目的探討溴結(jié)構(gòu)域和額外末端結(jié)構(gòu)域（BET）抑制劑（+）-JQ1對(duì)脂多糖/D-氨基半乳糖（LPS/D-Gal）誘導(dǎo)的小鼠急性肝衰竭（ALF）的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。方法將47只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（n=15）、模型組（n=17）和（+）-JQ1干預(yù)組（n=15）,采用腹腔注射LPS/D-Gal聯(lián)合誘導(dǎo)ALF模型,其中在干預(yù)組造模前2 h腹腔注射（+）-JQ1。在造模4 h后每組處死5只小鼠,其余小鼠繼續(xù)喂養(yǎng)至72 h,觀察存活率。采用ELISA法檢測(cè)血清TNF-α,采用RT-q PCR法和Western bloting法分別檢測(cè)mRNA和蛋白表達(dá)。結(jié)果模型組72 h小鼠存活率為16.7%（2/12）,（+）-JQ1干預(yù)組為60.0%（6/10,P>0.05）; ALF組血清ALT水平為（2779.0±200.6） U/L,顯著高于對(duì)照組【（44.9±2.5） U/L,P<0.05】,血清AST水平為（2885.0±143.6） U/L,顯著高于對(duì)照組【76.0±5.7) U/L,P<0.05】,而（+）-JQ1干預(yù)組血清ALT和AST水平較模型組顯著降低【分... 

【文章來源】：實(shí)用肝臟病雜志. 2020,23(06)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

各組小鼠肝臟大體觀

各組小鼠肝組織病理學(xué)表現(xiàn)(HE,100×)

ALF是一種少見但病死率很高的臨床疾病，可由多種因素導(dǎo)致。由于肝衰竭導(dǎo)致腦、腎、肺和心等功能衰竭，病情兇險(xiǎn)。不論哪種病因均伴有肝內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤，體內(nèi)炎癥反應(yīng)過強(qiáng)或過弱均會(huì)給機(jī)體帶來不良的影響[6-8]。ALF時(shí)過度激活的炎癥反應(yīng)可導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死，加重肝臟損傷。當(dāng)肝臟內(nèi)細(xì)胞壞死和細(xì)胞再生無法達(dá)到平衡時(shí)則會(huì)發(fā)生ALF[9]。因此，精密調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)對(duì)疾病的控制至關(guān)重要[10-13]。有研究表明，BET蛋白在巨噬細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子過程中起到關(guān)鍵性作用，而其抑制劑(+)-JQ1可以有效地抑制過度激活的炎癥反應(yīng)[14-16]。經(jīng)腹腔聯(lián)合注射LPS/D-Gal誘導(dǎo)小鼠ALF是經(jīng)典的ALF模型。LPS是革蘭氏陰性菌的主要成分，它主要通過作用于肝臟枯否細(xì)胞來誘導(dǎo)肝損傷。LPS可刺激枯否細(xì)胞大量釋放多種促炎細(xì)胞因子，包括TNF-α、IL-6和IL-1B，誘導(dǎo)ALF小鼠肝細(xì)胞壞死和凋亡。血清ALT和AST是肝臟損傷的重要標(biāo)志。ALF患者血清ALT和AST會(huì)明顯升高。在本實(shí)驗(yàn)中我們觀察到ALF小鼠血清ALT和AST水平明顯升高，而且促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-6和IL-1B水平也明顯升高，肝臟組織學(xué)表現(xiàn)為肝臟組織明顯受損，證實(shí)ALF小鼠模型制備成功。此外，(+)-JQ1可以有效地抑制LPS/D-Gal聯(lián)合誘導(dǎo)導(dǎo)致的過度激活的炎癥反應(yīng)，抑制促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-6和IL-1B分泌，降低血清ALT和AST水平，具有很好的肝臟保護(hù)作用。炎癥反應(yīng)受多條信號(hào)通路的調(diào)控，NF-KB信號(hào)通路則是其中之一。LPS是NF-KB強(qiáng)有力的激活劑，NF-KB信號(hào)通路激活可導(dǎo)致一系列炎癥反應(yīng)相關(guān)基因表達(dá)增加，NF-KB是多種炎癥反應(yīng)的中心環(huán)節(jié)[17,18]。當(dāng)沒有外界刺激時(shí)，NF-KB主要位于胞漿，以P65和P50組成的二聚體與IKB結(jié)合。當(dāng)細(xì)胞受到刺激后，IKB蛋白發(fā)生磷酸化而降解，從而暴露出NF-KB，此時(shí)NF-KB二聚體由胞漿轉(zhuǎn)入到細(xì)胞核，參與多種基因轉(zhuǎn)錄的表達(dá)，其中主要包括調(diào)控促炎細(xì)胞因子表達(dá)的基因。在ALF小鼠模型，NF-KB的激活會(huì)促使細(xì)胞凋亡信號(hào)通路的激活并且促進(jìn)大量促炎細(xì)胞因子的釋放，在肝細(xì)胞凋亡及肝損傷中發(fā)揮重要作用，與ALF的預(yù)后密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ALF模型組IKB蛋白表達(dá)明顯減少，而P-P65和P-IKB蛋白表達(dá)顯著增多。在(+)-JQ1干預(yù)后可明顯下調(diào)P-P65和P-IKB蛋白的表達(dá)，在一定程度上恢復(fù)IKB蛋白的表達(dá)量。因此，考慮(+)-JQ1可能通過調(diào)節(jié)NF-KB信號(hào)通路來抑制促炎細(xì)胞因子的表達(dá)，抑制肝細(xì)胞的壞死，從而減輕肝組織結(jié)構(gòu)和肝功能的損傷。目前，ALF尚無有效的治療方法，(+)-JQ1在防治ALF中可能具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值，值得進(jìn)一步探討。


本文編號(hào)：3372986