【摘要】：目的:急性肺損傷(acute lung injury,ALI)是一種常見的臨床危重病癥,嚴(yán)重的ALI極易發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合癥(acute respiratory ditress syndrome,ARDS),以進行性呼吸窘迫和難治性低氧血癥為臨床特征。由于缺乏有效的治療方法,該病的病死率高達30-40%,對民眾的健康造成了嚴(yán)重危害。ALI的本質(zhì)是機體內(nèi)失控的炎癥反應(yīng),其中促炎性細胞因子與抗炎性細胞因子的比例失衡是炎癥反應(yīng)失控的關(guān)鍵,因此重建促炎因子和抗炎因子的平衡有望成為治療ALI的新策略。白細胞介素-4(IL-4)是一種主要由Th2細胞產(chǎn)生的免疫活性細胞因子,它能夠抑制如IL-1β、IL-6、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等促炎性細胞因子的分泌,同時能促進IL-10、IL-13等抗炎性細胞因子的分泌,從而有利于恢復(fù)促炎因子和抗炎因子之間的平衡,有可能成為治療ALI的理想藥物。因此本研究旨在評價IL-4對小鼠ALI的治療效果。方法:將健康的C57BL/6J雌性小鼠隨機分為3組:對照組、LPS組和IL-4組。給LPS組和IL-4組的小鼠氣管中先滴注LPS溶液(15 mg/kg)以構(gòu)建穩(wěn)定的ALI模型,給對照組小鼠氣管中滴入體積相等的PBS作為對照。LPS滴注完畢0.5 h后向IL-4組小鼠氣管內(nèi)滴注IL-4溶液(10μg/kg),向?qū)φ战M和LPS組小鼠氣管內(nèi)均滴注等體積的PBS。觀察不同實驗組小鼠的精神狀態(tài)、進食情況、反應(yīng)能力等一般狀況。在LPS滴注完后的6 h和48 h兩個時間點采集標(biāo)本,利用蘇木精-伊紅染色法(HE染色)評價小鼠的肺病理損傷程度、測定小鼠的肺組織濕干重比、BCA法測定小鼠肺泡盥洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的總蛋白,并測定小鼠肺組織勻漿中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白水平的分泌(ELISA法)和mRNA水平的表達(q-PCR法)。結(jié)果:(1)與對照組小鼠相比,LPS組小鼠的肺組織出現(xiàn)肺泡壁增厚、肺泡結(jié)構(gòu)破壞以及炎癥細胞浸潤等病理改變,而且肺泡內(nèi)滲出的蛋白含量顯著增多,肺組織內(nèi)TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌量也顯著提高,說明本實驗中所制備的小鼠急性肺損傷模型是成功的;(2)在造模后6 h,與LPS組相比,IL-4治療組小鼠的一般狀況有所好轉(zhuǎn),肺組織損傷評分明顯變小(P0.01),肺泡灌洗液中的總蛋白濃度顯著降低(P0.01),肺組織勻漿中的IL-1β、IL-6的分泌也明顯減少(P0.01),肺組織濕干重比和肺組織勻漿中tnf-α,Il-6,Il-1b mRNA相對表達量有所降低,但沒有顯著性差異;(3)在造模后48 h,與LPS組小鼠相比,IL-4組小鼠肺組織病理損傷評分,肺濕干重比、肺泡灌洗液中總蛋白以及TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌均有降低,但都沒有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:(1)經(jīng)氣管滴注LPS可構(gòu)建穩(wěn)定的ALI小鼠模型;(2)外源性IL-4對LPS誘導(dǎo)的小鼠ALI在致病6 h內(nèi)有顯著的治療作用,但隨著治病時間延長至48 h,治療效果減弱;(3)IL-4對LPS誘導(dǎo)的ALI的治療作用可能與它能抑制肺組織內(nèi)促炎因子IL-6、IL-1β的分泌有關(guān)。
【圖文】：

Control LPS IL-4圖 3- 1 致傷后 6 h和 48 h各組小鼠肺組織 HE染色（400x）3.3 肺組織病理損傷評分結(jié)果顯示：造模后 6 h：LPS 組小鼠的肺組織發(fā)生了非常顯著的彌漫性病理損傷，與對照組相比其損傷評分明顯升高； IL-4組小鼠較 LPS 組小鼠的肺組織損傷程度減輕，病理損傷評分明顯下降，且達到了統(tǒng)計學(xué)差異。造模后 48 h：與 LPS組比 IL-4 組小鼠肺組織病理損傷評分亦有降低，但未達到統(tǒng)計學(xué)差異。各組小鼠肺組織病理損傷評分見表 3.1和圖 3-2表 3. 1 致傷后 6 h和 48 h各組小鼠肺組織病理損傷評分Control LPS IL-4損傷評分（6 h） 1.50±1.23 5.90±1.52** 3.10±0.74*##損傷評分（48 h） 1.0±0 9.67±1.51** 9.00±1.67

圖 3- 2 致傷后 6 h和 48 h各組小鼠肺組織病理損傷評分A: 致傷后 6 h 取材 B：致傷后 48 h 取材**，p < 0.01，與對照組比； ##，p < 0.01，與 LPS 組比3.4 肺組織濕干重比肺組織濕干重比(W/D)是反應(yīng)肺部液體滲出及水腫的主要指標(biāo)，造模后 30min，對 IL-4 組小鼠和 LPS 組小鼠給予不同的處理措施，向前者氣管內(nèi)于注入IL-4 溶液，向后者氣管內(nèi)滴注 PBS。致傷后 6 h 和致傷后 48 h 取材，如下圖所示，致傷后 6h：相比于對照組，LPS 組小鼠的肺組織的 W/D 明顯增大，，給予 IL-4 干預(yù)后，急性肺損傷小鼠的肺組織 W/D 有一定程度的降低，但是沒有達到統(tǒng)計學(xué)差異；致傷后 48 h：相比于對照組，LPS 組小鼠的肺組織 W/D 升高， IL-4 組小鼠的肺濕干重比與 LPS 組相比較有所下降，但無統(tǒng)計學(xué)意義。各組小鼠肺的W/D 結(jié)果如表 3.2 和圖 3-3.
【學(xué)位授予單位】：軍事科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R563.8

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8 ;Ｃａｌｆａｃｔａｎｔ在兒科急性肺損傷中的療效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

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本文編號：2690204