發(fā)布時間：2019-09-29 03:28

【摘要】：目的顱腦損傷動物模型是研究顱腦損傷機制和診療方法的重要的基礎平臺。因為小鼠具有基因序列與人類較為接近、易于進行轉(zhuǎn)基因研究、成本低等優(yōu)點,所以小鼠是最常用于制作小動物顱腦損傷模型的動物之一。目前國內(nèi)外已經(jīng)發(fā)展了許多種方法來建立小鼠顱腦損傷模型,其中液壓打擊法是最常使用的方法之一。海馬損傷在臨床上具有重要意義,但是國內(nèi)外對于如何建立不同程度小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷鮮有系統(tǒng)性的研究。本研究使用標準化的手術方法和國際通用的液壓打擊儀,建立穩(wěn)定的不同程度小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型,明確打擊部位和打擊力度等。為進一步深入開展創(chuàng)傷性顱腦損傷的相關動物實驗研究奠定堅實的基礎。 方法健康成年雄性C57/BL6小鼠180只,體質(zhì)量20g-25g。隨機分為對照組(n=30),實驗組：輕型打擊創(chuàng)傷組(n=50)、中型打擊創(chuàng)傷組(n=50)、重型打擊創(chuàng)傷組(n=50)。實驗組和對照組都進行標準化的手術步驟。利用小鼠腦立體定位圖譜對小鼠海馬結(jié)構(gòu)進行空間定位。選擇前囟點后方2mm,矢狀縫右側(cè)2mm作為圓心,用磨鉆磨出一個直徑為2mm的骨孔,作為連接打擊帽和打擊的位置。對照組小鼠僅行頭皮切開和磨除骨窗,保持硬膜完整,不進行液壓打擊致傷,實驗組用液壓打擊致傷。輕型組、中型組、重型組小鼠液壓打擊壓力分別為0.6-0.8atm,1.6-1.8atm,2.6-2.8atm;沖擊時程約為20ms。造模后按照不同時間點進行生命體征監(jiān)測、mNSS神經(jīng)功能評分、Morris水迷宮實驗、大體標本觀測、TTC染色、HE染色、和小動物頭部MRI檢查等。 結(jié)果經(jīng)過對致傷后小鼠的觀測證實：打擊力度越大,腦損傷越重,損傷后死亡率越高,行為學評分越低,腦水腫程度越重,腦挫裂傷灶和MRI影像學改變越明顯。各組小鼠腦損傷后大腦皮層、蛛網(wǎng)膜下腔、腦挫裂傷灶周圍皮層及皮層下白質(zhì)均有不同程度出血,損傷越重,出血越明顯。小鼠腦損傷后空間定位和記憶功能受損。TBI后各實驗組小鼠死亡率存在顯著差異(X2=27.17,P0.05)；各組小鼠TBI后mNSS評分均明顯升高,隨著小鼠傷情恢復,mNSS評分也呈逐漸下降趨勢；各組小鼠逃避潛伏期存在顯著統(tǒng)計學差異(F=12.45,P0.05)；各組小鼠目標象限百分率之間存在統(tǒng)計學差異(F=3.537,P0.05)。 結(jié)論借助本組實驗選用的液壓打擊儀系統(tǒng)建立的小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型具有致傷部位精確、致傷程度穩(wěn)定、重復性好、個體隨機誤差小的特點。經(jīng)過反復實踐,我們總結(jié)出了建立小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型的標準化操作步驟。小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型制造的打擊創(chuàng)傷可以明確分級,并且不同嚴重級別創(chuàng)傷的傷后神經(jīng)功能表現(xiàn)和恢復過程各有特點,表明本模型可以穩(wěn)定地制造不同程度創(chuàng)傷。為創(chuàng)傷性顱腦損傷的深入研究提供優(yōu)良的動物實驗平臺。小動物MRI動態(tài)連續(xù)觀察可以客觀地觀察TBI后小鼠創(chuàng)傷部位、程度、轉(zhuǎn)歸等,從而對小鼠海馬區(qū)液壓沖擊顱腦損傷模型進行準確評估。TTC染色對判斷創(chuàng)傷傷道具有獨特的優(yōu)勢。創(chuàng)傷后各組小鼠在早期神經(jīng)功能恢復較快,但長期神經(jīng)功能缺失恢復較慢甚至無法恢復,這與臨床所見到的顱腦損傷病例特點相似。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R651.15;R-332

【共引文獻】

相關期刊論文 前3條

1 劉斌,江基堯;白蛋白減輕大鼠液壓顱腦損傷傷后腦水腫和神經(jīng)功能障礙的劑量效應[J];中華神經(jīng)醫(yī)學雜志;2003年05期

2 康偉民;只達石;黃慧玲;;亞低溫在蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期的腦保護作用[J];國際腦血管病雜志;2006年02期

3 晏怡,唐文淵;亞低溫對顱腦損傷后顱內(nèi)高壓的治療[J];重慶醫(yī)科大學學報;2000年01期

相關博士學位論文 前2條

1 王連友;大鼠液壓沖擊顱腦損傷模型的立體定向控制研究[D];天津醫(yī)科大學;2006年

2 康偉民;蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷和亞低溫保護作用[D];天津醫(yī)科大學;2006年

相關碩士學位論文 前3條

1 薛凱;激光多普勒監(jiān)測重型顱腦創(chuàng)傷患者腦血流及亞低溫對腦血流影響的研究[D];天津醫(yī)科大學;2005年

2 梁晉;重型顱腦創(chuàng)傷患者高凝狀態(tài)持續(xù)監(jiān)測的意義及亞低溫對其影響的研究[D];天津醫(yī)科大學;2007年

3 屈陽;水通道蛋白4 siRNA聯(lián)合亞低溫治療創(chuàng)傷后腦水腫的研究[D];天津醫(yī)科大學;2010年

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本文編號：2543655