發(fā)布時間：2017-07-17 22:05

  本文關(guān)鍵詞：血硒對重癥急性一氧化碳中毒大鼠腦組織損傷的研究

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【摘要】：目的分析血硒對重癥急性一氧化碳中毒大鼠腦組織損傷產(chǎn)生的影響，探討硒是否對重癥急性重度一氧化碳中毒大鼠有輔助治療作用。 方法 1.107只大鼠，體重450±20g，經(jīng)Morris水迷宮訓練淘汰2只，余隨機抽出10只為空白對照組（BC組），剩95只采用純品CO氣體分次腹腔注射的方法建立大鼠急性CO-P模型，將造模后存活并恢復飲食活動者45只平均分為三組低劑量硒治療組（LSe組）、高劑量硒治療組（HSe組）、染毒組（CO-P組）。 2.每三日一次Morris水迷宮實驗測試，評估神經(jīng)行為學改變，記錄逃匿潛伏時間。 3亞硒酸鈉注射液：LSe組動物每日0.1μg/g/d肌注，HSe組動物0.2μg/g/d肌注。對照與染毒組各肌注相當量生理鹽水。 4每日采各組三份尾血0.5ml監(jiān)測血清硒及全血谷胱甘肽－過氧化物酶活性的動態(tài)變化。 5染毒后第21天取大鼠腦組織，觀察腦組織結(jié)構(gòu)及神經(jīng)細胞形態(tài)采用蘇木素-伊紅(HE)染色;觀察腦白質(zhì)髓鞘結(jié)構(gòu)及細胞形態(tài)采用Luxol氏堅牢藍焦油紫(LFB)染色；神經(jīng)細胞凋亡采用Tunnel末端轉(zhuǎn)移酶法染色。6免疫組織化學（Immunohistochemistry,IHC）※染色觀察海馬區(qū)髓鞘堿性蛋白1（myelinbasicprotein,MBP）的含量，陽性信號為棕黃色，在10×20高倍鏡下每張切片選取海馬區(qū)3個視野，陽性部位平均累計光密度值（Intergral optical density,IOD） image-pro plus6.0圖像分析軟件測定，取其均數(shù)作為統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)。 7.統(tǒng)計學方法:應用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析；定量資料采用X S，各時間點各組之間的比較采用重復測量的方差分析；四組之間兩兩比較檢驗：方差齊：LSD，方差不齊：Dunnett’s T3及Kruskal-Wallis秩和。檢驗水準：α0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果 1.大鼠急性重度CO-P模型建立：維持COHB濃度＞65%16小時后，全部昏迷經(jīng)灌飲灌飼48小時后大鼠49.5%存活,49.4%可恢復飲食活動。 2.神經(jīng)行為學評估：采用Morris水迷宮實驗測試，重復測量的統(tǒng)計學方差分析，BC組潛伏逃匿時間逐漸縮短，CO-P組潛伏逃匿時間逐漸延長，LSe組、HSe組潛伏逃匿時間先縮短后延長，各組間大鼠潛伏逃匿時間差異均有統(tǒng)計學意義(P0.001)。 3.血硒動態(tài)變化結(jié)果:各組大鼠血硒水平的比較采用統(tǒng)計學兩兩比較，方差齊使用LSD檢驗，方差不齊則用Dunnett’s T3檢驗。兩治療組水平高于染毒組，，低劑量硒治療組第20天達到空白對照組水平，高劑量硒治療組的15天達到空白對照組水平，各組間每日平均血硒水平差異均有統(tǒng)計學意義(P0.001)。 4GSH－PX活性變化監(jiān)測結(jié)果各組大鼠GSH－PX活性的四組之間兩兩采用統(tǒng)計學比較，方差齊：LSD，方差不齊：Dunnett’s T3。空白對照組水平高于各組，兩治療組第4-8天接近空白對照組水平，大鼠GSH－PX活性水平在不同組之間/各時間點/隨時間變化的趨勢，差異均有統(tǒng)計學意義(P0.001)。 5. pearson相關(guān)性分析低硒治療組酶活力（r=0.755，p0.05）、高硒治療組酶活力r=0.841，p0.01）與血硒水平在中毒后補硒的前8日內(nèi)呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系。 6. HE染色:染毒組大鼠腦組織重度水腫變性表現(xiàn),兩治療組與染毒組鏡下改變一致,損傷程度較輕。 7. Luxol氏堅牢藍焦油紫(LFB)染色可見中毒后大鼠腦白質(zhì)脫髓鞘病變，LSe組與HSe組較輕。 8. Tunnel末端轉(zhuǎn)移酶法染色大鼠中毒后海馬細胞凋亡，除海馬區(qū)外，小腦部表現(xiàn)也較明顯，兩治療組病變類似，程度較染毒組無明顯區(qū)別。 9免疫組化染色 9.1鏡下可見中毒大鼠海馬區(qū)腦組織MBP陽性區(qū)域神經(jīng)纖維分布缺失，神經(jīng)細胞壞死、變性改變。鏡下病理形態(tài)三組無明顯差別； 9.2經(jīng)四組間IOD值方差不齊（F=10.271，P0.001），經(jīng)Kruskal-Wallis秩和檢驗，四組間的IOD值差別有統(tǒng)計學意義（H=21.753，P0.001）；兩兩比較低硒治療組和高硒治療組與空白對照組的IOD值有差異，與染毒組的IOD值的差別也有統(tǒng)計學意義，但其兩組IOD值的差別無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論 提高大鼠血硒水平，可增加谷胱甘肽過氧化物酶的活性，減輕重癥急性一氧化碳中毒大鼠腦損傷。
【關(guān)鍵詞】：急性一氧化碳中毒 一氧化碳中毒遲發(fā)腦病 血硒 谷胱甘肽過氧化物酶缺血-再灌注 自由基 堿性脫髓鞘蛋白
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R595.1
【目錄】：

• 縮略語6-7
• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 前言14-17
• 材料和方法17-25
• 結(jié)果25-36
• 討論36-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻40-46
• 綜述46-52
• 參考文獻49-52
• 附錄52-53
• 攻讀學位期間發(fā)表論文情況53-54
• 致謝54-55
• 個人簡介55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：554821