本文關(guān)鍵詞：廣譜caspase抑制劑對(duì)大鼠燒傷后腎臟的保護(hù)作用

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【摘要】：目的:腎臟組織損傷是嚴(yán)重?zé)齻筝^早出現(xiàn)的并發(fā)癥,急性腎功能不全是臨床上重度燒傷患者常見(jiàn)的死亡原因,重度燒傷所致的腎損傷與微血管損傷、自由基生成增多、Ca2+穩(wěn)態(tài)失衡、多種細(xì)胞因子、嘌呤池耗竭和細(xì)胞凋亡等多種因素有關(guān)。其中細(xì)胞凋亡在急性腎功能不全的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠燒傷模型,并且應(yīng)用z-VAD-fmk進(jìn)行早期干預(yù),檢測(cè)腎組織的病理改變,腎臟細(xì)胞的凋亡情況及caspase-3活性,研究其對(duì)大鼠燒傷后腎損傷的保護(hù)作用,并分析其臨床意義。方法:72只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、致傷組、給藥組,每組24只,各組設(shè)2h、8h、24h、48h共4個(gè)相應(yīng)時(shí)段,每時(shí)段6只,給藥組致傷后即刻經(jīng)尾靜脈注射z-VAD-fmk 3mg/kg,以后以1.5mg/kg的劑量經(jīng)腹腔每12h注射一次,致傷組用同樣方法注射與給藥組等體積的生理鹽水,對(duì)照組不做處理,致傷組和給藥組燒傷后用Parkland公式補(bǔ)液,并根據(jù)給藥量相應(yīng)減少補(bǔ)液量,分別于上述各時(shí)段處死大鼠并留取腎臟組織,行HE染色觀察腎組織的病理改變,TUNEL法檢測(cè)腎臟細(xì)胞的凋亡,熒光比色法檢測(cè)caspase-3活性。結(jié)果:1.病理學(xué)改變:對(duì)照組大鼠腎小管上皮細(xì)胞完整,排列整齊,腎組織結(jié)構(gòu)清晰;致傷組:傷后2h,腎臟組織出現(xiàn)病理改變,腎小管輕度擴(kuò)張,細(xì)胞水腫;8、24h,病變進(jìn)一步加重,腎小管上皮細(xì)胞部分壞死脫落,腎小管擴(kuò)張明顯,可見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)及管型形成;48h改變稍有好轉(zhuǎn);給藥組傷后2h腎小球及腎小管結(jié)構(gòu)基本正常,僅見(jiàn)輕度水腫的腎小管上皮細(xì)胞;8h和24h組細(xì)胞脫落、腎小管擴(kuò)張及管型形成均較對(duì)照組減輕,可見(jiàn)少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)及管型形成;48h組細(xì)胞水腫減輕,管型減少,腎小管擴(kuò)張改善。2.TUNEL染色結(jié)果顯示:細(xì)胞凋亡參與了重度燒傷大鼠的腎損傷。正常細(xì)胞核染色呈淡藍(lán)色,凋亡細(xì)胞核呈棕黃或者棕褐色。對(duì)照組僅可見(jiàn)極少量凋亡細(xì)胞,致傷組和給藥組在傷后2h凋亡細(xì)胞開(kāi)始增多,持續(xù)至48h仍較明顯。與對(duì)照組相比,致傷組和給藥組在傷后各時(shí)相點(diǎn)腎臟細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯增多(P0.01);與致傷組相比,給藥組腎臟細(xì)胞凋亡數(shù)在燒傷8h、24h及48h后明顯降低(P0.01)。3.熒光比色法顯示:重度燒傷后致傷組與給藥組細(xì)胞凋亡相關(guān)酶caspase-3活性均升高。致傷組和給藥組caspase-3活性于各時(shí)相點(diǎn)均高于對(duì)照組,給藥組腎臟組織caspase-3活性在傷后2h、8h、24h及48h均明顯低于致傷組(P0.01)。結(jié)論:1.重度燒傷后,腎臟組織的病理改變主要是腎小管擴(kuò)張,細(xì)胞水腫腎小管上皮細(xì)胞壞死脫落,炎細(xì)胞浸潤(rùn)及管型形成。給予z-VAD-fmk的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物其腎臟組織病理改變?cè)诟鲿r(shí)段均較致傷組減輕。2.大鼠重度燒傷后,z-VAD-fmk可以降低腎臟細(xì)胞的凋亡指數(shù)(AI)。3.重度燒傷后z-VAD-fmk可以降低細(xì)胞凋亡相關(guān)酶caspase-3活性。給藥組腎臟組織caspase-3活性在傷后各時(shí)相點(diǎn)均明顯低于致傷組,但均高于對(duì)照組。
【關(guān)鍵詞】：z-VAD-fmk 腎臟 燒傷 caspase-3 凋亡 大鼠
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R644
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語(yǔ)11-13
• 前言13-15
• 研究現(xiàn)狀、成果13-14
• 研究目的、方法14-15
• 1.對(duì)象和方法15-21
• 1.1 主要儀器15
• 1.2 主要試劑15-16
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及致傷設(shè)備16
• 1.4 caspase抑制劑的制備16
• 1.5 操作過(guò)程16-17
• 1.6 指標(biāo)的檢測(cè)17-21
• 1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法21
• 2 結(jié)果21-25
• 2.1 腎臟組織的病理學(xué)改變21
• 2.2 腎臟組織細(xì)胞凋亡的改變21
• 2.3 腎臟組織caspase-3 活性改變21-25
• 3 討論25-33
• 3.1 大鼠嚴(yán)重?zé)齻竽I臟組織的損傷機(jī)制25-29
• 3.2 TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的效果評(píng)估29-30
• 3.3 比色法檢測(cè)caspase-3 活性的效果評(píng)估30-31
• 3.4 z-VAD-fmk對(duì)嚴(yán)重?zé)齻竽I組織的作用31-33
• 4 小結(jié)33-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-41
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明41-42
• 附錄42-45
• 綜述 caspase抑制劑治療作用的研究進(jìn)展45-63
• 綜述參考文獻(xiàn)56-63
• 致謝63

【相似文獻(xiàn)】

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