本文關(guān)鍵詞：燙傷合并海水浸泡后腸道損傷機(jī)制的探討

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【摘要】：一、目的與意義 近年來隨著我國經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展,人們對石油、天然氣等自然資源的需求日益增長,未來對海洋資源的開發(fā)將會越來越多；加之近年來我們與周邊國家關(guān)于領(lǐng)海及海上島嶼的紛爭日益激烈,未來發(fā)生海上戰(zhàn)爭以及生產(chǎn)事故造成燒傷的幾率增高,傷員受傷創(chuàng)面極有可能遭受海水污染,面臨海水浸泡的二次打擊。海水具有高滲、堿性、低溫、有菌等特殊理化性質(zhì),有研究顯示燒傷合并海水浸泡會造成機(jī)體的電解質(zhì)紊亂、酸堿失衡、高滲性脫水、血流動力學(xué)紊亂以及嚴(yán)重感染,容易造成創(chuàng)面延遲愈合乃至多臟器功能衰竭；嚴(yán)重?zé)齻笕梭w將發(fā)生不同程度的低血容量休克,腸道是燒傷后最先出現(xiàn)缺血、缺氧損害的器官,而最后恢復(fù)供血的內(nèi)臟器官,燒傷后腸道的損傷容易導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)和多器官功能障礙綜合征(MODS)的發(fā)生。目前對單純燒傷導(dǎo)致腸道功能損傷的研究較為深入,而有關(guān)燒傷后遭受海水浸泡對腸道的損傷的影響以及由此帶來的機(jī)體反應(yīng)的影響研究較少。本研究以20%TBSA深二度兔燙傷合并海水浸泡為研究對象,設(shè)單純燙傷組和燙傷后淡水浸泡組作為對照,通過檢測血漿中超氧化物歧化酶(SOD)活力、脂質(zhì)過氧化物(LPO)水平和腫瘤壞死因子(TNF-α)含量白細(xì)胞介素6(IL-6)含量,腸道組織中PGs含量,光鏡、電鏡觀察小腸的炎癥反應(yīng)情況及結(jié)構(gòu)損傷狀況,和小腸粘膜細(xì)胞中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)情況觀察小腸粘膜上皮細(xì)胞的凋亡情況,來探討海水浸泡對燒傷后腸道損害的影響,為研究燒傷合并海水浸泡的救治提供基礎(chǔ)的理論依據(jù)。 二、材料和方法 1、實(shí)驗(yàn)動物與分組：成年健康新西蘭兔63只,體重為2.0-2.5Kg,雌雄不限,按體重配伍隨機(jī)分為單純燙傷對照組(A組)、燙傷后淡水浸泡組(B組)、燙傷后海水浸泡組(C組)三大組,每大組實(shí)驗(yàn)動物各21只。 2、致傷方法：實(shí)驗(yàn)動物經(jīng)3%的硫噴妥鈉按20mg/kg劑量腹腔注射麻醉后,用4%的硫化鈉行背部脫毛,并用清水將脫毛區(qū)域清洗,自然晾干。將各組動物四肢固定,將背部實(shí)驗(yàn)區(qū)域置于95℃恒水浴中12S,造成背部區(qū)域20%TBSA的深二度(病理切片已證實(shí))燙傷創(chuàng)面。致傷后將C組動物頸部以下(模擬傷員落水后情況)浸泡于海水中,B組動物頸部以下浸泡于淡水中,使創(chuàng)面浸泡于水面下,A組動物不做浸泡處理,實(shí)驗(yàn)動物致傷后禁食、禁水,各組分別在浸泡2h、4h、8h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死7只,同時(shí)從心臟采血和取小腸組織標(biāo)本。 3、檢測指標(biāo)及方法：動物處死后從心臟采集4m1靜脈血,用EDTA管收集后,用離心機(jī)離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,在-20℃冰箱保存；稱取重量,加入一定量的PBS液(PH7.4),用勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,分裝后一份待檢測,其余分裝后放入-20℃冰箱冷凍備用；再取小腸用PBS液清洗干凈,放入8%的甲醛溶液固定備用。用ELISA法檢測血漿中超氧化物歧化酶(SOD)和脂質(zhì)過氧化物(LPO)水平和腸道組織中PGs含量；用ELISA法檢測血漿中白細(xì)胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-α)含量；光鏡、電鏡觀察小腸的炎癥反應(yīng)情況及結(jié)構(gòu)損傷狀況；采用SP法檢測小腸粘膜細(xì)胞中Bax和Bcl-2蛋白的表達(dá)情況。 4、數(shù)據(jù)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)分析,所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用x±s表示,對血漿中SOD活力和LPO水平、IL-6和TNF-a含量、腸道組織中PGs含量、小腸粘膜細(xì)胞中Bax和Bcl-2蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行析因方差分析、單因素方差分析,組內(nèi)多重比較采用SNK方法,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 三、結(jié)果 1、兔血漿中氧自由基超氧化物歧化酶(SOD)活力和脂質(zhì)過氧化物(LPO)含量變化：各組兔血清中SOD活力隨著浸泡(或致傷)時(shí)間的延長,其含量明顯減少,在浸泡8h時(shí)含量最低；海水浸泡組中SOD活力在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯低于淡水浸泡組和單純對照組,SOD活力隨浸泡(或致傷)時(shí)間的延長降低更明顯。