【摘要】：目的嚴重的燒傷休克被認為是導致燒傷后早期腎功能下降的主要原因之一,而繼發(fā)燒傷后急性腎損傷(AKI)的患者死亡率明顯增加。本研究通過對嚴重燙傷大鼠采用乳酸鈉林格液(LR)和高滲鈉鹽溶液(HS,300mmol/L)復蘇治療作比較,分別從腎功能、腎組織細胞形態(tài)變化、炎癥和氧化應激損傷、以及相關信號轉導通路變化,探討HS對重度燙傷大鼠腎損傷的影響。方法將56只雌性SD大鼠(體重:230±15g)隨機分為三組:假傷組(8只,模擬假燙)、和燙傷組LR組和HS組(各24只)。將所有大鼠采用腹腔注射麻醉,行背部剃除毛發(fā)和尾靜脈放置留置針管,假傷組大鼠采用溫水模擬假燙后直接取標本,燙傷組大鼠采用開水燙傷背部致30%體表總面積(TBSA)深二至三度燙傷,再分別通過尾靜脈輸注LR和300mmol/L HS進行復蘇治療,并在復蘇后2、8、24h時間點取大鼠動脈血和腎臟組織。第一部分:高滲鈉鹽溶液對嚴重燙傷大鼠血鈉、腎功能及組織病理形態(tài)的影響取出收集各組大鼠的血漿和腎臟組織標本,血漿中鈉離子、肌酐和尿素氮(BUN)濃度直接通過自動生化分析儀測出,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(Elisa)測定血漿中中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)含量,干濕質量法測定腎臟組織中的濕/干比值,HE染色對比各組大鼠腎臟組織細胞形態(tài)差異。第二部分:高滲鈉鹽溶液對嚴重燙傷大鼠血漿炎癥介質表達及腎臟組織氧化應激損傷的影響采用Elisa法檢測血漿中腫瘤壞死因子(TNF)α、白細胞介素(IL)6及高遷移率族蛋白B1(HMGB1);硫代巴比妥酸法檢測腎臟組織丙二醛(MDA)水平;羥胺法檢測腎臟組織超氧化物歧化酶(SOD)含量。第三部分:高滲鈉鹽溶液對嚴重燙傷大鼠腎臟組織中p38MAPK通路活化的影響取出凍存腎臟組織,采用蛋白質印跡法(Western Blot)檢測腎臟組織中p38MAPK蛋白表達,以磷酸化p38MAPK/p38MAPK的比值表示p38MAPK通路活化程度。結果第一部分與LR組相比,傷后各時間點大鼠血漿中鈉濃度均明顯低于假傷組和HS組(P0.01)。傷后各時間點,LR組和HS組大鼠血漿中肌酐、尿素氮以及NGAL含量均顯著高于假傷組(P0.01)。傷后2h,LR組血漿中肌酐水平和HS組相近(P0.05),其后8h和24h兩組差異顯著;傷后2h和24h兩治療組血漿尿素氮水平差異不明顯,但在傷后8h兩組差異顯著(P0.01);傷后各時間點LR組大鼠血漿中NGAL水平均明顯高于HS組(P0.01)。傷后各時間點,LR組中腎臟組織W/D比值均高于假傷組和HS組(P0.01)。腎臟組織HE染色提示,傷后8h LR組中腎小管上皮細胞腫脹和壞死,官腔狹窄,可見大量炎性細胞滲出,而HS組腎組織損傷相對減輕;腎小管損傷病理學評分顯示,LR組評分分值顯著高于假傷組和HS組(P0.05)。第二部分與假傷組相比,LR組和HS組大鼠血漿中TNF-α和IL-6水平均顯著升高,且在不同時間點LR組血漿中TNF-α和IL-6水平均顯著高于HS組(P0.01);在傷后2h,三組間大鼠血漿HMGB1水平相近,無統(tǒng)計學差異(P0.05),但在傷后8h和24h,LR組和HS組血漿HMGB1水平均升高,且LR組HMGB1含量高于HS組(P0.01)。在傷后不同時間點,LR組和HS組與假傷組相比,大鼠腎臟組織中MDA含量均升高,但HS組在2h和24h腎臟組織中MDA含量增加不明顯。與LR組相比,HS組大鼠腎臟組織中MDA含量在不同時間點均降低(P0.01)。與假傷組相比,兩治療組中大鼠腎臟組織中SOD含量在傷后不同時間點均顯著降低(P0.01)。傷后2、8、24小時,LR組與HS組相比較,LR組腎組織中SOD含量降低更明顯,且兩組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)第三部分傷后不同時間點,各組間腎臟組織中p38MAPK通道活化程度比較,LR組和HS組磷酸化p38MAPK蛋白與假傷組相比均增高,且LR組增加更明顯。采用磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)/p38MAPK的A值比值表示p38MAPK通道活化程度。其比值顯示,LR組和HS組比值高于假傷組,同時LR組比值也高于HS組,其差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)結論(1)與LR相比,HS復蘇可防止嚴重燙傷后大鼠低鈉血癥的發(fā)生,并且能夠減緩傷后腎功能下降及減輕腎臟組織細胞損傷。(2)與LR相比,HS復蘇可減輕嚴重燙傷后大鼠血漿中炎癥反應和腎臟氧化應激損傷。(3)與LR相比,HS復蘇可部分抑制腎臟組織中p38MAPK磷酸化,從而減弱p38MAPK通道激活表達。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R644
【圖文】：

見圖 2，表 11。 各組大鼠傷后各時相點腎臟組織 p-p38 MAPK /p38 MAPK 值（x±s） 例數(shù) 傷后 2h 傷后 8h 傷后 24h 24 0.930 0.049a0.946 0.057a0.885 0.025a 24 0.568 0.020ab0.734 0.018ab0.693 0.036ab 250.73 215.05 291.85 <0.01 <0.01 <0.01組鼠數(shù) 8 只，假傷組大鼠腎臟組織 p-p38 MAPK /p38 MAPK 值為（0.327 0.023）；與假傷組比較，LR 組相比，bP＜0.01。LR組假傷組2 h 8 h 24 h2 h 8 h 24 hHS組

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本文編號：2760853