【摘要】：目的嚴(yán)重的燒傷休克被認(rèn)為是導(dǎo)致燒傷后早期腎功能下降的主要原因之一,而繼發(fā)燒傷后急性腎損傷(AKI)的患者死亡率明顯增加。本研究通過對嚴(yán)重燙傷大鼠采用乳酸鈉林格液(LR)和高滲鈉鹽溶液(HS,300mmol/L)復(fù)蘇治療作比較,分別從腎功能、腎組織細(xì)胞形態(tài)變化、炎癥和氧化應(yīng)激損傷、以及相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化,探討HS對重度燙傷大鼠腎損傷的影響。方法將56只雌性SD大鼠(體重:230±15g)隨機(jī)分為三組:假傷組(8只,模擬假燙)、和燙傷組LR組和HS組(各24只)。將所有大鼠采用腹腔注射麻醉,行背部剃除毛發(fā)和尾靜脈放置留置針管,假傷組大鼠采用溫水模擬假燙后直接取標(biāo)本,燙傷組大鼠采用開水燙傷背部致30%體表總面積(TBSA)深二至三度燙傷,再分別通過尾靜脈輸注LR和300mmol/L HS進(jìn)行復(fù)蘇治療,并在復(fù)蘇后2、8、24h時(shí)間點(diǎn)取大鼠動脈血和腎臟組織。第一部分:高滲鈉鹽溶液對嚴(yán)重燙傷大鼠血鈉、腎功能及組織病理形態(tài)的影響取出收集各組大鼠的血漿和腎臟組織標(biāo)本,血漿中鈉離子、肌酐和尿素氮(BUN)濃度直接通過自動生化分析儀測出,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Elisa)測定血漿中中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)含量,干濕質(zhì)量法測定腎臟組織中的濕/干比值,HE染色對比各組大鼠腎臟組織細(xì)胞形態(tài)差異。第二部分:高滲鈉鹽溶液對嚴(yán)重燙傷大鼠血漿炎癥介質(zhì)表達(dá)及腎臟組織氧化應(yīng)激損傷的影響采用Elisa法檢測血漿中腫瘤壞死因子(TNF)α、白細(xì)胞介素(IL)6及高遷移率族蛋白B1(HMGB1);硫代巴比妥酸法檢測腎臟組織丙二醛(MDA)水平;羥胺法檢測腎臟組織超氧化物歧化酶(SOD)含量。第三部分:高滲鈉鹽溶液對嚴(yán)重燙傷大鼠腎臟組織中p38MAPK通路活化的影響取出凍存腎臟組織,采用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)檢測腎臟組織中p38MAPK蛋白表達(dá),以磷酸化p38MAPK/p38MAPK的比值表示p38MAPK通路活化程度。結(jié)果第一部分與LR組相比,傷后各時(shí)間點(diǎn)大鼠血漿中鈉濃度均明顯低于假傷組和HS組(P0.01)。傷后各時(shí)間點(diǎn),LR組和HS組大鼠血漿中肌酐、尿素氮以及NGAL含量均顯著高于假傷組(P0.01)。傷后2h,LR組血漿中肌酐水平和HS組相近(P0.05),其后8h和24h兩組差異顯著;傷后2h和24h兩治療組血漿尿素氮水平差異不明顯,但在傷后8h兩組差異顯著(P0.01);傷后各時(shí)間點(diǎn)LR組大鼠血漿中NGAL水平均明顯高于HS組(P0.01)。傷后各時(shí)間點(diǎn),LR組中腎臟組織W/D比值均高于假傷組和HS組(P0.01)。腎臟組織HE染色提示,傷后8h LR組中腎小管上皮細(xì)胞腫脹和壞死,官腔狹窄,可見大量炎性細(xì)胞滲出,而HS組腎組織損傷相對減輕;腎小管損傷病理學(xué)評分顯示,LR組評分分值顯著高于假傷組和HS組(P0.05)。第二部分與假傷組相比,LR組和HS組大鼠血漿中TNF-α和IL-6水平均顯著升高,且在不同時(shí)間點(diǎn)LR組血漿中TNF-α和IL-6水平均顯著高于HS組(P0.01);在傷后2h,三組間大鼠血漿HMGB1水平相近,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),但在傷后8h和24h,LR組和HS組血漿HMGB1水平均升高,且LR組HMGB1含量高于HS組(P0.01)。在傷后不同時(shí)間點(diǎn),LR組和HS組與假傷組相比,大鼠腎臟組織中MDA含量均升高,但HS組在2h和24h腎臟組織中MDA含量增加不明顯。與LR組相比,HS組大鼠腎臟組織中MDA含量在不同時(shí)間點(diǎn)均降低(P0.01)。與假傷組相比,兩治療組中大鼠腎臟組織中SOD含量在傷后不同時(shí)間點(diǎn)均顯著降低(P0.01)。傷后2、8、24小時(shí),LR組與HS組相比較,LR組腎組織中SOD含量降低更明顯,且兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)第三部分傷后不同時(shí)間點(diǎn),各組間腎臟組織中p38MAPK通道活化程度比較,LR組和HS組磷酸化p38MAPK蛋白與假傷組相比均增高,且LR組增加更明顯。采用磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)/p38MAPK的A值比值表示p38MAPK通道活化程度。其比值顯示,LR組和HS組比值高于假傷組,同時(shí)LR組比值也高于HS組,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)結(jié)論(1)與LR相比,HS復(fù)蘇可防止嚴(yán)重燙傷后大鼠低鈉血癥的發(fā)生,并且能夠減緩傷后腎功能下降及減輕腎臟組織細(xì)胞損傷。(2)與LR相比,HS復(fù)蘇可減輕嚴(yán)重燙傷后大鼠血漿中炎癥反應(yīng)和腎臟氧化應(yīng)激損傷。(3)與LR相比,HS復(fù)蘇可部分抑制腎臟組織中p38MAPK磷酸化,從而減弱p38MAPK通道激活表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R644
【圖文】：

見圖 2，表 11。 各組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)腎臟組織 p-p38 MAPK /p38 MAPK 值（x±s） 例數(shù) 傷后 2h 傷后 8h 傷后 24h 24 0.930 0.049a0.946 0.057a0.885 0.025a 24 0.568 0.020ab0.734 0.018ab0.693 0.036ab 250.73 215.05 291.85 <0.01 <0.01 <0.01組鼠數(shù) 8 只，假傷組大鼠腎臟組織 p-p38 MAPK /p38 MAPK 值為（0.327 0.023）；與假傷組比較，LR 組相比，bP＜0.01。LR組假傷組2 h 8 h 24 h2 h 8 h 24 hHS組

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本文編號：2760853