟,將右腎放入4%多聚甲醛中固定24至48小時(shí),之后用石蠟包被,通過HE染色觀察腎組織病理損傷,免疫組化法檢測klotho蛋白表達(dá)及定位。每組于術(shù)后12小時(shí)分別隨機(jī)取一只老鼠左腎上級約1cm3放入戊二醛中固定,用于電鏡檢測行電鏡檢測。每組余10只大鼠觀察生物學(xué)行為變化及4天、7天存活率。 結(jié)果1模型組大鼠精神欠佳,運(yùn)動(dòng)遲緩;進(jìn)食水較少;毛發(fā)散亂直立。剖腹可見腹水為淡血性,且量較多,明顯惡臭味;腸管充血水腫,腸管組織粘連較重,部分盲腸末端發(fā)黑。對照組無上述變化。干預(yù)組大鼠術(shù)后一般狀況介于A、模型組之間。2血肌酐:干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)血肌酐濃度顯著低于模型組(P0.05),于12h后開始下降,24h接近對照組水平(P0.05),但仍稍高于對照組;與對照組比較,模型組血肌酐濃度則顯著升高(P0.05)。3血尿素氮:與對照組比較,模型組各時(shí)間點(diǎn)尿素氮水平均顯著升高(P0.05),干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)血尿素氮水平較模型組明顯降低(P0.05),但6h時(shí)與對照組差異不大(P0.05),但仍明顯高于對照組。4免疫組化腎組織klotho蛋白表達(dá)情況:與對照組、模型組相比,干預(yù)組腎組織klotho蛋白表達(dá)明顯上升(P0.05)。5腎組織勻漿klotho蛋白水平:模型組血klotho蛋白水平明顯低于對照組(P0.05),干預(yù)組則明顯高于模型組(P0.05)。6腎組織勻漿MDA水平:模型組明顯升高(P0.05),干預(yù)組較模型組明顯下降(P0.05)。7腎組織勻漿CAT含量:干預(yù)組較模型組明顯升高(P0.05),模型組較對照組明顯下降(P0.05)。8血細(xì)菌培養(yǎng),對照組無細(xì)菌生長,模型組、干預(yù)組均可見細(xì)菌生長,可檢出大腸桿菌、變形桿菌、假單胞菌屬和少量格蘭陽性球菌。9對照組、模型組、干預(yù)組4天存活率分別為100%、30%、40%;干預(yù)組與模型組比較差異雖無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但干預(yù)組死亡大鼠的存活時(shí)間可延長24h左右。對照組、模型組、干預(yù)組7天存活率分別為100%、20%、30%,模型組、干預(yù)組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論1Cs菌絲粉能增強(qiáng)膿毒性急性腎損傷大鼠koltho蛋白的表達(dá),對腎臟具有一定的保護(hù)作用。2氧化應(yīng)激損傷參與了膿毒性急性腎損傷的發(fā)病過程。3Cs菌絲粉能改變膿毒性急性腎損傷大鼠的預(yù)后。
【關(guān)鍵詞】:膿毒血癥 急性腎損傷 klotho蛋白 Cs菌絲粉
【學(xué)位授予單位】:河北聯(lián)合大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R459.7
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 英文縮略表10-11
- 引言11-13
- 第1章 實(shí)驗(yàn)研究13-38
- 1.1 材料與方法13-22
- 1.1.1 材料13-14
- 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-19
- 1.1.3 病理切片制作和染色19-21
- 1.1.4 圖像分析21-22
- 1.1.5 計(jì)量分析22
- 1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理22
- 1.2 結(jié)果22-30
- 1.2.1 各組大鼠術(shù)后基本表現(xiàn)22-28
- 1.2.2 病理組織學(xué)變化28-29
- 1.2.3 各組生存率變化29-30
- 1.3 討論30-34
- 1.4 結(jié)論34-35
- 參考文獻(xiàn)35-38
- 第2章 綜述 膿毒血癥致全身各系統(tǒng)發(fā)病機(jī)制及其治療的研究38-49
- 2.1 呼吸系統(tǒng)39-40
- 2.1.1 概況39
- 2.1.2 機(jī)制39
- 2.1.3 治療39-40
- 2.2 消化系統(tǒng)40-42
- 2.3 循環(huán)系統(tǒng)42-43
- 2.4 神經(jīng)系統(tǒng)43
- 2.5 血液系統(tǒng)43-45
- 2.6 泌尿系統(tǒng)45-46
- 參考文獻(xiàn)46-49
- 附錄 附圖49-56
- 致謝56-57
- 導(dǎo)師簡介57-58
- 作者簡介58-59
- 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集59
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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8 劉麗秋,岳少Y
本文編號:927299
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