發(fā)布時間：2017-01-04 10:32

  本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對重癥急性胰腺炎大鼠急性肺損傷P38MAPK表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《福建醫(yī)科大學(xué)》 2013年

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對重癥急性胰腺炎大鼠急性肺損傷P38MAPK表達(dá)的影響

林葆  

【摘要】：本實(shí)驗(yàn)研究包括兩大部分，第一部分觀察p38絲裂原活化蛋白激酶（p38mitogen-activated protein kinase，p38MAPK）在肺組織的表達(dá)，探討p38MAPK通路在重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）急性肺損傷（acute lunginjury，ALI）發(fā)病機(jī)制中的作用；第二部分向SAP急性肺損傷大鼠模型移植同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs），研究其是否能部分阻斷p38MAPK通路，抑制炎癥因子的釋放，調(diào)節(jié)AQP1表達(dá)，減輕肺水腫，進(jìn)一步闡明BMSCs治療重癥急性胰腺炎的分子機(jī)制，為今后BMSCs治療SAP提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分重癥急性胰腺炎大鼠p38絲裂原活化蛋白激酶的表達(dá)與肺毛細(xì)血管內(nèi)皮屏障損傷的研究 目的研究p38絲裂原活化蛋白激酶（p38mitogen-activated protein kinase，p38MAPK）在重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）大鼠肺組織中的表達(dá)情況，并初步探討p38MAPK與SAP肺毛細(xì)血管內(nèi)皮屏障損傷的關(guān)系。 方法將40只健康雄性SD大鼠隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字表法）分為假手術(shù)（SO）組和SAP組，SAP組又分為3h、6h、12h及24h4個時間點(diǎn)組，共5組，每組8只。采用胰膽管逆行注射5%�；悄懰徕c的方法建立SAP大鼠模型。采用全自動生化分析儀檢測大鼠血清淀粉酶含量；采用HE染色方法觀察5組大鼠肺和胰腺組織的病理學(xué)改變；采用Elisa法檢測血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）水平；采用免疫組化方法檢測肺組織中磷酸化p38（p-p38）蛋白和水通道蛋白1（aquaporin1，AQP1）的表達(dá)水平；采用實(shí)時定量熒光PCR法（real-time PCR）檢測肺組織中AQP1mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果SAP各時間點(diǎn)組大鼠肺組織充血水腫，炎癥細(xì)胞浸潤；胰腺組織可見大片壞死，部分腺葉結(jié)構(gòu)模糊甚至消失；血清淀粉酶、TNF-α和IL-1β水平均較SO組高（P＜0.05）。SO組大鼠肺組織中p-p38蛋白僅有微量表達(dá)，而在SAP3h組，p-p38蛋白的表達(dá)就明顯上調(diào)，在6h時達(dá)高峰，24h時仍高于SO組（P＜0.05）。SAP各時間點(diǎn)組大鼠肺組織中AQP1mRNA及其蛋白的表達(dá)均較SO組下調(diào)（P＜0.05），并隨著時間的推移而逐漸下調(diào)；SAP組大鼠AQP1mRNA的表達(dá)與TNF-α、IL-1β及p-p38蛋白之間均存在負(fù)相關(guān)關(guān)（r=-0.87，P＜0.05；r=-0.88，P＜0.05；r=-0.78，P＜0.05）。 結(jié)論肺組織中AQP1表達(dá)的下調(diào)是SAP肺毛細(xì)血管內(nèi)皮屏障損傷的重要原因之一，其可能與p38MAPK的激活及炎癥因子的過度釋放有關(guān)。 第二部分骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對重癥急性胰腺炎大鼠肺毛細(xì)血管通透性的影響 目的探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）對重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）肺毛細(xì)血管滲漏的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法將56只健康雄性SD大鼠隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字表法）分為假手術(shù)（SO）組、模型（SAP）組和治療（BMSCs）組，SAP組和BMSCs組又分為6h、12h、24h三個亞組，每組8只SD大鼠。采用5%牛磺膽酸鈉胰膽管逆行注射建立SAP大鼠模型，BMSCs組經(jīng)股靜脈輸注BMSCs懸液。采用全自動生化分析儀檢測大鼠血清淀粉酶含量；采用HE染色方法觀察各組大鼠肺和胰腺組織的病理學(xué)改變；采用Elisa法檢測血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）水平；采用免疫組化方法檢測肺組織中磷酸化p38（p-p38）蛋白和水通道蛋白1（aquaporin1，AQP1）的表達(dá)水平；采用實(shí)時定量熒光PCR法（real-time PCR）檢測肺組織中AQP1mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果與SO組比較，SAP組各時間點(diǎn)胰腺、肺組織病理學(xué)改變明顯，血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β水平明顯上調(diào)；SAP組、BMSCs組磷酸化p38蛋白表達(dá)水平高于SO組，，而AQP1基因與蛋白表達(dá)水平下調(diào)，但BMSCs組與SAP組比較，磷酸化p38表達(dá)顯著下調(diào)，AQP1基因與蛋白表達(dá)水平顯著上升，并且肺、胰腺組織病理損傷減輕，血清淀粉酶、炎癥因子水平下降。 結(jié)論骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可減輕肺毛細(xì)血管滲漏，保護(hù)肺損傷，可能與抑制p38MAPK的激活及大量的炎癥因子的釋放有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R657.51
【目錄】：

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王建楓;鋅對大鼠肝臟硬脂酰輔酶A去飽和酶-1（SCD-1）的影響及其調(diào)控機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2008年

2 周春雷;五肽化合物PLNPK對大鼠抗GBM腎炎的治療作用及其作用機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

3 云宇;缺血后處理抗大鼠腎缺血—再灌注損傷的作用機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

4 劉明;梓醇對腦缺血損傷大鼠恢復(fù)早期神經(jīng)功能的影響及其機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

5 沙瑩;粒細(xì)胞集落刺激因子對腦缺血再灌注大鼠的治療及其作用機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2010年

6 李國;白介素-6中和抗體及索拉菲尼對野百合堿誘導(dǎo)大鼠肺動脈高壓的作用及其機(jī)制[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

7 莫雪安;同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療血管性癡呆大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

8 鄒彬;電刺激干預(yù)對廢用性肌萎縮大鼠線粒體生物合成和呼吸功能的影響[D];北京體育大學(xué);2011年

9 孫鳳平;參芪復(fù)方對GK大鼠腎臟NF-κB及PPARγ的影響[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2011年

10 陳笛;藁苯內(nèi)酯對大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陸奕;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對重癥急性胰腺炎大鼠損傷胰腺的組織修復(fù)作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

2 沈小凱;丹參大黃合劑對大鼠重癥急性胰腺炎腸源性內(nèi)毒素血癥的治療作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

3 劉道利;p38MAPK抑制劑SB203580在重癥急性胰腺炎大鼠模型中作用機(jī)制的研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2010年

4 張紅雷;依達(dá)拉奉對重癥急性胰腺炎大鼠腸粘膜屏障損傷的影響[D];南華大學(xué);2012年

5 韓海燕;伴高脂血癥性重癥急性胰腺炎大鼠腸道細(xì)菌移位的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

6 司惠麗;大黃對實(shí)熱證大鼠能量代謝影響的研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2012年

7 林葆;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對重癥急性胰腺炎大鼠急性肺損傷P38MAPK表達(dá)的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

8 陳連連;粉防己堿對血管性癡呆大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的炎性作用機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

9 張玉坤;染料木黃酮對大鼠肺動脈高壓的作用及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

10 羅潔;他達(dá)那非對分流型肺動脈高壓大鼠心肌肥厚及Cx43的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

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本文編號：233672