本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞外熱休克蛋白70在嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜的表達(dá)變化及其對腸道T細(xì)胞免疫功能的影響

  更多相關(guān)文章： 燒傷 細(xì)胞外熱休克蛋白70 T淋巴細(xì)胞 腸道免疫

【摘要】：目的：觀察嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜組織細(xì)胞外熱休克蛋白70及IL-2表達(dá)變化情況，另外分離嚴(yán)重?zé)齻蟠笫竽c道淋巴結(jié)CD3+T細(xì)胞，予以細(xì)胞外HSP70（eHSP70）刺激體外培養(yǎng)，以此來探討eHSP70對腸道T細(xì)胞免疫的影響。 方法：把60只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分成正常對照組和燒傷后3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)組，每組各10只，用控時(shí)控溫控壓蒸汽燙傷儀在每只燙傷組大鼠背部造成全身體表面積為30%的III度燒傷，于各時(shí)相點(diǎn)頸椎脫臼處死SD大鼠，提取腸粘膜組織，采用ELISA方法檢測eHSP70和IL-2的表達(dá)變化。采用流式細(xì)胞分選技術(shù)分選嚴(yán)重?zé)齻?2h后雄性SD大鼠腸道淋巴結(jié)CD3+T細(xì)胞，將體外培養(yǎng)的CD3+T細(xì)胞隨機(jī)分成空白對照組和eHSP70低濃度、中濃度、高濃度刺激組共4組。其中空白對照組不加eHSP70，低、中、高濃度組分別加入終濃度為5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的eHSP70，采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測Th1/Th2細(xì)胞比例及CD3+T細(xì)胞凋亡率；采用ELISA方法檢測IL-2和IL-10在培養(yǎng)液上清中的表達(dá)變化。 結(jié)果： （1）大鼠燒傷后各時(shí)相點(diǎn)腸粘膜eHSP70的表達(dá)均降低，與正常對照組(1278±327.3)比較，燒傷后3h(538±40.4)大鼠腸粘膜eHSP70表達(dá)已經(jīng)下降，燒傷后12h(314±20.5)達(dá)到最低值，約為正常對照組的1/4，在燒傷后24h(528±40.4)后表達(dá)開始逐步回升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 （2）與正常對照組(48.63±7.89)比較，各燙傷組大鼠腸粘膜IL-2的表達(dá)均降低，于燒傷后12h(25.36±8.58)達(dá)到最低值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 （3嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜eHSP70和IL-2相對表達(dá)量呈正相關(guān)r=0.920,p0.01。 （4）與空白對照組比較，eHSP70刺激組Th1的比例均增高，而Th2的比例均降低，并均以終濃度為10μg/ml的中濃度組表現(xiàn)最明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 （5）與空白對照組比照，eHSP70刺激組的CD3+T細(xì)胞總凋亡率均下降，，其中終濃度為10μg/ml的中濃度組凋亡率最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 （6）與空白對照組比較，eHSP70刺激組的IL-2表達(dá)均增加，其中終濃度為10μg/ml的中濃度組增加最明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；而eHSP70刺激組中IL-10與空白對照組比較表達(dá)均無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論：大鼠嚴(yán)重?zé)齻竽c粘膜組織eHSP70含量下降，可能參與了腸道的T細(xì)胞免疫反應(yīng)。適宜濃度的eHSP70可以降低T細(xì)胞凋亡率，增強(qiáng)T細(xì)胞活性，促進(jìn)T細(xì)胞由Th0向Th1方向分化，促進(jìn)IL-2的釋放，可作為糾正或逆轉(zhuǎn)燒傷后免疫功能紊亂狀態(tài)的一個新的靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：燒傷 細(xì)胞外熱休克蛋白70 T淋巴細(xì)胞 腸道免疫
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R644
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料和方法12-20
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動物的選擇12
• 2.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器和試劑12-13
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)主要儀器12
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑12-13
• 2.2.3 實(shí)驗(yàn)溶液配制13
• 2.3 實(shí)驗(yàn)分組13-14
• 2.3.1 動物實(shí)驗(yàn)分組13-14
• 2.3.2 體外實(shí)驗(yàn)分組14
• 2.4 實(shí)驗(yàn)樣品準(zhǔn)備14-17
• 2.4.1 SD 大鼠燙傷模型建立14
• 2.4.2 腸粘膜組織 eHSP70、IL-2 樣本提取14
• 2.4.3 腸道及腸系膜 PP 結(jié)淋巴細(xì)胞分離14-15
• 2.4.4 CD3~+T 細(xì)胞流式細(xì)胞儀分選15-16
• 2.4.5 重組 eHSP70 刺激 CD3~+T 細(xì)胞體外培養(yǎng)16-17
• 2.5 實(shí)驗(yàn)方法和步驟17-19
• 2.5.1 ELISA 法檢測腸粘膜組織eHSP70、IL-2 和細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-2、IL-10含量17-18
• 2.5.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測 Th1 和 Th2 細(xì)胞比例18
• 2.5.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測 CD3~+T 細(xì)胞凋亡率18-19
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19-20
• 第3章 結(jié)果20-26
• 3.1 嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜 eHSP70 的表達(dá)變化20-21
• 3.2 嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜 IL-2 的表達(dá)變化21
• 3.3 嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜 IL-2 和 eHSP70 相關(guān)性分析21-22
• 3.4 eHSP70 刺激后 Th1 和 Th2 細(xì)胞比例變化22-23
• 3.5 eHSP70 刺激后 CD3~+T 細(xì)胞凋亡率變化23-25
• 3.6 eHSP70 刺激后 IL-2 和 IL-10 的表達(dá)變化25-26
• 第4章 討論26-31
• 4.1 嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜組織細(xì)胞外 HSP70 表達(dá)變化及其意義26-27
• 4.2 eHSP70 對嚴(yán)重?zé)齻笫?T 細(xì)胞免疫功能的影響27-31
• 4.2.1 eHSP70 對嚴(yán)重?zé)齻笫?Th1/Th2 漂移的影響27-28
• 4.2.2 eHSP70 對嚴(yán)重?zé)齻笫?T 細(xì)胞凋亡的影響28-29
• 4.2.3 eHSP70 對嚴(yán)重?zé)齻笫竺庖呒?xì)胞因子分泌的影響29-31
• 第5章 結(jié)論31-32
• 致謝32-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果37-38
• 綜述38-43
• 參考文獻(xiàn)41-43

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：889211