本文關(guān)鍵詞：線粒體TrxR2參與缺氧預(yù)處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：顱腦損傷已成為現(xiàn)代戰(zhàn)爭(zhēng)中士兵在戰(zhàn)場(chǎng)上受傷的主要形式之一,也是神經(jīng)外科日常最常見(jiàn)的疾病,其發(fā)生率呈逐年增加的趨勢(shì),原發(fā)性顱腦損傷一般與外界直接作用有關(guān),多無(wú)法直接干預(yù),繼發(fā)性顱腦損傷其病理過(guò)程復(fù)雜,是臨床治療和干預(yù)的主要方向,氧化應(yīng)激在繼發(fā)性顱腦損傷的病理過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用,硫氧還蛋白還原酶2 (Thioredoxin reductases 2, TrxR2)是線粒體內(nèi)抗氧化應(yīng)激的重要酶類,研究TrxR2在顱腦損傷后的表達(dá)變化及其干預(yù)措施可能會(huì)成為提高顱腦損傷救治的新靶點(diǎn)。第一部分線粒體TrxR2在大鼠顱腦損傷后皮質(zhì)表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究目的 研究線粒體TrxR2在創(chuàng)傷性顱腦損傷大鼠皮質(zhì)的表達(dá)變化；探究TrxR2在繼發(fā)性腦損傷病理過(guò)程中的作用。方法 108只成年健康Sprague-Dawley級(jí)雄性大鼠,體重介于220 g～250 g之間,由安徽醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。隨機(jī)分為對(duì)照組(Con組,n=12)、外傷組(TBI組,n=96),TBI組按又根據(jù)傷后不同時(shí)間點(diǎn)處死分為傷后1、3、6、12 h和1、3、7、14 d八個(gè)亞組,每組12只。采用改良的Feeney's自由落體打擊裝置制作顱腦損傷大鼠模型,各組動(dòng)物模型分別于傷后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死,對(duì)照組不做任何處理,直接處死。每組選6只大鼠直接冰上斷頭取腦,留取挫傷灶周圍0.5 cm皮質(zhì)腦組織,進(jìn)行腦組織含水量及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、還原性谷胱甘肽(GSH)測(cè)定；并提取線粒體TrxR2蛋白進(jìn)行Western-Blot檢測(cè)及活性分析；另取6只大鼠4% 多聚甲醛心臟灌注后斷頭取腦,固定,脫水、石蠟包埋,連續(xù)冠狀切片,進(jìn)行免疫組化檢測(cè)皮層組織TrxR2的表達(dá)分布以及神經(jīng)元NeuN的表達(dá)情況。結(jié)果顱腦損傷后3 h TrxR2的表達(dá)量明顯升高,至傷后1d達(dá)高峰,14d基本恢復(fù)至正常水平；顱腦損傷后3h～7d與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); TrxR2的活性在傷后1h明顯降低,傷后1d降至最低,14d基本恢復(fù)至正常水平。NeuN光密度在傷后1h開(kāi)始降低,傷后3d達(dá)到最低,14d基本恢復(fù)至正常水平。TrxR2活性與神經(jīng)元活性NeuN染色存在正相關(guān)(r=0.855,P0.05)；與TrxR2平均光密度、腦組織水含量及MDA含量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.818,r=-0.824,r=-0.842,P0.05)；與SOD活性及GSH含量呈正相關(guān)(r=0.854,r=0.862,P0.05)。結(jié)論顱腦損傷后TrxR2蛋白表達(dá)增多,但其活性受到明顯抑制,TrxR2的活性與腦組織水含量及氧化應(yīng)激水平相反,而與神經(jīng)元活性基本一致,因此著眼于提高顱腦損傷后TrxR2的表達(dá)活性,可一定程度抑制氧化應(yīng)激水平,減輕繼發(fā)性腦損傷,改善預(yù)后。第二部分：線粒體TrxR2參與缺氧預(yù)處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)研究目的通過(guò)觀察缺氧預(yù)處理對(duì)大鼠顱腦損傷后挫傷灶周圍Nrf2和TrxR2表達(dá)變化及活性的影響,探究線粒體TrxR2參與缺氧預(yù)處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應(yīng)激的機(jī)制。方法SD健康成年雄性大鼠48只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、缺氧預(yù)處理組(HPC)、顱腦損傷組(TBI)、缺氧預(yù)處理+顱腦損傷組(HP+TBI),每組各12只。采用低壓氧艙處理3 d(-50 kPa、3 h/d)建立缺氧預(yù)處理大鼠模型,改良的Feeney'S自由落體打擊裝置制作顱腦損傷大鼠模型,傷后24h處死大鼠。四組均選用改良的神經(jīng)功能評(píng)分(nNSS)觀察大鼠傷后24 h的神經(jīng)功能變化;取6只大鼠挫傷灶周圍新鮮腦組織進(jìn)行水含量測(cè)定及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)測(cè)定以及Nrf2的表達(dá)和TrxR2的表達(dá)及活性的檢測(cè)。另取6只大鼠采用免疫組化染色檢測(cè)皮層組織TrxR2以及神經(jīng)元NeuN的表達(dá)情況,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果缺氧預(yù)處理+顱腦損傷組Nrf2和TrxR2蛋白表達(dá)較顱腦損傷組明顯升高(P0.05),同時(shí)HP+TBI組神經(jīng)功能評(píng)分,腦組織含水量,細(xì)胞MDA水平較顱腦損傷組明顯減低(P0.05),TrxR2活性、SOD及GSH水平以及NeuN神經(jīng)元活性均高于顱腦損傷組(P0.05)。結(jié)論缺氧預(yù)處理可上調(diào)顱腦損傷后TrxR2的表達(dá)及活性,降低顱腦損傷后腦水腫及氧化應(yīng)激的程度,提高神經(jīng)元活性,減輕繼發(fā)性腦損傷。
【關(guān)鍵詞】：顱腦損傷 缺氧預(yù)處理 氧化應(yīng)激 硫氧還蛋白還原酶
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R651.15
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 前言13-15
• 第一部分 線粒體TrxR2在大鼠頗腦損傷后皮陵表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究15-37
• 1 材料與方法15-27
• 2 結(jié)果27-33
• 3 討論33-36
• 4 結(jié)論36-37
• 第二部分 線粒體TrxR2參與缺氧預(yù)處理減輕大鼠煩腦損傷后氧化應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)研究37-51
• 1 材料與方法37-44
• 2 結(jié)果44-49
• 3 討論49-50
• 4 結(jié)論50-51
• 全文總結(jié)51-52
• 參考文獻(xiàn)52-55
• 附錄55-56
• 致謝56-57
• 綜述57-65
• 參考文獻(xiàn)63-65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 錢偉;錢志遠(yuǎn);沈合春;鄭達(dá)理;;大鼠顱腦損傷后腦NF-κB的活性和NF-κBmRNA表達(dá)的變化及意義[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年05期

  本文關(guān)鍵詞：線粒體TrxR2參與缺氧預(yù)處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：496620