本文關(guān)鍵詞：激活SHH通路對急性腦缺血大鼠突觸再生的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《鄭州大學(xué)》 2014年

激活SHH通路對急性腦缺血大鼠突觸再生的影響

劉花艷  

【摘要】：背景和目的 隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展及生活方式的轉(zhuǎn)變，腦血管病的發(fā)生率每年都在上升，而且愈來愈趨于年輕化，不光是給社會和家庭帶來了繁重的負(fù)擔(dān)，同時也給病人帶來了心理上的包袱。缺血性腦血管病是腦血管病最常見的一種類型，其致殘率、致死率、致畸率極高，其重在早期診斷、早期積極治療、加強康復(fù)鍛煉和防止再復(fù)發(fā)。隨著對神經(jīng)修復(fù)學(xué)的不斷研究，神經(jīng)再生尤其是突觸再生對缺血性腦血管病有著重要意義。最近的研究發(fā)現(xiàn)，Shh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與缺血性腦血管病的相關(guān)表現(xiàn)在突觸再生方面。 Shh信號通路主要包括Shh信號肽，膜因子Ptch、Smo，下游轉(zhuǎn)錄因子Gli三部分，這些成分的逐級信息傳遞，或者其中因子的突變，都可活化誘導(dǎo)這一途徑，最后通過Gli作用于下游靶基因。Shh信號通路激活對腦缺血有保護作用，可以促進突觸的再生和重建，促進神經(jīng)功能的修復(fù)。因此，本實驗采用線栓法制作大鼠永久性缺血模型，在缺血半暗帶區(qū)觀察Sonic Hedgehog信號通路的特異性激活劑Purmorphamine分別在不同時間點通路下游分子Gli1的表達和突觸形成相關(guān)蛋白因子SYN、GAP-43的表達，進一步探討Shh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對大腦缺血皮質(zhì)區(qū)突觸再生的影響及其機制。 材料和方法 選用改良后的線栓法制作大鼠大腦中動脈缺血（Permanent Middle CerebralAretery Occlusion, PMCAO）模型。健康雄性的76只SD大鼠（重大約為280330g），按隨機數(shù)字表法將大鼠隨機分為假手術(shù)組，模型組和藥物組，其中假手術(shù)組12只，模型組和藥物組每組各32只，模型組和藥物組根據(jù)缺血時間6h，24h，72h，7d分四個亞組，每個亞組8只大鼠。模型制作成功后腹腔注射0.69mg/kg的Purmorphamine為藥物組(Purmorphamine粉劑使用前需二甲基酰胺完全溶解)，假手術(shù)組和模型組于術(shù)后以同樣的方式給予等劑量的二甲基酰胺(DMF)溶液注射。按大鼠大腦缺血時間點6h、24h、72h、7d分別采用兩種方法取腦，其中4只深度麻醉處死后1min內(nèi)取缺血大腦皮質(zhì)區(qū)腦組織，立即投液氮罐中速凍，然后置于-80度冰箱保存，用以檢測Gli1mRNA的含量；另取4只大鼠采用生理鹽水和甲醛心臟灌注，大腦組織甲醛浸泡固定后，脫水、透明、浸蠟后，石蠟包埋，取缺血大鼠大腦皮質(zhì)頂葉區(qū)行腦組織切片。 結(jié)果 1.缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)SYN的測定結(jié)果大腦皮層頂葉梗死周圍區(qū)可見SYN免疫反應(yīng)產(chǎn)物為棕黃色顆粒，分布密集，有的連接呈線狀為樹突脊，正常高表達，缺血時表達減低。缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)灰度值在6h開始降低，72h降低最為顯著，7d后開始上升，與假手術(shù)組相比各時間點明顯降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。藥物組在缺血后6h、24h、72h、7d時SYN的表達明顯高于模型組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。 2.缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)GAP-43的測定結(jié)果大腦皮質(zhì)頂葉缺血區(qū)可見GAP-43免疫反應(yīng)產(chǎn)物為小點狀或細(xì)顆粒狀沉積，此為GAP-43陽性表達。其中缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)GAP-43的免疫活性在缺血后6h表達量開始有所上升，72h升高最為顯著，7d后開始下降，與假手術(shù)組相比較差別有顯著意義（P0.05）；藥物組大腦缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)GAP-43在6h、24h、72h、7d免疫活性明顯高于模型組，差別有顯著意義（P0.05）。 3.缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)SYN mRNA、GAP-43mRNA、Gli1mRNA的表達 半定量RT-PCR模型組SYN mRNA表達在6h開始逐漸降低，72h降低最為顯著，7d后開始上升，與假手術(shù)組相比各時間點明顯降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。藥物組在缺血后6h、24h、72h、7d時SYNmRNA的表達明顯高于模型組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)；而缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)GAP-43mRNA在缺血后6h表達量逐漸開始上升，72h升高最為顯著，7d后開始下降，與假手術(shù)組相比較差別有顯著意義（P0.05）；藥物組大腦皮質(zhì)GAP-43mRNA在6h、24h、72h、7d表達量明顯高于模型組，差別有顯著意義（P0.05）。與假手術(shù)組比較，模型組和藥物組Gli1mRNA表達均升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)；模型組大腦皮質(zhì)缺血區(qū)Gli1mRNA于6h后逐漸開始升高，24h達高峰，，之后有所下降但維持在較高水平。藥物組各個時間點Gli1mRNA與模型組相比較表達量顯著增高，兩組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。 結(jié)論 (1)給予外源性Shh通路特異性激活劑Purmorphamine能激活下游分子Gli1的表達。 (2) Shh信號通路在缺血腦組織的表達可以上調(diào)GAP-43、SYN的表達。 (3) Shh信號通可能參與了局灶性腦缺血的神經(jīng)調(diào)節(jié)機制，可以促進突觸再生。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R743.3
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王敏;張秋霞;鄒海艷;趙暉;李佳;;竹節(jié)參總皂苷對慢性腦缺血大鼠海馬GFAP、GAP-43表達的影響[J];世界中醫(yī)藥;2013年02期

