【摘要】：目的 檢測(cè)多汗癥患者腋窩汗腺水通道蛋白5（aquaporin5，AQP5）的表達(dá)與定位，并通過建立人體汗腺細(xì)胞體外模型的實(shí)驗(yàn)研究，探討其與多汗癥發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。 方法 收集手汗癥合并腋窩中重度多汗患者（實(shí)驗(yàn)組）及非多汗患者（對(duì)照組）腋窩皮膚及血清標(biāo)本，HE染色及透射電鏡觀察兩組間形態(tài)學(xué)差異，并電鏡下計(jì)數(shù)汗腺細(xì)胞分泌顆粒，免疫組化、熒光定量PCR及Western-blot法檢測(cè)AQP5表達(dá)。 酶消化法培養(yǎng)兩組汗腺細(xì)胞，通過細(xì)胞免疫化學(xué)法鑒定細(xì)胞，，并比較兩組細(xì)胞生長趨勢(shì)及AP5表達(dá)；Elisa法檢測(cè)兩組血清乙酰膽堿濃度，并按照測(cè)得兩組濃度配制培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，通過免疫熒光法及Western-blot法檢測(cè)汗腺細(xì)胞AQP5表達(dá)。 結(jié)果 兩組間在病理形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)上未見明顯差異；實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞分泌顆粒顯著高于對(duì)照組，且AQP5mRNA及蛋白表達(dá)量顯著高于對(duì)照組；培養(yǎng)的汗腺細(xì)胞抗-CK7,抗-CK19染色陽性，抗-Actin染色陰性，兩組細(xì)胞生長趨勢(shì)接近；實(shí)驗(yàn)組AQP5mRNA表達(dá)量高于對(duì)照組（P0.05），而蛋白表達(dá)無明顯差異（P0.05）； 實(shí)驗(yàn)組外周血乙酰膽堿濃度高于對(duì)照組（P0.05）；按照測(cè)得濃度配制培養(yǎng)液培養(yǎng)汗腺細(xì)胞，6h后高濃度培養(yǎng)液汗腺細(xì)胞AQP5表達(dá)強(qiáng)度明顯高于低濃度組（P0.05）。 結(jié)論 手汗癥合并腋窩多汗者腋窩汗腺與非多汗癥者相比在形態(tài)學(xué)上無差異，但分泌顆粒增多，AQP5mRNA及蛋白表達(dá)增強(qiáng)，且外周血乙酰膽堿濃度升高，表明神經(jīng)遞質(zhì)（乙酰膽堿）過度釋放及AQP5的過表達(dá)可能同多汗癥發(fā)病機(jī)制相關(guān)； 體外培養(yǎng)腋窩多汗者汗腺細(xì)胞AQP5mRNA表達(dá)水平高于非多汗者，而蛋白表達(dá)無明顯差異，乙酰膽堿刺激后兩組體外培養(yǎng)的細(xì)胞AQP5表達(dá)均明顯增強(qiáng)，且高濃度組表達(dá)高于低濃度組，其提示手汗癥合并腋窩多汗者汗腺AQP5蛋白表達(dá)增強(qiáng)可能與神經(jīng)體液調(diào)節(jié)有關(guān)；
【圖文】：

31汗腺在形態(tài)結(jié)構(gòu)上未見明顯差異（見圖3.1,3.2）。圖3.1 對(duì)照組汗腺形態(tài)結(jié)構(gòu)（HE×400）圖3.2 實(shí)驗(yàn)組汗腺形態(tài)結(jié)構(gòu)（HE×400）圖注：黑色箭頭方向指向汗腺腺管3.2.2 汗腺超微結(jié)構(gòu)檢測(cè)結(jié)果透射電鏡觀察可見，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組汗腺細(xì)胞核呈橢圓形,可見胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、線粒體等細(xì)胞器，靠汗腺管腔位置附近可見高密度

汗腺在形態(tài)結(jié)構(gòu)上未見明顯差異（見圖3.1,3.2）。圖3.1 對(duì)照組汗腺形態(tài)結(jié)構(gòu)（HE×400）圖3.2 實(shí)驗(yàn)組汗腺形態(tài)結(jié)構(gòu)（HE×400）圖注：黑色箭頭方向指向汗腺腺管3.2.2 汗腺超微結(jié)構(gòu)檢測(cè)結(jié)果透射電鏡觀察可見，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組汗腺細(xì)胞核呈橢圓形,可見胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、線粒體等細(xì)胞器，靠汗腺管腔位置附近可見高密度
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R655;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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1 方利君,付小兵,孫同柱,李建福,程飚,楊銀輝,王玉新,王通;在體誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為表皮細(xì)胞的初步觀察[J];中華創(chuàng)傷雜志;2003年04期

2 涂遠(yuǎn)榮;李旭;林敏;賴繁彩;陳劍鋒;葉建剛;代祖建;;手汗癥患者胸交感神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)觀察[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2006年07期

3 涂遠(yuǎn)榮;葉建剛;李旭;林敏;賴繁彩;陳劍鋒;;手汗癥患者胸交感神經(jīng)節(jié)乙酰膽堿受體α7亞單位的表達(dá)與臨床意義[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2006年11期

4 代祖建;涂遠(yuǎn)榮;李旭;林敏;賴繁彩;陳劍鋒;;手汗癥患者胸交感神經(jīng)節(jié)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶、血管活性腸肽的表達(dá)及意義[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2007年08期

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本文編號(hào)：2553269