本文關鍵詞：飽和氫氣生理鹽水對吸入性肺損傷的保護作用

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【摘要】：目的：探討不同劑量氫氣飽和生理鹽水(hydrogen-rich saline, HS)對煙霧吸入性損傷大鼠急性肺損傷(acute lung injury, ALI)的保護作用。 方法：將30只成年清潔級雄性SD大鼠隨機分為5組：空白對照組(C)、吸入性損傷組(Ⅰ)、氫氣飽和生理鹽水組(HS)其中包括：氫氣飽和生理鹽水低劑量組(2.5ml/kg, HSL)、氫氣飽和生理鹽水中劑量組(5ml/kg, HSM)、氫氣飽和生理鹽水高劑量組(10ml/kg, HSH)�？瞻讓φ战M不做任何處理,吸入性損傷組造成吸入性損傷模型后不做處理,氫氣飽和生理鹽水組造成吸入性損傷模型后給予腹腔注射富氫水治療(3組的注射劑量分別為2.5ml/kg、5ml/kg、10ml/kg)。各組于致傷后24h后腹主動脈取血2ml,處死。動脈血離心后檢測血清中腫瘤壞死因子a (tumor necrosis factor α, TNF-α);取右肺組織做成病理切片,光鏡及透射電鏡下觀察肺組織病理學變化。取左肺組織勻漿檢測組織中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性；免疫組織化學法測定肺組織核因子-KBp65(nuclear factor-KB, NF-KBp65)的表達；TUNEL法檢測肺組織凋亡情況。 結(jié)果：①光鏡下：空白組大鼠肺泡腔結(jié)構完整,壁光滑,肺泡隔均勻一致,未見水腫,肺泡腔清晰,其內(nèi)無滲出液或滲出的白細胞；吸入性損傷組表現(xiàn)為肺泡間隔明顯增厚、水腫,肺泡間質(zhì)小血管充血,管腔內(nèi)中性粒細胞積聚、微血栓形成。肺泡擴張或萎陷,肺泡組織結(jié)構難以辨清,肺泡腔內(nèi)和小氣道內(nèi)有大量紅細胞及炎性細胞浸潤；中、高劑量氫氣生理鹽水組肺組織水腫減輕,浸潤的白細胞數(shù)量減少,肺泡擴張和萎陷程度有所改善,而低劑量組改善不明顯。②電鏡下：空白對照組肺泡清亮,血管暢通,Ⅰ型上皮細胞(alveolartype Ⅰ cells, AT-Ⅰ)正常,肺泡Ⅱ型上皮細胞((alveolartype Ⅱ cells, AT-Ⅱ)結(jié)構正常,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)帶狀,附著核糖體豐富,胞質(zhì)內(nèi)板層小體堆積,肺泡表面活性物質(zhì)(pulmonary surfactant, PS)小泡豐富。毛細血管內(nèi)皮細胞基本正常。呼吸膜結(jié)構正常；吸入性損傷組肺泡腔內(nèi)有紅細胞、細胞碎片,肺泡毛細血管充血。肺泡上皮細胞微絨毛脫落,有的上皮細胞壞死、脫落。呼吸膜腫脹增厚。血管皺曲,紅細胞瘀滯,粘附于血管內(nèi)壁。有大量髓鱗體樣結(jié)構產(chǎn)生。Ⅰ型上皮細胞核周池擴張,核染色質(zhì)電子密度減低,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池擴張,伴有脫顆粒,線粒體結(jié)構部清晰。Ⅱ型肺泡上皮細胞結(jié)構松散,細胞表面有少量微絨毛或無微絨毛,有的可見微絨毛的脫落,胞漿內(nèi)板層小體結(jié)構較少,線粒體基質(zhì)深、模糊、嵴不清楚,少數(shù)線粒體有空泡變,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張,所含表面活性物質(zhì)大部分排出。部分毛細血管內(nèi)皮細胞腫脹,凸向血管腔；HSL組較Ⅰ組變化不大；HSM、HSH組電鏡下病理改變較Ⅰ組明顯減輕,且HSH組較HSM組效果明顯。③血清TNF-α含量對比：HSM、HSH組TNF-α含量較Ⅰ組降低(P0.05),且HSH組TNF-α較HSM組降低明顯(P0.05),HSL組與Ⅰ組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。④肺組織SOD、MDA活性對比：HSM、HSH組SOD含量高于Ⅰ組(P0.05),且HSH組高于HSM組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),HSL組與Ⅰ組差異不明顯(P0.05)。HSM、HSH組MDA水平低于Ⅰ組(P0.05),且HSH組低于HSM組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),HSL組與Ⅰ組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。⑤肺組織細胞NF-κB表達程度的對比：空白對照組大鼠肺組織內(nèi)存在散在的NF-κB陽性染色細胞,主要位于胞漿(對照組NF-KBp65不表達或表達極弱)。吸入性損傷組有深染的NF-κB陽性細胞,其染色以細胞核為主。而氫氣飽和生理鹽水各組細胞核及胞漿NF-κB染色普遍淡于Ⅰ組,以HSM、HSH為著,HSL變化不大。各組平均光密度值(MOD)統(tǒng)計結(jié)果顯示與上述表述致,且HSH組MOD值低于HSM組(P0.05)。⑥肺組織凋亡情況對比：TUNEL染色結(jié)果顯示,空白組有少許細胞被染成棕色,吸入性損傷組可見大量被染成棕色的陽性細胞,然而HSm、HSH組陽性細胞較吸入性損傷組明顯減少,HSL組變化不明顯。各組凋亡指數(shù)(AI)統(tǒng)計結(jié)果顯示與上述表述一致,HSH組低于HSM組(P0.05) 結(jié)論：本實驗中、高劑量氫氣飽和生理鹽水(5ml/kg、10ml/kg)通過影響細胞炎癥反應、氧化應激及凋亡方面減輕吸入性損傷大鼠的急性肺損傷,且高劑量組(10ml/kg)較中劑量組(5ml/kg)效果更好,而低劑量組(2.5ml/kg)治療效果不明顯。
【關鍵詞】：吸入性損傷 急性肺損傷 氫氣飽和生理鹽水 透射電鏡 TUNEL
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R644
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-13
• 研究目的、方法13-14
• 1.1 對象和方法14-25
• 1.1.1 實驗動物14
• 1.1.2 實驗試劑14
• 1.1.3 實驗儀器14-15
• 1.1.4 吸入性損傷模型的制備15
• 1.1.5 氫氣飽和生理鹽水的制備15-16
• 1.1.6 實驗方法16-24
• 1.1.7 統(tǒng)計學分析24-25
• 1.2 結(jié)果25-31
• 1.2.1 肺組織病理結(jié)構觀察25-26
• 1.2.2 各組大鼠血清TNF-α含量的比較26-27
• 1.2.3 各組大鼠肺組織MDA、SOD的比較27-28
• 1.2.4 各組大鼠肺組織細胞NF-κB活性的比較28-29
• 1.2.5 各組大鼠肺組織細胞凋亡情況的比較29-31
• 1.3 討論31-36
• 1.3.1 大鼠煙霧吸入性損傷實驗模型的致傷效果評估31
• 1.3.2 吸入性肺損傷時肺組織電鏡下超微結(jié)構改變及其病理生理變化31-32
• 1.3.3 氫氣的選擇性抗氧化作用32-33
• 1.3.4 氫氣的抗炎作用33-34
• 1.3.5 氫氣的抗凋亡作用34-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻37-42
• 發(fā)表文獻和參加科研情況說明42-43
• 附錄43-47
• 綜述 氫氣對肺損傷的保護效應及相關機制47-63
• 綜述參考文獻56-63
• 致謝63