2 張松濤,李玲,邱建勇,李薇,徐莉;康復(fù)訓(xùn)練對大鼠腦梗死灶周圍BDNF表達的影響[J];中國康復(fù)理論與實踐;2003年03期

3 闞伯紅;于建春;劉存志;韓景獻;;Rho信號通路抑制中樞神經(jīng)軸突再生的研究進展[J];中國老年學(xué)雜志;2009年20期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高聰;占婷婷;林美容;謝富華;楊潔;區(qū)騰飛;馮欣;李威;林哲聰;;RhoA和Rock-Ⅱ在Lewis大鼠EAE模型中的表達[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2010年12期

2 ;Correlation between synaptic plasticity, associated proteins, and rehabilitation training in a rat model of cerebral infarction[J];Neural Regeneration Research;2008年06期

3 王晉麗;王春芳;王曉霞;李鵬飛;李靜;蔚洪恩;索耀君;王菲;;Wnt3a在大鼠骨髓源性膽堿能神經(jīng)元中的表達[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2008年01期

4 武麗;張麗萍;張曼;夏猛;;中樞神經(jīng)軸突再生的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制研究進展[J];時珍國醫(yī)國藥;2012年02期

5 邢變枝;陳紅;錢坤;湛彥強;張?zhí)K明;;胚胎干細(xì)胞定向分化為脊髓運動神經(jīng)元[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年01期

6 崔麗霞;郭鋒;李新毅;;β-淀粉樣蛋白與載脂蛋白E4對大鼠海馬突觸素的影響[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2014年06期

7 王根輩;徐永平;趙慧英;張艷;逄國梁;蔡青青;馬翔;楊永倩;范光麗;;突觸素在動情周期大鼠子宮中的分布[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2009年07期

8 趙慶杰,柳鵬,郝秀蘭,孫忠人;坐骨神經(jīng)損傷后脊髓前角細(xì)胞腦源性生長因子的表達及針刺治療的作用[J];中國臨床康復(fù);2004年13期

9 胡可慧;余茜;;康復(fù)訓(xùn)練促進腦梗死大鼠腦功能恢復(fù)機制的相關(guān)分析[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年08期

10 盧璽宇;屈強;;N-甲基-D-天冬氨酸受體介導(dǎo)神經(jīng)突觸長時程增強的研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年16期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李海燕;朱國祥;;康復(fù)訓(xùn)練對腦梗死大鼠腦組織結(jié)構(gòu)和功能影響的探究[A];浙江省針灸學(xué)會第五次會員代表大會學(xué)術(shù)論文匯編[C];2008年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李嫚;腦梗死后康復(fù)治療最佳時間窗及其機理的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

