本文關(guān)鍵詞：特異性激活SHH通路對(duì)急性腦缺血大鼠血管再生影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的 隨著人們生活水平的提高,飲食結(jié)構(gòu)、生活方式的改變、人口老齡化的加速,缺血性腦血管病(ICVD)發(fā)病率逐年增加,成為危害人類健康的高發(fā)疾病之一,研究其發(fā)病機(jī)制并尋求有效治療藥物成為研究熱點(diǎn)。腦缺血病灶區(qū)分為缺血區(qū)及周圍的缺血半暗帶區(qū),其中缺血半暗帶區(qū)的損傷具有可逆性,因此及時(shí)恢復(fù)血流供應(yīng)有利于神經(jīng)功能恢復(fù)。挽救缺血半暗帶區(qū)神經(jīng)元需要新生血管為其提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣。如何有效的恢復(fù)腦梗死后缺血半暗帶的血流供應(yīng),提高患者預(yù)后,具有重要的意義。 Sonic hedgehog (Shh)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是hedgehog信號(hào)通路之一。最近研究發(fā)現(xiàn)Shh信號(hào)通路與血管再生有著密切的聯(lián)系。Shh信號(hào)通路可促進(jìn)血管的加粗、變長(zhǎng),可影響基質(zhì)細(xì)胞分泌各種血管再生因子,例如VEGF、CD15、ANG等。VEGF是最有效的促血管再生因子,能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖分裂,而CD105是血管再生所必需的,與新生血管內(nèi)皮細(xì)胞密切相關(guān)。目前Shh信號(hào)通路的研究主要集中在腫瘤方面,而在急性腦缺血后血管再生方面的研究甚少。 Shh信號(hào)通路主要由Shh蛋白,Ptch蛋白,Smo蛋白和Gli蛋白組成,其中Ptch蛋白是Shh信號(hào)通路主要的下游靶基因。Shh信號(hào)通路激活時(shí),Ptch蛋白表達(dá)上調(diào),因此Ptch蛋白表達(dá)增高常作為Shh信號(hào)通路激活的標(biāo)志。Purmorphamine與Shh信號(hào)通路中的Smo蛋白結(jié)合,是Shh信號(hào)通路的特異性激動(dòng)劑。因此本實(shí)驗(yàn)采用大鼠急性大腦中動(dòng)脈缺血模型,觀察Purmorphamine特異性激動(dòng)Shh信號(hào)通路后缺血大鼠腦組織中VEGF、CD105的表達(dá)水平變化,以探究Shh信號(hào)通路激活對(duì)急性腦缺血大鼠血管再生的影響,為腦缺血治療提供新的方向。 材料與方法 采用線栓法制作SD大鼠永久性大腦中動(dòng)脈缺血(MCAO)模型。選取成年雄性清潔級(jí)SD大鼠108只,體重250g-350g。將108只SD大鼠隨機(jī)分為三組：假手術(shù)組(A組)缺血模型組(B組)缺血給藥組(C組),其中假手術(shù)組每組12只,缺血模型組、缺血給藥組按時(shí)間點(diǎn)設(shè)立4個(gè)亞組：6h、12h、24h、48h,每個(gè)亞組各12只。Purmorphamine粉劑使用前用二甲基甲酰胺(DMF)完全溶解。缺血給藥組于術(shù)后按0.69mg/kg腹腔注射配置好的Purm orphamine溶液,假手術(shù)組、缺血模型組給予等劑量的二甲基甲酰胺溶液腹腔注射。于術(shù)后觀察各時(shí)間點(diǎn)各組大鼠的神經(jīng)功能缺損,并與既定時(shí)間點(diǎn)處死大鼠,斷頭取腦。免疫組織化學(xué)方法測(cè)定腦缺血后不同時(shí)相各組CD105和VEGF表達(dá),逆轉(zhuǎn)錄聚合酶反應(yīng)(PCR)測(cè)定不同時(shí)相各組Ptch表達(dá)。 結(jié)果 1.免疫組化測(cè)定CD105表達(dá)情況：假手術(shù)組腦組織中的CD105呈弱表達(dá),與之相比較,缺血模型組、缺血給藥組腦組織中的CD105表達(dá)增多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。急性腦缺血模型組、給藥組缺血半暗帶區(qū)域CD105于缺血后6小時(shí)開(kāi)始增高,上調(diào)趨勢(shì)延伸到腦缺血后48小時(shí),且缺血給藥組與腦缺血模型組相比較,各時(shí)間點(diǎn)CD105表達(dá)明顯增多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2.免疫組化測(cè)定VEGF表達(dá)情況：假手術(shù)組大鼠腦組織中VEGF存在少量陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá),在缺血模型組和缺血給藥組的腦組織中VEGF均有表達(dá),并于缺血后6小時(shí)開(kāi)始增高,以48小時(shí)表達(dá)最為顯著。給藥組與腦缺血模型組相比較,給藥組各亞組各時(shí)間點(diǎn)的VEGF表達(dá)明顯增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3.PCR測(cè)定Ptch mRNA的表達(dá)：采用PCR測(cè)定腦組織中Ptch mRNA的表達(dá)結(jié)果顯示假手術(shù)組腦組織中因Shh信號(hào)通路未激活,Ptch的表達(dá)水平極低,缺血模型組和給藥組腦組織中Ptch的表達(dá)水平與假手術(shù)組相比較增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且于腦缺血后6h開(kāi)始增高,直至24h達(dá)高峰,48h時(shí)表達(dá)有所降低。缺血給藥組織與缺血模型組相比較,各時(shí)間點(diǎn)Ptch的表達(dá)水平明顯增高。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 1.給予外源性Shh信號(hào)通路激活劑Purmorphamine后可以有效激活Shh信號(hào)通路。 2.Shh信號(hào)通路與腦缺血后血管再生有密切關(guān)系,且激活Shh信號(hào)通路可上調(diào)腦缺血組織中VEGF、CD105的表達(dá),促進(jìn)血管再生。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血 血管再生 Sonic Hedgdhog信號(hào)通路 VEGF CD105 Ptch
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R743.3
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-24
• 結(jié)果24-27
• 討論27-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 附圖39-43
• 綜述 Sonic hedgehog信號(hào)通路在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中研究進(jìn)展43-60
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 英文縮略詞60-61
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷61-62
• 致謝62-63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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  本文關(guān)鍵詞：特異性激活SHH通路對(duì)急性腦缺血大鼠血管再生影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：423201