各組兔血漿中LPO含量隨著浸泡(或致傷)時(shí)間延長,含量明顯增高,在傷后8h時(shí)含量最高,各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；海水浸泡組中(LPO)含量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯高于淡水浸泡組和單純對照組,在海水浸泡組中(LPO)含量增加更明顯。 2、小腸組織中前列腺素(PGs)含量變化：各組兔小腸組織中PGs含量隨著浸泡(或致傷)時(shí)間延長,其含量明顯減少,在傷后8h時(shí)含量最低；在海水浸泡組中腸組織中PGs含量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯低于淡水浸泡組和單純對照組,海水組腸組織中PGs含量降低更明顯。淡水浸泡組與單純燙傷組比較,PGs含量在傷后2h已出現(xiàn)明顯差異,并且隨著致傷時(shí)間的延長淡水組血漿PGs含量下降明顯,在傷后8小時(shí)差異最大。各組間及時(shí)相點(diǎn)含量有顯著差異(P0.01)。 3、各組兔血漿中白細(xì)胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-α)含量變化：各組兔血漿中IL-6含量組間差異有顯著性(P0.01),以單純燙傷組組最低,海水組最高,不同時(shí)相點(diǎn)間差異有顯著性(P0.01),隨致傷時(shí)間延長逐漸增高,8小時(shí)最高。各組兔血漿中TNF-α含量組間差異有顯著性(P0.01),以單純燙傷組最低,海水組最高,我們可以看出在2h時(shí)單純燙傷組、淡水組、海水組組間差異不顯著(P=0.532),在4h、8h時(shí)間點(diǎn)各組組間差異顯著,(P0.01),不同時(shí)相點(diǎn)間差異有顯著性(P0.01),隨致傷時(shí)間延長逐漸增高,8小時(shí)最高。 4、小腸組織粘膜上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化：單純燙傷組中絨毛結(jié)構(gòu)輕度水腫,粘膜上皮細(xì)胞排列規(guī)則,有少量的淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞浸潤,有少許毛細(xì)血管擴(kuò)張充血,隨著時(shí)間的延長,炎癥細(xì)胞少量增多。淡水浸泡組中絨毛結(jié)構(gòu)水腫程度較單純燙傷組有所加重,粘膜上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)無異形,但有少許脫落,固有層及粘膜下層疏松水腫,血管擴(kuò)張充血,可見較多的淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞浸潤；在淡水浸泡組內(nèi),隨著時(shí)間的延長,炎癥細(xì)胞逐漸增多、組織水腫逐漸加重、血管擴(kuò)張逐漸加重。海水浸泡組中絨毛結(jié)構(gòu)中度水腫,固有層及粘膜下層內(nèi)疏松水腫,血管擴(kuò)張充血加重,隨著時(shí)間的延長,粘膜上皮脫落逐漸增多,淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞浸潤逐漸增多。總體而言,海水浸泡組的炎癥延長程度較淡水浸泡組重,淡水浸泡組的重于單純燙傷組,在各組內(nèi)隨著時(shí)間的延長,炎癥亦逐漸加重。 5、小腸粘膜中Bcl-2和Bax凋亡蛋白的表達(dá)情況：Bax及Bcl-2陽性染色為棕黃色顆粒,定位于細(xì)胞質(zhì),有時(shí)可見胞膜和(或)核膜著棕黃色,以細(xì)胞呈清晰棕色或棕褐色為陽性,以細(xì)胞無棕褐色或與背景一致極淡的棕色為陰性。單純燙傷組、淡水浸泡組、海水浸泡組中小腸粘膜組織中凋亡蛋白Bax和Bcl-2致傷后隨著時(shí)間推移,表達(dá)逐漸增強(qiáng)。在海水浸泡組中小腸組織中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)在浸泡4h、8h的明顯強(qiáng)于淡水浸泡組和單純對照組,在浸泡2h時(shí)與淡水浸泡組和單純對照組相比差異不明顯(P0.01)。各組間Bcl-2和Bax凋亡蛋白的表達(dá)有顯著差異(P0.01)。 四、結(jié)論 1、燙傷合并海水浸泡會加重腸道組織的缺血、缺氧損傷。海水浸泡使血漿中氧自由基明顯增加,腸粘膜組織中前列腺素含量明顯減少,氧自由基的增多及前列腺含量的減少表明海水浸泡加重了燒傷后小腸別的缺血、缺氧損傷。 2、燙傷合并海水浸泡會加重?zé)齻竽c道的炎癥反應(yīng),破壞了腸道的屏障功能。海水浸泡使機(jī)體產(chǎn)生大量的炎癥因子,促進(jìn)了腸粘膜上皮細(xì)胞的凋亡,破壞了腸道的屏障功能。 3、兔燙傷合并海水浸泡后的腸道損傷情況與海水浸泡的時(shí)間有明顯關(guān)聯(lián),隨著海水浸泡時(shí)間延長,其腸道損傷越明顯。
【關(guān)鍵詞】：燒傷 海水 氧自由基 腸道損傷
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R644
【目錄】：

• 摘要3-7
• ABSTRACT7-14
• 前言14-20
• 材料與方法20-27
• 結(jié)果27-40
• 討論40-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 實(shí)驗(yàn)附圖53-55
• 綜述55-61
• 參考文獻(xiàn)59-61
• 成果61-62
• 致謝62-63

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：876463