本文關鍵詞：COL1A1基因多態(tài)性與前交叉韌帶損傷易感性的相關性研究

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【摘要】：目的：實時熒光定量PCR測定前交叉韌帶(ACL) COL1A1基因-1997G/T、 +1245G/T兩個位點的單核苷酸多態(tài)性(SNP),探討COL1A1基因多態(tài)性與ACL損傷的相關性。免疫組化染色測定前交叉韌帶(ACL)Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白的相對含量及比例,探明ACL損傷在基因方面的發(fā)病機制。方法：選取膝關節(jié)鏡下確診為ACL損傷的40例成年患者為實驗組,其中包括非接觸性ACL損傷患者20例及接觸性ACL損傷患者20例,對照組為來自同一地區(qū)無任何ACL損傷病史的因創(chuàng)傷截肢的正常膝關節(jié)成年患者20例。標本均取材于損傷ACL組織殘端及正常ACL組織,取材后一部分置于-80℃冰箱保存,另一部分立即置于10%福爾馬林溶液中固定,分別行實時熒光定量PCR法測定COL1A1基因-1997G/T、+1245G/T兩個位點的單核苷酸多態(tài)性(SNP),利用χ2檢驗對各組的哈迪-溫伯格平衡(Hardy-Weinberg equilibrium, HWE)及基因型分布頻率進行檢測,并使用logistic回歸方法計算相對風險度的比值比(odds ratio,OR)及其95%可信區(qū)間(confidenceinterval,CI)分析COL1A1基因多態(tài)性與ACL損傷的相關性；并對ACL組織行Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白免疫組化染色,Biosens Digital Imaging System v6.0數據分析系統(tǒng)測定ACL組織Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白的表達；結果數據經SPSS20.0軟件進行處理與統(tǒng)計學分析。結果：1.應用Hardy-Weinberg平衡定律對-1997G/T 及+1245G/T兩個位點在各組人群的基因型頻率進行遺傳平衡檢測,結果P0.05,說明各組人群符合遺傳平衡法則,具有代表性。2. COL1A1基因-1997G/T位點上的GG、TT、GT基因型在正常ACL組出現的頻率分別為15%、55%、30%,在非接觸性ACL損傷組出現的頻率分別為35%、25%、40%,在接觸性ACL損傷組出現的頻率分別為25%、55%、20%,兩兩相比,非接觸性ACL損傷組TT基因型的頻率低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而GG和GT基因型頻率分布差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),通過二元logistic回歸分析發(fā)現,COL1A1基因-1997G/T位點多態(tài)性與非接觸性ACL損傷有關,與GG、GT基因型相比,低頻率的TT基因型增加了非接觸性ACL損傷的風險,OR95%CI=0.21 (0.05-0.83); COL1A1基因-1997G/T位點多態(tài)性GG、TT和GT基因型均與接觸性ACL損傷無相關性,OR95%CI分別為1.42(0.28-2.41)、3.21(0.57-2.61)、1.25(0.35-3.63)。3. COL1A1基因-1997G/T位點上的G、T等位基因在正常ACL組分別為(30%)、(70%),在非接觸性ACL損傷組的分布頻率分別為(55%)、(45%),在接觸性ACL損傷組分別為(35%)、(65%),兩兩相比,G、T等位基因頻率分布差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),通過二元logistic回歸分析發(fā)現,COL1A1基因-1997G/T位點的G、T等位基因與ACL損傷無明顯相關性,OR95%CI分別為1.42(0.29-2.93)、1.25(0.39-4.73)、1.57(0.33-2.56)、1.98(0.35-3.63)。4. COL1A1基因+1245G/T位點上的GG、TT, GT基因型在正常ACL組分別為20%、55%、25%,非接觸性ACL損傷組的分布頻率分別為35%、20%、45%,在接觸性ACL損傷組分別為25%、50%、25%,兩兩相比,非接觸性ACL損傷組TT基因型的頻率低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而GG和GT基因型頻率分布差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),通過二元logistic回歸分析發(fā)現,COLlA1基因+1245G/T位點多態(tài)性與非接觸性ACL損傷有關,與GG、GT基因型相比,低頻率的TT基因型增加了非接觸性ACL損傷的風險,OR95%CI=4.00(1.21-16.27); COL1A1基因+1245G/T位點多態(tài)性GG, TT和GT基因型均與接觸性ACL損傷無相關性,0R95%CI分別為1.19(0.57-3.35)、2.99(0.41-2.23)、1.21(0.31-2.91)。