【摘要】：背景:骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療心肌梗死是近年來的研究熱點,但是心肌梗死區(qū)域的缺血缺氧微環(huán)境和早期炎癥反應不利于移植細胞的存活,影響治療效果。目的:探討PTEN基因沉默骨髓間充質(zhì)干細胞治療急性心肌梗死的效果。方法:(1)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞隨機分為3組,空白對照組不進行任何處理,陰性對照組用Lipofectamin2000轉(zhuǎn)染無意義的NCsiR NA,RNAi組用Lipofectamin2000轉(zhuǎn)染PTEN基因特異的siR NA。采用MTT法描繪細胞生長曲線,流式細胞儀檢測細胞周期;(2)取30只SD大鼠建立心肌梗死模型,隨機分為3組,每組10只,分別為空白對照組、陰性對照組、RNAi組。建模6 h后,使用微量注射器和立體定位儀在左心室前壁梗死區(qū)中心注射相應的骨髓間充質(zhì)干細胞,治療后4周進行超聲心功能檢測,采用熒光顯微鏡觀察細胞的存活和增殖情況。結果與結論:(1)RNAi組骨髓間充質(zhì)干細胞在培養(yǎng)各時間點的吸光度值均顯著大于空白對照組和陰性對照組;(2)RNAi組S+G2期細胞占總數(shù)的比例顯著大于空白對照組和陰性對照組(P0.05);(3)RNAi組大鼠心肌組織中骨髓間充質(zhì)細胞數(shù)量顯著多于空白對照組和陰性對照組(P0.05);(4)治療4周,RNAi組的左心室射血分數(shù)、左心室短軸縮短率顯著小于空白對照組和陰性對照組(P0.05);(5)體外實驗表明PTEN基因沉默能有效地促進骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖,抑制細胞凋亡;(6)體內(nèi)實驗表明PTEN基因沉默的骨髓間充質(zhì)干細胞在心肌梗死區(qū)域更易存活和擴增,心功能改善明顯。
[Abstract]:Background: bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for myocardial infarction is a hot topic in recent years, but the ischemic and hypoxic microenvironment and early inflammatory reaction in myocardial infarction area are not conducive to the survival of transplanted cells and affect the therapeutic effect. Objective: to investigate the effect of PTEN gene silencing bone marrow mesenchymal stem cells in the treatment of acute myocardial infarction. Methods: (1) Bone marrow mesenchymal stem cells of SD rats were randomly divided into three groups: blank control group without any treatment, negative control group with Lipofectamin2000 transfection of meaningless NCsiR NA,RNAi group with Lipofectamin2000 transfection of PTEN gene specific siR NA. MTT method was used to depict cell growth curve and flow cytometry was used to detect cell cycle. (2) 30 SD rats were selected to establish myocardial infarction model and were randomly divided into 3 groups: blank control group, negative control group and RNAi group. After 6 hours of modeling, bone marrow mesenchymal stem cells were injected into the center of left ventricular anterior wall infarction area with microinjector and stereotactic locator. Echocardiographic cardiac function was measured 4 weeks after treatment. The survival and proliferation of cells were observed by fluorescence microscope. Results and conclusion: (1) the absorbance of bone marrow mesenchymal stem cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group at all time points. (2) the proportion of S G2 phase cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group (P0.05). (3) the number of bone marrow mesenchymal cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group (P0.05). (4) after 4 weeks of treatment, left ventricular ejection fraction and shortening rate of left ventricular short axis in RNAi group were significantly lower than those in blank control group and negative control group (P0.05). (5) in vitro experiments showed that PTEN gene silencing could effectively promote the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and inhibit the apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells. (6) in vivo experiments showed that PTEN gene silencing bone marrow mesenchymal stem cells were easier to survive and expand in myocardial infarction area, and the heart function was improved obviously.
【作者單位】： 河南大學淮河醫(yī)院老年病科;
【分類號】：R542.22

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6 湯富酬,李成建,薛友紡;雙鏈RNA在基因沉默中的作用[J];中國生物化學與分子生物學報;2002年06期

