【摘要】：目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)對(duì)重度燒傷大鼠早期肺臟和脾臟損傷的治療作用,為重度燒傷后器官損傷的治療提供新方法。方法:雄性Wistar大鼠72只,隨機(jī)分為假傷組、燒傷組和燒傷+干細(xì)胞治療組。(1)建立重度燒傷模型:1%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔麻醉,備皮,94℃水浴鍋、12s致大鼠背部30%總體表面積(TBSA)Ⅲ度燙傷創(chuàng)面。假傷組37℃、12s進(jìn)行處理。(2)處理方案:燒傷+干細(xì)胞治療組:燒傷大鼠經(jīng)尾靜脈注射2×10~6/1mLhUCMSCs,燒傷組和假傷注射1mL PBS。(3)指標(biāo)檢測(cè):采集各組傷后24h、48h肺和脾組織,免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在肺和脾組織中的浸潤(rùn)情況。HE染色觀察兩組織的病理學(xué)改變。TUNEL染色檢測(cè)肺和脾細(xì)胞的凋亡情況。ELISA法檢測(cè)肺和脾中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6表達(dá)情況。數(shù)據(jù)采用方差分析及兩兩比較的SNK-q檢驗(yàn),所有數(shù)據(jù)均采用x±S表示,P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:hUCMSCs可顯著降低重度燒傷大鼠肺和脾組織中炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)程度以及促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的水平,并顯著減輕重度燒傷大鼠肺和脾組織的病理學(xué)改變以及降低細(xì)胞凋亡的數(shù)量,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:hUCMSCs可通過(guò)有效減少肺、脾組織的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),減輕損傷組織炎癥反應(yīng)以及病理學(xué)改變,減少細(xì)胞凋亡數(shù)量,有效降低促炎因子水平TNF-α、IL-1β、IL-6,進(jìn)而發(fā)揮有效治療重度燒傷大鼠早期肺和脾損傷作用。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R644
【圖文】：

孔200ul→37℃避光孵育20min→每孔加入50ul終止液→輕輕拍打板條充分混勻30min內(nèi)在酶標(biāo)儀450nm測(cè)定每孔吸光度值。 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用 SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件包，采用方差分析及兩兩比較的 SNK-q 檢，數(shù)據(jù)采用（ x s）表示， P<0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果 肺組織中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度3 組大鼠肺組織中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度的變化情況如下圖 1 所示：傷后 24h、48h，假組中僅有少量的中性粒細(xì)胞（MPO+）浸潤(rùn)；燒傷組毛細(xì)血管擴(kuò)張，MPO+浸潤(rùn)數(shù)量最，而燒傷+干細(xì)胞治療組中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度則較燒傷組顯著減輕，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P<0.05）。（見(jiàn)圖 1）假傷組燒傷組燒傷+干細(xì)胞治療組

蒙古醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文（2019） 13.2 肺組織巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)程度3 組大鼠肺組織中巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)程度如下圖 2 所示：傷后 24h，假傷組中僅有少量巨噬細(xì)胞（CD68+）浸潤(rùn)；燒傷組可見(jiàn)脂褐素 CD68+浸潤(rùn)數(shù)量最多，燒傷+干細(xì)胞治組 CD68+浸潤(rùn)程度則較燒傷組顯著減輕。傷后 48h，燒傷組中仍有較多 CD68+浸潤(rùn)，傷+干細(xì)胞組浸潤(rùn)數(shù)量較燒傷組減輕。且在不同時(shí)間點(diǎn)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)程度均較燒傷組顯著改變，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（見(jiàn)圖 2）假傷組 燒傷組燒傷+干細(xì)胞治療組

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