WDR26在嚴重燙傷后大鼠心肌組織中表達的初步研究
本文關鍵詞:WDR26在嚴重燙傷后大鼠心肌組織中表達的初步研究
【摘要】:目的:初步研究大鼠嚴重燙傷后WDR26在心肌組織中的表達。 方法:正常2~3月齡大鼠72只,雌雄不限,體重200~250g,其中隨機選9只大鼠建立燙傷模型,余63只大鼠隨機分為3組:(1)延遲復蘇組,n=30,將大鼠用10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后,,再將大鼠背部用10%硫化鈉脫毛24h后,將其背部置于94攝氏度(℃)電熱恒溫水箱熱水內,持續(xù)時間12s,建立大鼠背部面積30%(根據Meeh Rubner公式計算得出)III度燙傷模型,采用Parkland補液公式進行液體復蘇,分別于燙傷后第6h、8h和16h進行補液;(2)立即復蘇組,n=30,方法同上,復蘇時間為燙傷后即刻、燙傷后第8h和16h;(3)正常組:n=3,將大鼠背部置于37℃電熱恒溫水箱熱水內,持續(xù)時間12s,燙傷后不予以復蘇。延遲復蘇組和立即復蘇組每組均設10個檢測時相點,分別為燙傷后即刻、1h、3h、6h、7h、8h、10h、14h、18h、22h,每個時相點3只,在大鼠燙傷后分別在各時相點采集大鼠血液離心,取其上層血清,檢測各組大鼠的心肌酶值變化。正常組設1個時相點,在燙傷后1h采集血液標本。同時切取各組大鼠心肌組織置于液氮中保存,采用組織病理檢查技術、定量聚合酶鏈式反應(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白印跡技術(Western-Blot)及圖像分析方法,分別檢測大鼠燙傷后不同時相點心臟的病理變化及WDR26的表達規(guī)律。 結果:1.大鼠心肌酶值變化:通過檢測大鼠肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CKMB)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase,LDH)發(fā)現:(1)大鼠延遲復蘇組和立即復蘇組血清心肌酶值明顯高于正常組;(2)延遲復蘇組和立即復蘇組血清心肌酶值在燙傷后3h和8~10h明顯升高,其中延遲復蘇組升高更顯著。2.大鼠心肌組織病理變化:通過心肌結構和炎癥細胞的變化來對心肌組織進行病理觀察,結果顯示:大鼠嚴重燙傷后延遲復蘇組與立即復蘇組各時相點均見心肌組織變性水腫,炎癥細胞浸潤,其中延遲復蘇組心肌損傷更明顯,尤其燙傷后3h和7~10h損傷較重。3.大鼠心肌組織WDR26的表達:(1)通過PCR檢測WDR26的mRNA表達:大鼠嚴重燙傷后,延遲復蘇組與立即復蘇組心肌組織均見WDR26的mRNA表達,其中延遲復蘇組的WDR26表達更明顯,尤其在燙傷后3h、7h和10h,波動明顯,達到峰值,而立即復蘇組下降明顯。(2)通過Western-Blot技術檢測WDR26的蛋白表達:大鼠嚴重燙傷后,三組心肌組織均見WDR26的蛋白表達,其中延遲復蘇組表達更明顯,WDR26表達在燙傷后7h和10h波動明顯,達到峰值,而立即復蘇組變化不明顯。 結論:1、94℃熱水燙傷大鼠背部12S,成功建立大鼠III度燙傷模型。2、大鼠嚴重燙傷后可引起心肌損傷,而延遲復蘇實施后心肌損傷更明顯。3、WDR26在嚴重燙傷后大鼠心肌組織中有表達且高于正常,而延遲復蘇實施后在心肌組織中表達更顯著。
【關鍵詞】:WDR26 大鼠 燙傷 心肌
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R644
【目錄】:
- 主要英文縮寫中英文對照表5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-11
- 實驗材料11-14
- 第一部分14-16
- 方法14
- 結果14-15
- 結論15-16
- 第二部分16-28
- 方法16-17
- 結果17-25
- 統計分析方法25
- 討論25-27
- 結論27-28
- 第三部分28-45
- 方法28-37
- 結果37-41
- 統計分析方法41-42
- 討論42-44
- 結論44-45
- 總結論45-46
- 參考文獻46-49
- 綜述49-58
- 參考文獻54-58
- 論文發(fā)表58-59
- 致謝59
【參考文獻】
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本文編號:778181
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