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 許淑云;細胞因子和急性肺損傷[J];國外醫(yī)學.呼吸系統(tǒng)分冊;2001年04期

2 劉紅菊;腫瘤壞死因子在急性肺損傷發(fā)病機制中的作用[J];國外醫(yī)學(免疫學分冊);1996年05期

3 林濤;黃國慶;文明祥;廖曉星;;腹腔注射氫氣與腹腔氫水對大鼠氫氣代謝的影響[J];廣西醫(yī)學;2012年11期

4 李文軍 ,楊宗城,楊曉東 ,李二紅 ,張斌 ,張宏 ,吉天鵬;煙霧吸入傷大鼠肺組織細胞凋亡及凋亡調(diào)控基因表達的變化[J];解放軍醫(yī)學雜志;2002年02期

5 靳麗妍;朱光發(fā);;急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征與炎癥因子關系的研究[J];臨床肺科雜志;2010年07期

6 李建玲,朱建華,荊照政,陳主初,肖志強;毒蠅堿型乙酰膽堿受體經(jīng)Ras-ERK-1/2信號通路上調(diào)Bcl-2和磷酸化Bad表達[J];生物化學與生物物理學報;2003年01期

7 楊紹杰;孟金萍;屈yN;劉云波;;細胞凋亡信號傳導通路的研究進展[J];中國比較醫(yī)學雜志;2007年05期

8 陳興;劉群;;表皮生長因子治療吸入性損傷大鼠的實驗研究[J];中華損傷與修復雜志(電子版);2009年01期

9 吳蘭芳;楊愛珍;劉和;王有年;;線粒體調(diào)控細胞凋亡的研究進展[J];中國農(nóng)學通報;2010年08期

10 田華;姚樹桐;高鳳美;;含氫水對實驗性小鼠肺纖維化的抑制作用及機制[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2012年02期

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本文編號：913980