本文關(guān)鍵詞：姜黃素抑制超抗原TSST-1和豬鏈球菌誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的體外研究

  更多相關(guān)文章： 姜黃素 毒性休克綜合征毒素-1 豬鏈球菌 中毒性休克 促炎性細(xì)胞因子

【摘要】：目的 超抗原毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）和豬鏈球菌都能引起促炎性細(xì)胞因子的暴發(fā)而導(dǎo)致中毒性休克。姜黃素作為一種良好的抗炎物質(zhì)已被證明在多種刺激引起的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮作用。姜黃素是否也能降低TSST-1和豬鏈球菌引起的炎癥反應(yīng)有待研究。因此本實(shí)驗(yàn)通過兩部分實(shí)驗(yàn)觀察TSST-1和豬鏈球菌誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞促炎性因子的影響，探討姜黃素在體外炎癥模型的抗炎作用，為進(jìn)一步探討姜黃素對中毒性休克的作用提供依據(jù)。 方法 1.無菌分離小鼠脾臟，分離脾細(xì)胞，用含5%胎牛血清（FBS）的RPMI1640培養(yǎng)基制備成脾細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度，接種于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，置于37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 2.實(shí)驗(yàn)分組 第一部分（1）陰性對照組：單純脾細(xì)胞懸液，未給予任何刺激 （2）TSST-1給毒組：0.1，1，3，5μg/ml TSST-1 （3）TSST-1+姜黃素干預(yù)組：1μg/ml TSST-1和1，，6，15，20μmol/L4個劑量的姜黃素共同培養(yǎng) （4）IL-12抗體阻斷實(shí)驗(yàn)： IL-12抗體組： LPS組（100ng/ml）；TSST-1組（3μg/ml）；TSST-1（3μg/ml）+姜黃素組（15μmol/L） 無IL-12抗體組：LPS組（100ng/ml）；TSST-1組（3μg/ml）；TSST-1（3μg/ml）+姜黃素組（15μmol/L） 第二部分（1）陰性對照組：單純脾細(xì)胞懸液，未給予任何刺激 （2）豬鏈球菌組：感染復(fù)數(shù)（MOI）為100 （3）豬鏈球菌+姜黃素組：MOI為100+15μmol/L姜黃素 3.實(shí)驗(yàn)方法 （1）臺盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)，判斷脾細(xì)胞活力 （2）采用乳酸脫氫酶（LDH）釋放法檢測細(xì)胞毒性 （3）酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測相關(guān)細(xì)胞因子 （4）用流式細(xì)胞術(shù)檢測脾細(xì)胞內(nèi)TNF-α情況 結(jié)果 （1）所選劑量TSST-1、豬鏈球菌和姜黃素均未發(fā)現(xiàn)有明顯細(xì)胞毒作用; （2）TSST-1誘導(dǎo)脾細(xì)胞產(chǎn)生了大量的IFN-γ和IL-2，產(chǎn)生了少量的TNF-α，未能誘導(dǎo)出IL-1β、IL-6和IL-12; （3）IL-12抗體未能完全阻斷TSST-1誘導(dǎo)的IFN-γ; （4）姜黃素在15μmol/L時顯著減少IFN-γ和TNF-α，但對IL-2無顯著抑制作用; （5）豬鏈球菌誘導(dǎo)脾細(xì)胞產(chǎn)生了促炎性細(xì)胞因子IL-6、TNF-α、IL-12和較高劑量的IFN-γ以及少量的IL-1β，同時也產(chǎn)生了抗炎因子IL-10; （6）姜黃素對豬鏈球菌誘導(dǎo)的促炎因子都有抑制作用同時降低了促炎因子與抗炎因子的比例。 結(jié)論 （1）小鼠的抗原提呈細(xì)胞對TSST-1不敏感; （2）與LPS不同TSST-1誘導(dǎo)的Th1細(xì)胞因子產(chǎn)生不完全依賴于IL-12; （3）姜黃素能顯著降低TSST-1和豬鏈球菌促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生，但對TSST-1誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖無明顯抑制作用; （4）姜黃素在體外炎癥模型中能降低促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生推測姜黃素可以緩解TSST-1和豬鏈球菌導(dǎo)致的中毒性休克。
【關(guān)鍵詞】：姜黃素 毒性休克綜合征毒素-1 豬鏈球菌 中毒性休克 促炎性細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R459.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 常用縮寫詞中英文對照表9-10
• 第一部分 姜黃素對超抗原中毒性休克綜合征毒素-1 誘導(dǎo)的炎癥因子的體外干預(yù)研究10-33
• 前言10-12
• 第一章 材料與方法12-22
• 第二章 結(jié)果22-28
• 第三章 討論28-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-33
• 第二部分 姜黃素抑制豬鏈球菌誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的體外研究33-44
• 前言33-34
• 第一章 材料與方法34-35
• 第二章 結(jié)果35-39
• 第三者討論39-41
• 結(jié)論41
• 展望41-42
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 綜述44-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況52-53
• 致謝53-54
• 個人簡歷54

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本文編號：873855