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WDR26在嚴(yán)重燙傷后大鼠心肌組織中表達(dá)的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-02 11:09

  本文關(guān)鍵詞:WDR26在嚴(yán)重燙傷后大鼠心肌組織中表達(dá)的初步研究


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【摘要】:目的:初步研究大鼠嚴(yán)重燙傷后WDR26在心肌組織中的表達(dá)。 方法:正常2~3月齡大鼠72只,雌雄不限,體重200~250g,其中隨機(jī)選9只大鼠建立燙傷模型,余63只大鼠隨機(jī)分為3組:(1)延遲復(fù)蘇組,n=30,將大鼠用10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后,,再將大鼠背部用10%硫化鈉脫毛24h后,將其背部置于94攝氏度(℃)電熱恒溫水箱熱水內(nèi),持續(xù)時(shí)間12s,建立大鼠背部面積30%(根據(jù)Meeh Rubner公式計(jì)算得出)III度燙傷模型,采用Parkland補(bǔ)液公式進(jìn)行液體復(fù)蘇,分別于燙傷后第6h、8h和16h進(jìn)行補(bǔ)液;(2)立即復(fù)蘇組,n=30,方法同上,復(fù)蘇時(shí)間為燙傷后即刻、燙傷后第8h和16h;(3)正常組:n=3,將大鼠背部置于37℃電熱恒溫水箱熱水內(nèi),持續(xù)時(shí)間12s,燙傷后不予以復(fù)蘇。延遲復(fù)蘇組和立即復(fù)蘇組每組均設(shè)10個(gè)檢測時(shí)相點(diǎn),分別為燙傷后即刻、1h、3h、6h、7h、8h、10h、14h、18h、22h,每個(gè)時(shí)相點(diǎn)3只,在大鼠燙傷后分別在各時(shí)相點(diǎn)采集大鼠血液離心,取其上層血清,檢測各組大鼠的心肌酶值變化。正常組設(shè)1個(gè)時(shí)相點(diǎn),在燙傷后1h采集血液標(biāo)本。同時(shí)切取各組大鼠心肌組織置于液氮中保存,采用組織病理檢查技術(shù)、定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白印跡技術(shù)(Western-Blot)及圖像分析方法,分別檢測大鼠燙傷后不同時(shí)相點(diǎn)心臟的病理變化及WDR26的表達(dá)規(guī)律。 結(jié)果:1.大鼠心肌酶值變化:通過檢測大鼠肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CKMB)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase,LDH)發(fā)現(xiàn):(1)大鼠延遲復(fù)蘇組和立即復(fù)蘇組血清心肌酶值明顯高于正常組;(2)延遲復(fù)蘇組和立即復(fù)蘇組血清心肌酶值在燙傷后3h和8~10h明顯升高,其中延遲復(fù)蘇組升高更顯著。2.大鼠心肌組織病理變化:通過心肌結(jié)構(gòu)和炎癥細(xì)胞的變化來對(duì)心肌組織進(jìn)行病理觀察,結(jié)果顯示:大鼠嚴(yán)重燙傷后延遲復(fù)蘇組與立即復(fù)蘇組各時(shí)相點(diǎn)均見心肌組織變性水腫,炎癥細(xì)胞浸潤,其中延遲復(fù)蘇組心肌損傷更明顯,尤其燙傷后3h和7~10h損傷較重。3.大鼠心肌組織WDR26的表達(dá):(1)通過PCR檢測WDR26的mRNA表達(dá):大鼠嚴(yán)重燙傷后,延遲復(fù)蘇組與立即復(fù)蘇組心肌組織均見WDR26的mRNA表達(dá),其中延遲復(fù)蘇組的WDR26表達(dá)更明顯,尤其在燙傷后3h、7h和10h,波動(dòng)明顯,達(dá)到峰值,而立即復(fù)蘇組下降明顯。(2)通過Western-Blot技術(shù)檢測WDR26的蛋白表達(dá):大鼠嚴(yán)重燙傷后,三組心肌組織均見WDR26的蛋白表達(dá),其中延遲復(fù)蘇組表達(dá)更明顯,WDR26表達(dá)在燙傷后7h和10h波動(dòng)明顯,達(dá)到峰值,而立即復(fù)蘇組變化不明顯。 結(jié)論:1、94℃熱水燙傷大鼠背部12S,成功建立大鼠III度燙傷模型。2、大鼠嚴(yán)重燙傷后可引起心肌損傷,而延遲復(fù)蘇實(shí)施后心肌損傷更明顯。3、WDR26在嚴(yán)重燙傷后大鼠心肌組織中有表達(dá)且高于正常,而延遲復(fù)蘇實(shí)施后在心肌組織中表達(dá)更顯著。
【關(guān)鍵詞】:WDR26 大鼠 燙傷 心肌
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R644
【目錄】:
  • 主要英文縮寫中英文對(duì)照表5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-11
  • 實(shí)驗(yàn)材料11-14
  • 第一部分14-16
  • 方法14
  • 結(jié)果14-15
  • 結(jié)論15-16
  • 第二部分16-28
  • 方法16-17
  • 結(jié)果17-25
  • 統(tǒng)計(jì)分析方法25
  • 討論25-27
  • 結(jié)論27-28
  • 第三部分28-45
  • 方法28-37
  • 結(jié)果37-41
  • 統(tǒng)計(jì)分析方法41-42
  • 討論42-44
  • 結(jié)論44-45
  • 總結(jié)論45-46
  • 參考文獻(xiàn)46-49
  • 綜述49-58
  • 參考文獻(xiàn)54-58
  • 論文發(fā)表58-59
  • 致謝59

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):778181

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