背景膿毒癥是一種嚴重威脅人類生命的全身性炎癥反應(yīng)綜合征,可發(fā)展為膿毒性休克及多器官功能障礙綜合征。資料顯示,罹患心功能障礙的膿毒癥患者的死亡率約為70%-90%,明顯高于無心功能不全患者（20%）。大量的研究表明,氧化應(yīng)激、線粒體結(jié)構(gòu)和功能受損是膿毒癥誘導(dǎo)心功能障礙的基本病理生理學機制。然而,目前對膿毒癥誘導(dǎo)的心功能障礙缺乏有效的治療策略。富馬酸二甲酯（Dimethyl fumarate,DMF）是一種富馬酸的衍生物,可在酯酶水解的作用下,生成富馬酸單甲酯。由于DMF及其代謝產(chǎn)物在神經(jīng)、肝臟、心臟等多種組織中均表現(xiàn)出抗炎和抗氧化的特性。因此,我們推測它也可能對抗膿毒癥引起的心肌損傷。核因子E2相關(guān)因子2（nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）是細胞中對抗氧化應(yīng)激損傷的一種重要的保護性蛋白,多表達于心臟、肺和肝臟。當細胞受到刺激時,Nrf2可從細胞質(zhì)轉(zhuǎn)位進入細胞核內(nèi),與基因啟動子區(qū)域的抗氧化反應(yīng)元件結(jié)合,從而促進具有抗氧化特性的靶基因的表達。已有研究表明,DMF對神經(jīng)的保護作用是通過Nrf2依賴性機制而實現(xiàn)的。Nrf2是否在DMF對抗膿毒癥誘導(dǎo)的... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

DMF對LPS誘導(dǎo)的H9C2細胞損傷的影響（Mean±SEM，n=6）

浙江大學碩士學位論文正文203.2DMF抑制LPS誘導(dǎo)的H9C2細胞凋亡用流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡情況（圖2）。結(jié)果顯示，LPS刺激后，H9C2細胞的凋亡率增加。用10、20、或40μMDMF預(yù)處理后，LPS誘導(dǎo)的細胞凋亡明顯受抑制，細胞凋亡率分別為3.17±0.31%、2.57±0.16%、和2.93±0.15%（與LPS組的5.93±0.62%相比，P<0.01）。而40μMDMF對細胞凋亡的抑制作用并未優(yōu)于低濃度DMF。圖2.DMF對LPS誘導(dǎo)的H9C2細胞凋亡的影響（Mean±SEM，n=6）。（A）代表性流式細胞儀結(jié)果圖。（B）數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析結(jié)果。**P<0.01vs對照組；##P<0.01vsLPS組。A5:AnnexinVFITC；PI:propidiumiodide。

浙江大學碩士學位論文正文213.3DMF誘導(dǎo)心肌細胞Nrf2及其下游蛋白HO-1的激活利用免疫熒光技術(shù)在顯微鏡下觀察到，LPS處理后，心肌細胞總Nrf2蛋白表達和細胞核Nrf2蛋白量明顯減少；DMF預(yù)處理不僅可使細胞總Nrf2表達量明顯增加，同時促進Nrf2從細胞質(zhì)向細胞核轉(zhuǎn)運（圖3）。Westernblotting結(jié)果也進一步證實了，LPS可引起H9C2細胞總Nrf2蛋白表達和核Nrf2水平分別降低為對照組的0.39±0.01和0.17±0.01（P<0.05vs對照組，圖4）。而DMF預(yù)處理后，可增加LPS處理后心肌細胞總Nrf2蛋白和核Nrf2蛋白水平，降低細胞質(zhì)Nrf2蛋白水平（P<0.05，圖4）。同時，在受LPS攻擊的心肌細胞中，DMF預(yù)處理還明顯增高HO-1蛋白的表達（圖4A和F）。根據(jù)以上結(jié)果，我們選擇DMF（40μM）來進一步研究其對抗LPS損傷的心肌保護機制。圖3免疫熒光法檢測DMF預(yù)處理后Nrf2蛋白在細胞內(nèi)分布的變化。綠色為Nrf2蛋白，藍色（DAPI）為細胞核。標尺為20μm。


本文編號：3462524