目的:探討水通道蛋白-4(Aquapofins-4,AQP4)和神經(jīng)元素-3(Neurogenin3,Ngn3)在創(chuàng)傷性腦損傷(Traumatic brain injury,TBI)后腦組織中的表達(dá)及分布,探索其在創(chuàng)傷性腦損傷中的作用及調(diào)控機(jī)制,為創(chuàng)傷性腦損傷后腦水腫的預(yù)防及臨床治療以及神經(jīng)再生與神經(jīng)功能恢復(fù)的研究提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法:隨機(jī)將30只健康成年SD大鼠(雌雄均有、體質(zhì)量280-300g)分為正常對(duì)照組(5只)和創(chuàng)傷性腦損傷模型組(25只),模型組再分為5個(gè)亞組(每組5只)。10%的水合氯醛3.5 ml/Kg腹腔麻醉后,采用自制改良的marmarou自由落體打擊器撞擊大鼠頭部,建立大鼠創(chuàng)傷性腦損傷模型(TBI),分別于6h、1d、2d、5d、7d收集模型組腦組織及正常對(duì)照組腦組織進(jìn)行組織學(xué)處理,模型組與正常對(duì)照組均采用免疫組織化學(xué)SABC法染色觀察AQP4和Ngn3在腦組織中的表達(dá)及分布,Western-blot檢測AQP4、Ngn3蛋白在創(chuàng)傷性腦損傷后腦組織中的表達(dá)及變化。結(jié)果:AQP4在正常大鼠腦組織中不表達(dá)或表達(dá)較弱,陽性反應(yīng)主要分布在腦組織中的血管內(nèi)皮及膠質(zhì)細(xì)胞;Ngn3在正常大鼠腦組織主要表達(dá)于室管膜上皮。TBI模型組6 h時(shí),AQP4在腦組織內(nèi)的表達(dá)無明顯變化,和正常對(duì)照組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),1 d時(shí)AQP 4大量表達(dá)于髓質(zhì)、毛細(xì)血管內(nèi)皮及神經(jīng)膠質(zhì),2 d時(shí)表達(dá)開始下降,5 d時(shí)表達(dá)再次出現(xiàn)高峰,1 d后AQP4在模型組的表達(dá)與正常對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。模型組6 h時(shí),大腦皮質(zhì)可見少量的Ngn3陽性神經(jīng)元,局灶性聚集或散在分布,1 d時(shí)海馬區(qū)出現(xiàn)少量未分化的大顆粒細(xì)胞呈Ngn3陽性,5 d時(shí)海馬區(qū)Ngn3陽性細(xì)胞數(shù)量達(dá)到高峰,高表達(dá)狀態(tài)持續(xù)至第7 d,模型組各時(shí)段Ngn3的表達(dá)與正常對(duì)照組比較存在差異,并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:AQP4在創(chuàng)傷性腦損傷中的表達(dá)水平直接影響著與腦水腫的程度,對(duì)腦水腫的發(fā)生、發(fā)展具有重要的調(diào)控作用,在腦水腫的預(yù)防和靶向治療上具有重要的臨床意義;創(chuàng)傷性腦損傷后,Ngn3在皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)元呈短暫性表達(dá),可能與腦損傷的應(yīng)激及神經(jīng)元損傷有關(guān),海馬區(qū)未分化的大顆粒細(xì)胞可能為神經(jīng)干細(xì)胞,其分化可能參與腦損傷后的神經(jīng)元再生。
【學(xué)位單位】：大理大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R651.15
【部分圖文】：

玻璃導(dǎo)管被牢固固定于鐵支架臺(tái)上，頂端安置一個(gè)定滑輪裝置，玻璃導(dǎo)管下方離實(shí)驗(yàn)臺(tái)面 15 cm 處放置金屬承重臺(tái)及麻醉后實(shí)驗(yàn)大鼠。細(xì)魚絲線懸吊砝碼使其底部處于水平狀，底面與大鼠頭部擺放部位相平行，以保證打擊時(shí)撞擊面處于水平。大鼠頭頂部固定 頭盔 ，可避免局部顱骨損傷，同時(shí)可以使砝碼對(duì)大鼠頭顱的打擊力呈彌散分布，造成大腦組織彌散損傷。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均選擇 10% 的水合氯醛 3.5 ml/Kg 腹腔麻醉，模型組根據(jù)傷后時(shí)間 6h，1d，2d，5d，7d 麻醉后斷頸處死取材（腦組織），每個(gè)時(shí)間點(diǎn)另取1 只 SD 大鼠作為正常對(duì)照組麻醉后斷頸處死取材（腦組織），一部分采用 10%的中性福爾馬林固定液固定，一部分置于消毒凍存管凍存于 -86℃ 冰箱保存。圖 1 創(chuàng)傷性腦損傷模型打擊裝置Fig 1 Strike device of traumatic brain injury model

大理大學(xué)碩士學(xué)位論文第 3 章 結(jié) 果3.1 形態(tài)學(xué)觀察3.1.1 大體形態(tài)觀察正常對(duì)照組大腦形態(tài)完整，色澤明亮，被膜下無點(diǎn)狀出血，血管走行及質(zhì)的溝回紋理清晰（圖 2A）；模型組大腦形態(tài)完整，色澤暗紅，可見腦實(shí)血、呈水腫樣，局部有腦實(shí)質(zhì)挫裂傷改變，血管走行及腦實(shí)質(zhì)溝回紋理模糊2B）。

可見腦實(shí)質(zhì)充血、呈水腫樣，局部有腦實(shí)質(zhì)挫裂傷改變，血管走行及腦實(shí)質(zhì)溝回紋理模糊（圖2B）。3.1.2 顯微形態(tài)觀察H-E 染色后顯微鏡下觀察，正常對(duì)照組大腦皮質(zhì)及海馬區(qū)組織清晰、結(jié)構(gòu)完整，神經(jīng)元密集、排列整齊，神經(jīng)細(xì)胞胞漿豐富，胞質(zhì)染色淡，細(xì)胞核居中，核仁明顯，海馬區(qū)顆粒層邊緣可見少量未分化的大顆粒細(xì)胞，胞漿豐富（圖3A-B）。 TBI 模型組大腦皮質(zhì)和海馬區(qū)結(jié)構(gòu)神經(jīng)細(xì)胞排列凌亂，神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量圖 2A 正常對(duì)照組大鼠腦外觀形態(tài)。Fig 2A Brain appearance of normalcontrol group rats.圖 2B TBI 模型組（1 d）大鼠腦外觀形態(tài)，“↑”示腦挫裂區(qū)。Fig 2B Brain appearance of TBI rats modelafter 1d. “↑” showing contusion andlaceration of brain.AB
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 陳梅花;陳貴珍;賈萬鈞;孫汝亮;胡丙杰;;改良大鼠彌漫性腦損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蚚J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2013年07期

2 張巧梅;謝亞寧;王強(qiáng);;Neurogenin基因家族對(duì)疾病治療前景的研究進(jìn)展[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2013年02期

3 陶靖,葛堅(jiān),黃冰,卓業(yè)鴻,陳慧怡,郭彥,陳系古;胚胎干細(xì)胞源性與海馬源性神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)與分化的特性比較[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2003年03期

4 劉玉新,姚新福,尹維剛;腦海馬結(jié)構(gòu)研究進(jìn)展[J];寧波大學(xué)學(xué)報(bào)(理工版);2000年03期

本文編號(hào)：2868861