5.COL1A1基因+1245G/T位點上的G、T等位基因在正常ACL組分別為(45%)、(55%),在非接觸性ACL損傷組的分布頻率分別為(57.5%)、(2.5%),在接觸性ACL損傷組分別為(37.5%)、(62.5%),兩兩相比,G、T等位基因頻率分布差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),通過二元logistic回歸分析發(fā)現,COL1A1基因+1245G/T位點的G、T等位基因與ACL損傷易感性無明顯相關性,0R95%CI分別為0.99(0.46-2.98)、1.31(0.65-3.59)、1.78(0.58-2.99)、1.41(0.75-4.68)。6.Ⅰ型膠原蛋白的表達在正常ACL組為5194.97±619.31,非接觸性ACL損傷組為1654.25±492.93,接觸性ACL損傷組為4858.30±985.69,兩兩相比,非接觸性ACL損傷組呈低表達,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而接觸性ACL損傷組與正常ACL組之間無明顯差異(P0.05)。7.Ⅲ型膠原蛋白的表達在正常ACL組為2599.25±564.03,非接觸性ACL損傷組為4257.15±800.82,接觸性ACL損傷組為2586.90±624.88,兩兩相比,非接觸性ACL損傷組呈高表達,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而接觸性ACL損傷組與正常ACL組之間無明顯差異(P0.05)。8.Ⅰ：Ⅲ型膠原蛋白含量的比值在正常ACL組為2.04±0.62,非接觸性ACL損傷組為0.40±0.14,接觸性ACL損傷組為2.07±0.95,兩兩相比,非接觸性ACL損傷組比值較低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而接觸性ACL損傷組與正常ACL組之間無明顯差異(P0.05)。結論：1.COL1A1基因多態(tài)性(-1997G/T、+1245G/T位點)的TT基因型與ACL損傷的易感性相關,與GG、GT基因型相比,高頻率的TT基因型降低了ACL損傷的風險。2.COL1A1基因的多態(tài)性(.1997G/T、+1245G/T位點)的等位基因G、T與ACL損傷無明顯的相關性。3.COLlA1基因-1997G/T、+1245G/T位點通過G→T轉換使ACL組織中Ⅰ型膠原蛋白表達增加,Ⅲ型膠原蛋白表達減少,使Ⅰ：Ⅲ型膠原蛋白比例升高,從而降低了ACL損傷的風險。
【關鍵詞】：前交叉韌帶損傷 COL1A1基因 單核苷酸多態(tài)性 易感性 Ⅰ型膠原蛋白 Ⅲ型膠原蛋白
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R686.5
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-13
• 前言13-15
• 第一部分 前交叉韌帶(ACL)損傷與COL1A1基因-1997G/T、+1245G/T兩個位點單核甘酸多態(tài)性的相關性研究15-44
• 引言15
• 材料和方法15-22
• 結果22-40
• 討論40-43
• 結論43-44
• 第二部分 前交叉韌帶(ACL)損傷組織中Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白的表達及意義44-63
• 引言44-45
• 材料和方法45-50
• 結果50-59
• 討論59-62
• 結論62-63
• 參考文獻63-69
• 全文總結69-71
• 綜述71-81
• 參考文獻77-81
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況81-82
• 致謝82

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前3條

1 王建,敖英芳;前交叉韌帶損傷的臨床流行病學研究[J];中國運動醫(yī)學雜志;2001年04期

2 李江,莊逢源,宋國立;膝關節(jié)韌帶的生物力學研究進展[J];醫(yī)用生物力學;2005年01期

3 劉卉;蘇玉林;于冰;;非接觸性前交叉韌帶損傷特點及機制的研究進展[J];醫(yī)用生物力學;2008年03期

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本文編號：630525