本文關鍵詞：線粒體TrxR2參與缺氧預處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應激的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：顱腦損傷已成為現(xiàn)代戰(zhàn)爭中士兵在戰(zhàn)場上受傷的主要形式之一,也是神經外科日常最常見的疾病,其發(fā)生率呈逐年增加的趨勢,原發(fā)性顱腦損傷一般與外界直接作用有關,多無法直接干預,繼發(fā)性顱腦損傷其病理過程復雜,是臨床治療和干預的主要方向,氧化應激在繼發(fā)性顱腦損傷的病理過程中發(fā)揮了重要的作用,硫氧還蛋白還原酶2 (Thioredoxin reductases 2, TrxR2)是線粒體內抗氧化應激的重要酶類,研究TrxR2在顱腦損傷后的表達變化及其干預措施可能會成為提高顱腦損傷救治的新靶點。第一部分線粒體TrxR2在大鼠顱腦損傷后皮質表達變化的實驗研究目的 研究線粒體TrxR2在創(chuàng)傷性顱腦損傷大鼠皮質的表達變化；探究TrxR2在繼發(fā)性腦損傷病理過程中的作用。方法 108只成年健康Sprague-Dawley級雄性大鼠,體重介于220 g～250 g之間,由安徽醫(yī)科大學動物實驗中心提供。隨機分為對照組(Con組,n=12)、外傷組(TBI組,n=96),TBI組按又根據(jù)傷后不同時間點處死分為傷后1、3、6、12 h和1、3、7、14 d八個亞組,每組12只。采用改良的Feeney's自由落體打擊裝置制作顱腦損傷大鼠模型,各組動物模型分別于傷后相應時間點處死,對照組不做任何處理,直接處死。每組選6只大鼠直接冰上斷頭取腦,留取挫傷灶周圍0.5 cm皮質腦組織,進行腦組織含水量及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、還原性谷胱甘肽(GSH)測定；并提取線粒體TrxR2蛋白進行Western-Blot檢測及活性分析；另取6只大鼠4% 多聚甲醛心臟灌注后斷頭取腦,固定,脫水、石蠟包埋,連續(xù)冠狀切片,進行免疫組化檢測皮層組織TrxR2的表達分布以及神經元NeuN的表達情況。結果顱腦損傷后3 h TrxR2的表達量明顯升高,至傷后1d達高峰,14d基本恢復至正常水平；顱腦損傷后3h～7d與對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05); TrxR2的活性在傷后1h明顯降低,傷后1d降至最低,14d基本恢復至正常水平。NeuN光密度在傷后1h開始降低,傷后3d達到最低,14d基本恢復至正常水平。TrxR2活性與神經元活性NeuN染色存在正相關(r=0.855,P0.05)；與TrxR2平均光密度、腦組織水含量及MDA含量呈負相關(r=-0.818,r=-0.824,r=-0.842,P0.05)；與SOD活性及GSH含量呈正相關(r=0.854,r=0.862,P0.05)。結論顱腦損傷后TrxR2蛋白表達增多,但其活性受到明顯抑制,TrxR2的活性與腦組織水含量及氧化應激水平相反,而與神經元活性基本一致,因此著眼于提高顱腦損傷后TrxR2的表達活性,可一定程度抑制氧化應激水平,減輕繼發(fā)性腦損傷,改善預后。第二部分：線粒體TrxR2參與缺氧預處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應激的實驗研究目的通過觀察缺氧預處理對大鼠顱腦損傷后挫傷灶周圍Nrf2和TrxR2表達變化及活性的影響,探究線粒體TrxR2參與缺氧預處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應激的機制。方法SD健康成年雄性大鼠48只,隨機分為假手術組(Sham)、缺氧預處理組(HPC)、顱腦損傷組(TBI)、缺氧預處理+顱腦損傷組(HP+TBI),每組各12只。采用低壓氧艙處理3 d(-50 kPa、3 h/d)建立缺氧預處理大鼠模型,改良的Feeney'S自由落體打擊裝置制作顱腦損傷大鼠模型,傷后24h處死大鼠。四組均選用改良的神經功能評分(nNSS)觀察大鼠傷后24 h的神經功能變化;取6只大鼠挫傷灶周圍新鮮腦組織進行水含量測定及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)測定以及Nrf2的表達和TrxR2的表達及活性的檢測。另取6只大鼠采用免疫組化染色檢測皮層組織TrxR2以及神經元NeuN的表達情況,并進行統(tǒng)計學分析。結果缺氧預處理+顱腦損傷組Nrf2和TrxR2蛋白表達較顱腦損傷組明顯升高(P0.05),同時HP+TBI組神經功能評分,腦組織含水量,細胞MDA水平較顱腦損傷組明顯減低(P0.05),TrxR2活性、SOD及GSH水平以及NeuN神經元活性均高于顱腦損傷組(P0.05)。結論缺氧預處理可上調顱腦損傷后TrxR2的表達及活性,降低顱腦損傷后腦水腫及氧化應激的程度,提高神經元活性,減輕繼發(fā)性腦損傷。
【關鍵詞】：顱腦損傷 缺氧預處理 氧化應激 硫氧還蛋白還原酶
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R651.15
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 前言13-15
• 第一部分 線粒體TrxR2在大鼠頗腦損傷后皮陵表達變化的實驗研究15-37
• 1 材料與方法15-27
• 2 結果27-33
• 3 討論33-36
• 4 結論36-37
• 第二部分 線粒體TrxR2參與缺氧預處理減輕大鼠煩腦損傷后氧化應激的實驗研究37-51
• 1 材料與方法37-44
• 2 結果44-49
• 3 討論49-50
• 4 結論50-51
• 全文總結51-52
• 參考文獻52-55
• 附錄55-56
• 致謝56-57
• 綜述57-65
• 參考文獻63-65

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 錢偉;錢志遠;沈合春;鄭達理;;大鼠顱腦損傷后腦NF-κB的活性和NF-κBmRNA表達的變化及意義[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年05期

  本文關鍵詞：線粒體TrxR2參與缺氧預處理減輕大鼠顱腦損傷后氧化應激的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：496620