本文關(guān)鍵詞：Th22、Th17細(xì)胞及其細(xì)胞因子在大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)模型的表達(dá)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分大鼠原位肝移植急性排斥模型的建立及評(píng)價(jià)目的：掌握大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)的建模技術(shù)并評(píng)價(jià)其效果,總結(jié)手術(shù)技巧及方法,為后續(xù)試驗(yàn)建立穩(wěn)定、有效的動(dòng)物模型。方法：分別以清潔級(jí)純系雄性Sprague-Dawley (SD)和Wistar大鼠為供體和受體,術(shù)前隨機(jī)分為對(duì)照組(假手術(shù)組)、同系移植組(Wistar-Wistar)與異系移植組(SD-Wistar組),應(yīng)用改良“二袖套法”建立大鼠原位肝移植模型36例。比較各組大鼠術(shù)后存活率及生存質(zhì)量,HE染色(hematoxylin-eosin staining)觀察肝臟病理變化、酶聯(lián)免疫法(ELISA法)檢查血清內(nèi)NO含量綜合評(píng)價(jià)肝移植急性排斥模型的效果。結(jié)果：①未應(yīng)用任何免疫抑制劑的情況下,同系移植組大鼠共死亡1例,死因?yàn)槭中g(shù)出血和氣胸；異系移植組大鼠術(shù)中死亡2例,均因肝下下腔靜脈吻合口出血；對(duì)照組大鼠沒(méi)有死亡,手術(shù)總成功率為91.7%(33/36)；同系移植組大鼠術(shù)后14天存活率為100%,生存中位數(shù)為105天,異系移植組大鼠術(shù)后生存中位數(shù)為6天；②術(shù)后第3天三組大鼠血液內(nèi)NO含量差異顯著。異系移植組大鼠含量最高,為(306.67±14.36pg/ml),明顯高于對(duì)照組(60.77±13.66pg/ml)同系移植組含量次之,為(139.83±15.53pg/ml),低于異系移植組,但較對(duì)照組亦有明顯上升(P0.05)；③對(duì)照組大鼠肝組織結(jié)構(gòu)正常,未見(jiàn)明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),為Williams標(biāo)準(zhǔn)0級(jí)；同系移植組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)完整,匯管區(qū)有較少炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),肝小葉結(jié)構(gòu)基本正常,為Williams標(biāo)準(zhǔn)0-1級(jí)；異系移植組大鼠肝細(xì)胞變性嚴(yán)重,肝血竇擴(kuò)張充血明顯,細(xì)胞壞死嚴(yán)重；匯管區(qū)及中央靜脈周圍出現(xiàn)以淋巴細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn),伴少數(shù)單核細(xì)胞,肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂,為Williams標(biāo)準(zhǔn)3級(jí)。結(jié)論：改良“二袖套法”可以簡(jiǎn)化手術(shù)術(shù)式,顯著提高手術(shù)成功率,為下一步活體實(shí)驗(yàn)提供穩(wěn)定的動(dòng)物建模；在末應(yīng)用任何免疫抑制劑情況下,Wistar大鼠與SD大鼠組合,可以建立穩(wěn)定的急性移植排斥模型。第二部分大鼠原位肝移植急性排斥模型中Th22、Th17細(xì)胞及相關(guān)因子的表達(dá)目的：研究大鼠肝移植急性免疫排斥反應(yīng)肝臟內(nèi)Th22、Th17的細(xì)胞變化及其相關(guān)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-22、白細(xì)胞介素-17的表達(dá),進(jìn)一步探討其與肝移植急性排斥反應(yīng)發(fā)生的關(guān)系。方法：分別以清潔級(jí)純系雄性Sprague-Dawley(SD)和Wistar大鼠為供體和受體,應(yīng)用改良“二袖套法”建立大鼠原位肝移植模型。分別采用流式細(xì)胞儀方法(flow cytometry；flow cytometer；FCM)檢測(cè)各組大鼠肝臟內(nèi)Th22及Th17細(xì)胞數(shù)量變化；實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(Real time reverse transcription-Polymerise chain reactions；RT-qPCR)、蛋白質(zhì)印跡法(Western blotting,WB)檢測(cè)肝組織內(nèi)IL-22及IL-17基因及蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果：大鼠肝移植急性免疫排斥模型建立成功；術(shù)后第7天異系移植組大鼠肝臟內(nèi)Th22、Th17細(xì)胞數(shù)量分別為(2.85±0.95)和(3.56±0.93),較同系移植組和對(duì)照組大鼠明顯升高(P0.05)；肝細(xì)胞內(nèi)IL-22及IL-17的基因及蛋白的表達(dá)水平均明顯高于同系移植組和對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論：Th22、Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子均參與大鼠肝移植急性免疫排斥反應(yīng),在肝移植急性免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展中起著不同作用,或可能成為臨床診斷肝移植急性排斥反應(yīng)的早期檢測(cè)指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：改良二袖套法 原位肝移植 急性移植排斥 一氧化氮 原位肝移植 急性移植排斥 白細(xì)胞介素-17 白細(xì)胞介素-22
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R657.3
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 第一部分 大鼠原位肝移植急性排斥模型的建立評(píng)價(jià)13-31
• 1.材料與方法13-18
• 2.試驗(yàn)結(jié)果18-22
• 3.討論22-25
• 小結(jié)25-26
• 參考文獻(xiàn)26-29
• 附圖29-31
• 第二部分 大鼠原位肝移植急性排斥模型中Th22、Th17細(xì)胞及相關(guān)因子的表達(dá)31-50
• 1.材料與方法31-39
• 2.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析39
• 3.試驗(yàn)結(jié)果39-43
• 4.討論43-45
• 小結(jié)45-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 全文結(jié)論50-51
• 綜述51-60
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 附錄60-61
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況61-62
• 致謝62-63
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：Th22、Th17細(xì)胞及其細(xì)胞因子在大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)模型的表達(dá)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：502830