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人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療肝衰竭的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-05 00:14
【摘要】:目的:探討不同途徑移植人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(HUC-MSCs)對(duì)大鼠急性肝衰竭(ALF)的療效。方法:SPF級(jí)SD大鼠60只,參照完全隨機(jī)對(duì)照原則分為4組:肝內(nèi)途徑治療組、尾靜脈途徑治療組、模型對(duì)照組、空白對(duì)照組。HUC-MSCs通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞標(biāo)志物和細(xì)胞分化再生能力三方面檢測(cè),采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)表面抗原分離鑒定HUC-MSCs。治療組HUC-MSCs移植數(shù)量:1.0×106個(gè)細(xì)胞。移植前后肝功能檢測(cè):細(xì)胞移植后0天、1天、2天、4天和7天檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總膽紅素(TBil)、白蛋白(ALB)含量;組織病理學(xué)觀察:細(xì)胞回輸后3天、1周、2周處死大鼠,制作肝臟標(biāo)本,采用HE染色觀察肝臟細(xì)胞病理學(xué)改變;人CK18水平的表達(dá)檢測(cè)采用免疫組化法,以觀察其在肝內(nèi)的定植情況;人CK8、CK18和AFP基因m RNA轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)應(yīng)用Real-time PCR法。結(jié)果:1.移植HUC-MSCs治療3天后,ALF大鼠移植治療組肝功能血清學(xué)指標(biāo)(TBil、ALT和ALB)水平顯著優(yōu)于模型對(duì)照組,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.與模型對(duì)照組比較,治療組肝臟HE染色顯示肝細(xì)胞再生明顯和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少,說(shuō)明HUC-MSCs對(duì)ALF大鼠肝臟具有修復(fù)作用。3.移植后3天,治療組可檢測(cè)到人CK18蛋白的表達(dá),說(shuō)明HUC-MSCs能夠在大鼠肝臟組織中存活并進(jìn)一步定向分化為具有分泌蛋白能力及表面特異性標(biāo)志物的細(xì)胞。4.造模后,治療組與模型對(duì)照組CK8、CK18和AFP m RNA的相對(duì)轉(zhuǎn)錄量出現(xiàn)顯著性差異(P0.05)。而對(duì)治療組之間進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn):尾靜脈組和肝內(nèi)途徑組上述相對(duì)轉(zhuǎn)錄量數(shù)值相當(dāng),二者之間的差異不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.HUC-MSCs移植可改善大鼠ALF后肝功能,促進(jìn)肝臟修復(fù),起到治療作用。2.肝內(nèi)注射與尾靜脈移植HUC-MSCs療效的無(wú)顯著差異,均能修復(fù)肝組織。3.HUC-MSCs能夠在大鼠肝臟組織中存活并進(jìn)一步定向分化為具有分泌蛋白能力及表面特異性標(biāo)志物的細(xì)胞。
【圖文】:

細(xì)胞表面抗原,標(biāo)志物,附圖


HUC-MSCs細(xì)胞表面抗原標(biāo)志物表達(dá)
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R575.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2697192

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