2 王煥明;大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化及自體移植治療顳葉癲癇實驗研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2007年

3 劉麗星;三七總皂苷調(diào)節(jié)MCAO大鼠Nogo-A/RhoA通路及保護Aβ25-35誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷的機制[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 羅慧瓊;銀杏內(nèi)酯對帕金森病小鼠中腦D-Glu含量的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2010年

2 劉瑞玲;tPNS對hBMSCs誘導(dǎo)分化后神經(jīng)元樣細(xì)胞生長狀態(tài)及凋亡的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

3 馮麗娟;康復(fù)訓(xùn)練結(jié)合電針治療對腦卒中肢體痙攣大鼠突觸結(jié)合蛋白Ⅰ表達的影響[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2011年

4 蘇淑杰;鼠神經(jīng)生長因子對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷后神經(jīng)修復(fù)的作用[D];鄭州大學(xué);2011年

5 潘惠娟;行為訓(xùn)練對海馬梗死大鼠學(xué)習(xí)記憶功能及梗死灶周圍和顳葉皮層NR2B表達的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 李逸塵;大鼠腦缺血再灌注后海馬內(nèi)皮細(xì)胞生長因子與突觸素關(guān)系的研究[D];蘭州大學(xué);2006年

7 客蕊;頭穴透刺法對急性腦梗死大鼠缺血半暗帶SYN及GAP-43表達的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2006年

8 江山;行為訓(xùn)練對大鼠海馬梗死后齒狀回區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、遷移能力的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

9 于海芙;酒精中毒及戒斷對大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬NMDA受體亞基NR2B表達的影響[D];延邊大學(xué);2006年

10 李軍;谷氨酸在腦出血患者中的作用及七葉皂苷鈉對其影響的研究[D];中南大學(xué);2006年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李辭蓉;華興邦;周浩良;宋大魯;胡元亮;;豚鼠針灸穴位圖譜的研制[J];上海針灸雜志;1992年02期

2 高天明，陳培熹;中樞興奮性氨基酸受體分子特性的研究[J];生理科學(xué)進展;1994年03期

3 崔城,湯浩,崔桂英,王愛梅,張鐵民;川芎嗪拮抗慶大霉素耳毒性作用的實驗研究[J];現(xiàn)代康復(fù);2001年04期

4 趙暉,張秋霞,穆陽;竹節(jié)參總皂苷對局灶性腦缺血大鼠模型的保護作用[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2005年03期

5 趙暉;李佳;穆陽;;竹節(jié)參總皂苷對中動脈栓塞模型大鼠血液流變學(xué)的影響[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2006年11期

6 王曉英,張均田;突觸可塑性與相關(guān)蛋白研究進展[J];中國藥理學(xué)通報;2001年04期

7 成澤東,陳以國,張利泰;針刺對大鼠體內(nèi)中藥有效成分趨向性影響的實驗研究[J];中國針灸;2002年01期

8 徐莉,李玲,陳景藻,郭振援,王冰水,袁華,劉衛(wèi);康復(fù)訓(xùn)練對大鼠腦梗死神經(jīng)功能恢復(fù)的影響[J];中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志;2000年02期

9 趙暉;王蕾;張秋霞;章紅英;;竹節(jié)參總皂苷對血管癡呆大鼠遞質(zhì)氨基酸及自由基代謝的影響[J];中國老年學(xué)雜志;2010年21期

10 譚來勛,孫圣剛,段申漢,王細(xì)林,吳秀枝;大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞對突觸可塑性的影響[J];卒中與神經(jīng)疾病;2005年03期

《中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）》電子雜志社有限公司
同方知網(wǎng)數(shù)字出版技術(shù)股份有限公司
地址：北京清華大學(xué) 84-48信箱 大眾知識服務(wù)
京ICP證040441號
互聯(lián)網(wǎng)出版許可證 新出網(wǎng)證（京）字008號
出版物經(jīng)營許可證 新出發(fā)京批字第直0595號

訂購熱線：400-819-9993 010-62982499
服務(wù)熱線：010-62985026 010-62791813
在線咨詢：
傳真：010-62780361
京公網(wǎng)安備11010802020475號

  本文關(guān)鍵詞：激活SHH通路對急性腦缺血大鼠突觸再生的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：228277