血硒對(duì)重癥急性一氧化碳中毒大鼠腦組織損傷的研究
本文關(guān)鍵詞:血硒對(duì)重癥急性一氧化碳中毒大鼠腦組織損傷的研究
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【摘要】:目的分析血硒對(duì)重癥急性一氧化碳中毒大鼠腦組織損傷產(chǎn)生的影響,探討硒是否對(duì)重癥急性重度一氧化碳中毒大鼠有輔助治療作用。 方法 1.107只大鼠,體重450±20g,經(jīng)Morris水迷宮訓(xùn)練淘汰2只,余隨機(jī)抽出10只為空白對(duì)照組(BC組),剩95只采用純品CO氣體分次腹腔注射的方法建立大鼠急性CO-P模型,將造模后存活并恢復(fù)飲食活動(dòng)者45只平均分為三組低劑量硒治療組(LSe組)、高劑量硒治療組(HSe組)、染毒組(CO-P組)。 2.每三日一次Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)試,評(píng)估神經(jīng)行為學(xué)改變,記錄逃匿潛伏時(shí)間。 3亞硒酸鈉注射液:LSe組動(dòng)物每日0.1μg/g/d肌注,HSe組動(dòng)物0.2μg/g/d肌注。對(duì)照與染毒組各肌注相當(dāng)量生理鹽水。 4每日采各組三份尾血0.5ml監(jiān)測(cè)血清硒及全血谷胱甘肽-過(guò)氧化物酶活性的動(dòng)態(tài)變化。 5染毒后第21天取大鼠腦組織,觀察腦組織結(jié)構(gòu)及神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)采用蘇木素-伊紅(HE)染色;觀察腦白質(zhì)髓鞘結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)采用Luxol氏堅(jiān)牢藍(lán)焦油紫(LFB)染色;神經(jīng)細(xì)胞凋亡采用Tunnel末端轉(zhuǎn)移酶法染色。6免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)※染色觀察海馬區(qū)髓鞘堿性蛋白1(myelinbasicprotein,MBP)的含量,陽(yáng)性信號(hào)為棕黃色,在10×20高倍鏡下每張切片選取海馬區(qū)3個(gè)視野,陽(yáng)性部位平均累計(jì)光密度值(Intergral optical density,IOD) image-pro plus6.0圖像分析軟件測(cè)定,取其均數(shù)作為統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)。 7.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;定量資料采用X S,各時(shí)間點(diǎn)各組之間的比較采用重復(fù)測(cè)量的方差分析;四組之間兩兩比較檢驗(yàn):方差齊:LSD,方差不齊:Dunnett’s T3及Kruskal-Wallis秩和。檢驗(yàn)水準(zhǔn):α0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1.大鼠急性重度CO-P模型建立:維持COHB濃度>65%16小時(shí)后,全部昏迷經(jīng)灌飲灌飼48小時(shí)后大鼠49.5%存活,49.4%可恢復(fù)飲食活動(dòng)。 2.神經(jīng)行為學(xué)評(píng)估:采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)試,重復(fù)測(cè)量的統(tǒng)計(jì)學(xué)方差分析,BC組潛伏逃匿時(shí)間逐漸縮短,CO-P組潛伏逃匿時(shí)間逐漸延長(zhǎng),LSe組、HSe組潛伏逃匿時(shí)間先縮短后延長(zhǎng),各組間大鼠潛伏逃匿時(shí)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。 3.血硒動(dòng)態(tài)變化結(jié)果:各組大鼠血硒水平的比較采用統(tǒng)計(jì)學(xué)兩兩比較,方差齊使用LSD檢驗(yàn),方差不齊則用Dunnett’s T3檢驗(yàn)。兩治療組水平高于染毒組,,低劑量硒治療組第20天達(dá)到空白對(duì)照組水平,高劑量硒治療組的15天達(dá)到空白對(duì)照組水平,各組間每日平均血硒水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。 4GSH-PX活性變化監(jiān)測(cè)結(jié)果各組大鼠GSH-PX活性的四組之間兩兩采用統(tǒng)計(jì)學(xué)比較,方差齊:LSD,方差不齊:Dunnett’s T3。空白對(duì)照組水平高于各組,兩治療組第4-8天接近空白對(duì)照組水平,大鼠GSH-PX活性水平在不同組之間/各時(shí)間點(diǎn)/隨時(shí)間變化的趨勢(shì),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。 5. pearson相關(guān)性分析低硒治療組酶活力(r=0.755,p0.05)、高硒治療組酶活力r=0.841,p0.01)與血硒水平在中毒后補(bǔ)硒的前8日內(nèi)呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系。 6. HE染色:染毒組大鼠腦組織重度水腫變性表現(xiàn),兩治療組與染毒組鏡下改變一致,損傷程度較輕。 7. Luxol氏堅(jiān)牢藍(lán)焦油紫(LFB)染色可見(jiàn)中毒后大鼠腦白質(zhì)脫髓鞘病變,LSe組與HSe組較輕。 8. Tunnel末端轉(zhuǎn)移酶法染色大鼠中毒后海馬細(xì)胞凋亡,除海馬區(qū)外,小腦部表現(xiàn)也較明顯,兩治療組病變類似,程度較染毒組無(wú)明顯區(qū)別。 9免疫組化染色 9.1鏡下可見(jiàn)中毒大鼠海馬區(qū)腦組織MBP陽(yáng)性區(qū)域神經(jīng)纖維分布缺失,神經(jīng)細(xì)胞壞死、變性改變。鏡下病理形態(tài)三組無(wú)明顯差別; 9.2經(jīng)四組間IOD值方差不齊(F=10.271,P0.001),經(jīng)Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn),四組間的IOD值差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=21.753,P0.001);兩兩比較低硒治療組和高硒治療組與空白對(duì)照組的IOD值有差異,與染毒組的IOD值的差別也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但其兩組IOD值的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 提高大鼠血硒水平,可增加谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活性,減輕重癥急性一氧化碳中毒大鼠腦損傷。
【關(guān)鍵詞】:急性一氧化碳中毒 一氧化碳中毒遲發(fā)腦病 血硒 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶缺血-再灌注 自由基 堿性脫髓鞘蛋白
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R595.1
【目錄】:
- 縮略語(yǔ)6-7
- 中文摘要7-10
- Abstract10-14
- 前言14-17
- 材料和方法17-25
- 結(jié)果25-36
- 討論36-39
- 結(jié)論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-46
- 綜述46-52
- 參考文獻(xiàn)49-52
- 附錄52-53
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況53-54
- 致謝54-55
- 個(gè)人簡(jiǎn)介55
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):554821
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