7 卞曉翠;劉玉琴;;基因功能的抑制[J];中華病理學雜志;2006年05期

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9 劉春喜;壽命相關基因與衰老的生化機制[J];生理科學進展;2004年01期

10 ;小資料[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學;2005年06期

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3 施定基;張文俊;鄧元告;冉亮;康瑞娟;趙興貴;張越南;;藻類基因工程的一些進展[A];中國海洋生化學術會議論文薈萃集[C];2005年

4 王海光;李自超;;植物干旱脅迫應答基因及其產(chǎn)物研究進展[A];2003年全國作物遺傳育種學術研討會論文集[C];2003年

5 陳愛葵;李梅紅;;RNAi—基因沉默[A];遺傳學進步與人口健康高峰論壇論文集[C];2007年

6 項曉瓊;;RNAi技術在毒理學中的應用[A];中國藥理學會毒理專業(yè)委員會第十次學術會議論文摘要匯編[C];2004年

7 劉家云;郝曉柯;李慶霞;馬龍洋;溫偉紅;賈林濤;楊安鋼;;靶向X區(qū)的siRNA抑制HBV基因的表達和復制[A];第九屆西北五�。▍^(qū)）檢驗醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2005年

8 焦鋒;樓程富;;基因在植物多倍體中的進化研究進展[A];中國蠶學會第三屆青年學術研討會暨浙江省第二屆青年學術論壇——蠶桑分論壇論文集（上冊）[C];2001年

9 吳麗娟;陳偉;康格非;蔣建新;朱佩芳;;鋅指蛋白A20基因沉默載體研究與初步應用[A];第五次全國中青年檢驗醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2006年

10 徐新云;毛侃瑯;毛吉炎;;CYP3A4基因沉默和高表達對三氯乙烯致肝細胞毒性的影響[A];中國毒理學會第六屆全國毒理學大會論文摘要[C];2013年

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1 Esha Dey Pallavi Ail 編譯 碩軍;“基因沉默”先導者[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2013年

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3 記者 李荔;朱冰：環(huán)境也可以改變基因[N];北京科技報;2012年

4 記者 毛黎;科學家成功解開大量基因沉默之謎[N];科技日報;2008年

5 醫(yī)學博士 科學松鼠會成員 致樺;美麗的干擾[N];中國經(jīng)營報;2010年

6 紀光偉;2006,最出彩的是基因[N];健康報;2006年

7 張?zhí)锟?基因編輯器被寄予厚望[N];中國醫(yī)藥報;2014年

8 張?zhí)锟?垃圾DNA并非垃圾[N];文匯報;2012年

9 記者　許琦敏;基因“梁祝悲劇”誘發(fā)血癌[N];文匯報;2007年

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7 邱慶明;若干生精細胞相關基因功能初步研究[D];中南大學;2009年

8 陳婷;果蠅中染色體乙�；c去乙酰化修飾及其與熱休克基因表達的關系[D];東北師范大學;2002年

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3 任夢飛;靈芝細胞懸浮培養(yǎng)中高表達靈芝鯊烯合酶基因提高靈芝酸單體的生產(chǎn)[D];昆明理工大學;2015年

4 梁甜;白樺OSC新基因的克隆、RNAi載體構建及遺傳轉(zhuǎn)化初步研究[D];東北林業(yè)大學;2015年

5 劉春娟;84K楊HDA903基因的克隆與功能分析[D];東北林業(yè)大學;2015年

6 胡亞平;Peroxiredoxin Ⅰ基因沉默對TGF-β1誘導的成纖維細胞增殖及膠原合成影響的實驗研究[D];河北聯(lián)合大學;2014年

7 蘇靜芬;慢病毒介導恒河猴P53和P21基因沉默的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

8 王素艷;殘緣璃眼蜱subolesin和半胱氨酸蛋白酶基因生物學功能初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

9 向婷;滲透壓脅迫下AM真菌Rhizophagus irregularis HOG1基因的功能研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

10 宋雪;利用CRISPR/Cas9和TALENs技術敲除斑馬魚Vap、C1H7orf55、mri1、BX284640.3和dscr6基因[D];山東大學;2015年

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