本文關(guān)鍵詞：攜帶Livin基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療對急性心肌梗死大鼠心功能的影響

  更多相關(guān)文章： 基因 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌梗死 心功能

【摘要】：目的: 研究攜帶Livin基因的重組腺病毒感染后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對急性心肌梗死大鼠心功能的影響以及l(fā)ivin和促凋亡蛋白caspase-3、caspase-7、caspase-9在感染前后細(xì)胞中的表達(dá)水平的變化。 方法： （1）通過全骨髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，，用流式細(xì)胞儀鑒定其表面分子標(biāo)記物CD29、34、45和90的表達(dá)。轉(zhuǎn)染攜帶Livin基因的重組腺病毒后用流式檢測其對MSCs凋亡的影響。 （2）通過Western blot印跡法分別檢測Livin、capase3、caspase-7、caspase-9的蛋白表達(dá)情況 （3）采用冠狀動脈左前降支結(jié)扎法建立心肌梗死模型，然后實(shí)驗(yàn)分四組進(jìn)行：A組：注射無胎牛血清的DMEM組(100uL)；B組注射MSCs組(100uL，約l×106個細(xì)胞)；C組：注射rAd-control/MSCs組(100uL，約l×106個細(xì)胞)；D組：注射rAd-livin/MSCs組(100ul，約1×106個細(xì)胞)，各組細(xì)胞注射之前都需進(jìn)行DAPI染色。 （4）采用生理儀記錄各組大鼠左室收縮壓(LVSP)、左室舒張壓(LVDP)、左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)、左室最內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)來評價大鼠心功能，記錄后取出大鼠心臟行冰凍切片，熒光顯微鏡下觀察的DAPI染色細(xì)胞的數(shù)量。 結(jié)果： （1） rAd-livin感染MSCs后其凋亡率與正常組和空載組相比都顯著降低（P 0.05），促凋亡蛋白caspase-3、caspase-7或caspase-9在細(xì)胞中的表達(dá)水平下降（P 0.05）； （2）急性心肌梗死大鼠隨機(jī)分四組注射無血清的DMEM、MSCs、rAd-control/MSCs、 rAd-livin/MSCs后， MSCs、 rAd-control/MSCs、rAd-livin/MSCs組心功能較DMEM組有顯著改善（P0.05），而MSCs、rAd-control/MSCs、rAd-livin/MSCs三組之間無顯著差異（P0.05），但rAd-livin/MSCs組心功能改善更明顯，且移植后存活的干細(xì)胞數(shù)量顯著多于其它兩組（P0.05）。 結(jié)論： （1） rAd-livin感染MSCs后降低MSCs凋亡率，并且降低促凋亡蛋白caspase-3、caspase-7或caspase-9在細(xì)胞中的表達(dá)水平； （2）rAd-livin/MSCs移植可進(jìn)一步改善心肌梗死大鼠心功能
【關(guān)鍵詞】：基因 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌梗死 心功能
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R542.22
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英縮略詞表9-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 材料與方法13-21
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 主要使用儀器13
• 2.1.2 主要購買試劑13-14
• 2.1.3 試劑配制14-15
• 2.2 方法15-20
• 2.2.1 大鼠骨髓 MSCs 的分離培養(yǎng)和擴(kuò)增15-16
• 2.2.2 MSCs 的流式細(xì)胞儀鑒定16
• 2.2.3 rAd-livin 對 MSCs 感染率的測定16-17
• 2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測 rAd-livin 感染對 MSCs 凋亡的影響17
• 2.2.5 Western blot 檢測抗凋亡蛋白 Livin 及促凋亡蛋白 caspase-3、caspase-7、caspase-9 在細(xì)胞中的表達(dá)水平17-19
• 2.2.6 大鼠心肌梗死模型的制備及分組:19-20
• 2.2.7 左心室功能的測定：20
• 2.2.8 條帶灰度值分析20
• 2.3 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學(xué)分析20-21
• 第3章 結(jié)果21-27
• 3.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及流式鑒定結(jié)果21-22
• 3.1.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)21
• 3.1.2 流式鑒定結(jié)果：細(xì)胞表面標(biāo)記物的表達(dá)21-22
• 3.2 轉(zhuǎn)染后細(xì)胞凋亡率變化22-23
• 3.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染情況23-24
• 3.4 轉(zhuǎn)染后 Livin、caspase3、caspase7 和 caspase9 蛋白的表達(dá)24-25
• 3.5 大鼠心肌梗死模型的建立25
• 3.6 心功能測定結(jié)果25-26
• 3.7 心肌冰凍切片染色結(jié)果26-27
• 第4章 討論27-32
• 4.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及純化27-28
• 4.2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定28-29
• 4.3 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植改善心功能的作用機(jī)制29-30
• 4.4 基因修飾的干細(xì)胞應(yīng)用前景30
• 4.5 Livin 抗凋亡的作用機(jī)制30-32
• 第5章 結(jié)論與展望32-33
• 5.1 結(jié)論32
• 5.2 仍需進(jìn)一步研究之處與展望32-33
• 致謝33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果38-39
• 綜述39-45
• 參考文獻(xiàn)42-45

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳波,曾秋棠,郎明健,關(guān)思虞;血管內(nèi)皮生長因子基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞同種異體移植治療大鼠急性心肌梗死[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2005年06期

本文編號：805315