【摘要】：目的顱腦損傷動(dòng)物模型是研究顱腦損傷機(jī)制和診療方法的重要的基礎(chǔ)平臺(tái)。因?yàn)樾∈缶哂谢蛐蛄信c人類(lèi)較為接近、易于進(jìn)行轉(zhuǎn)基因研究、成本低等優(yōu)點(diǎn),所以小鼠是最常用于制作小動(dòng)物顱腦損傷模型的動(dòng)物之一。目前國(guó)內(nèi)外已經(jīng)發(fā)展了許多種方法來(lái)建立小鼠顱腦損傷模型,其中液壓打擊法是最常使用的方法之一。海馬損傷在臨床上具有重要意義,但是國(guó)內(nèi)外對(duì)于如何建立不同程度小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷鮮有系統(tǒng)性的研究。本研究使用標(biāo)準(zhǔn)化的手術(shù)方法和國(guó)際通用的液壓打擊儀,建立穩(wěn)定的不同程度小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型,明確打擊部位和打擊力度等。為進(jìn)一步深入開(kāi)展創(chuàng)傷性顱腦損傷的相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 方法健康成年雄性C57/BL6小鼠180只,體質(zhì)量20g-25g。隨機(jī)分為對(duì)照組(n=30),實(shí)驗(yàn)組：輕型打擊創(chuàng)傷組(n=50)、中型打擊創(chuàng)傷組(n=50)、重型打擊創(chuàng)傷組(n=50)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組都進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的手術(shù)步驟。利用小鼠腦立體定位圖譜對(duì)小鼠海馬結(jié)構(gòu)進(jìn)行空間定位。選擇前囟點(diǎn)后方2mm,矢狀縫右側(cè)2mm作為圓心,用磨鉆磨出一個(gè)直徑為2mm的骨孔,作為連接打擊帽和打擊的位置。對(duì)照組小鼠僅行頭皮切開(kāi)和磨除骨窗,保持硬膜完整,不進(jìn)行液壓打擊致傷,實(shí)驗(yàn)組用液壓打擊致傷。輕型組、中型組、重型組小鼠液壓打擊壓力分別為0.6-0.8atm,1.6-1.8atm,2.6-2.8atm;沖擊時(shí)程約為20ms。造模后按照不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行生命體征監(jiān)測(cè)、mNSS神經(jīng)功能評(píng)分、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)、大體標(biāo)本觀測(cè)、TTC染色、HE染色、和小動(dòng)物頭部MRI檢查等。 結(jié)果經(jīng)過(guò)對(duì)致傷后小鼠的觀測(cè)證實(shí)：打擊力度越大,腦損傷越重,損傷后死亡率越高,行為學(xué)評(píng)分越低,腦水腫程度越重,腦挫裂傷灶和MRI影像學(xué)改變?cè)矫黠@。各組小鼠腦損傷后大腦皮層、蛛網(wǎng)膜下腔、腦挫裂傷灶周?chē)蛹捌酉掳踪|(zhì)均有不同程度出血,損傷越重,出血越明顯。小鼠腦損傷后空間定位和記憶功能受損。TBI后各實(shí)驗(yàn)組小鼠死亡率存在顯著差異(X2=27.17,P0.05)；各組小鼠TBI后mNSS評(píng)分均明顯升高,隨著小鼠傷情恢復(fù),mNSS評(píng)分也呈逐漸下降趨勢(shì)；各組小鼠逃避潛伏期存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=12.45,P0.05)；各組小鼠目標(biāo)象限百分率之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=3.537,P0.05)。 結(jié)論借助本組實(shí)驗(yàn)選用的液壓打擊儀系統(tǒng)建立的小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型具有致傷部位精確、致傷程度穩(wěn)定、重復(fù)性好、個(gè)體隨機(jī)誤差小的特點(diǎn)。經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)踐,我們總結(jié)出了建立小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型的標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟。小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型制造的打擊創(chuàng)傷可以明確分級(jí),并且不同嚴(yán)重級(jí)別創(chuàng)傷的傷后神經(jīng)功能表現(xiàn)和恢復(fù)過(guò)程各有特點(diǎn),表明本模型可以穩(wěn)定地制造不同程度創(chuàng)傷。為創(chuàng)傷性顱腦損傷的深入研究提供優(yōu)良的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。小動(dòng)物MRI動(dòng)態(tài)連續(xù)觀察可以客觀地觀察TBI后小鼠創(chuàng)傷部位、程度、轉(zhuǎn)歸等,從而對(duì)小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估。TTC染色對(duì)判斷創(chuàng)傷傷道具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。創(chuàng)傷后各組小鼠在早期神經(jīng)功能恢復(fù)較快,但長(zhǎng)期神經(jīng)功能缺失恢復(fù)較慢甚至無(wú)法恢復(fù),這與臨床所見(jiàn)到的顱腦損傷病例特點(diǎn)相似。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R651.15;R-332

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 劉斌,江基堯;白蛋白減輕大鼠液壓顱腦損傷傷后腦水腫和神經(jīng)功能障礙的劑量效應(yīng)[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2003年05期

2 康偉民;只達(dá)石;黃慧玲;;亞低溫在蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期的腦保護(hù)作用[J];國(guó)際腦血管病雜志;2006年02期

3 晏怡,唐文淵;亞低溫對(duì)顱腦損傷后顱內(nèi)高壓的治療[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2000年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 王連友;大鼠液壓沖擊顱腦損傷模型的立體定向控制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

2 康偉民;蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷和亞低溫保護(hù)作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 薛凱;激光多普勒監(jiān)測(cè)重型顱腦創(chuàng)傷患者腦血流及亞低溫對(duì)腦血流影響的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

2 梁晉;重型顱腦創(chuàng)傷患者高凝狀態(tài)持續(xù)監(jiān)測(cè)的意義及亞低溫對(duì)其影響的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

3 屈陽(yáng);水通道蛋白4 siRNA聯(lián)合亞低溫治療創(chuàng)傷后腦水腫的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：2543655