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Wnt3a在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血的早期腦損傷中影響神經(jīng)發(fā)生的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-01 02:09

  本文選題:神經(jīng)發(fā)生 切入點(diǎn):蛛網(wǎng)膜下腔出血 出處:《山東大學(xué)》2014年碩士論文


【摘要】:研究目的: 本研究通過(guò)觀察實(shí)驗(yàn)大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)中海馬組織的神經(jīng)發(fā)生情況,并進(jìn)一步檢測(cè)Wnt信號(hào)通路分子散亂蛋白-1和p-連環(huán)蛋白的表達(dá),探討在蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中Wnt3a能否發(fā)揮促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生的作用以及可能的機(jī)制。 研究方法: 選擇清潔健康的雄性SD大鼠共70只,將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組)、蛛網(wǎng)膜下腔出血組(SAH組)、干預(yù)劑Wnt3a Ⅰ組(Wnt3a Ⅰ組)、干預(yù)劑Wnt3aⅡ組(Wnt3aⅡ組)、干預(yù)劑Wnt3aⅢ組(Wnt3aⅢ組)、干預(yù)劑Wnt3aⅣ組(Wnt3aⅣ組)和拮抗劑DKK-1組(DKK-1組)。采用從枕大池注入自體動(dòng)脈血法建立蛛網(wǎng)膜下腔出血實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀Pg(shù)后對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行BrdU標(biāo)記,每次以50mg/kg BrdU的劑量腹腔注射,總共4次,每次間隔2h。干預(yù)劑Wnt3a與DKK-1均在SAH模型制備前6h從枕大池注入,無(wú)需給予干預(yù)劑的實(shí)驗(yàn)組以等量生理鹽水代替。通過(guò)免疫熒光技術(shù)在大鼠海馬組織的齒狀回區(qū)域選擇5個(gè)視野區(qū),計(jì)算視野中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和總細(xì)胞數(shù)以得出陽(yáng)性細(xì)胞百分率,以5個(gè)區(qū)域陽(yáng)性細(xì)胞百分率的均值作為評(píng)估神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells, NSCs)增殖程度的指標(biāo)。通過(guò)蛋白印跡法觀察實(shí)驗(yàn)大鼠海馬組織中Wnt通路信號(hào)分子β-連環(huán)蛋白和散亂蛋白-1的表達(dá)水平。 結(jié)果: 隨著干預(yù)劑Wnt3a劑量的增加,各組大鼠海馬組織中的BrdU陽(yáng)性細(xì)胞百分率呈升高的趨勢(shì)(P0.05),各組中的通路信號(hào)分子散亂蛋白-1與p-連環(huán)蛋白的表達(dá)水平也呈逐漸增高的趨勢(shì)(P0.05);而在應(yīng)用抑制Wnt通路的干預(yù)劑DKK-1后,大鼠海馬組織中散亂蛋白-1與β-連環(huán)蛋白的表達(dá)水平明顯降低,而海馬組織的BrdU陽(yáng)性細(xì)胞百分率也顯著下降(P0.05)。我們發(fā)現(xiàn),作為評(píng)估神經(jīng)干細(xì)胞增殖程度的BrdU陽(yáng)性細(xì)胞百分率,在應(yīng)用干預(yù)劑Wnt3a后呈濃度依賴性增強(qiáng),而在給予經(jīng)典Wnt通路抑制劑DKK-1后卻呈明顯降低的趨勢(shì),說(shuō)明Wnt3a在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后的早期腦損傷中可以發(fā)揮促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生的作用;而作為重要Wnt通路信號(hào)分子的散亂蛋白-1與p-連環(huán)蛋白也都隨干預(yù)劑Wnt3a的應(yīng)用程濃度依賴性增強(qiáng),隨抑制劑DKK-1的應(yīng)用呈顯著下降的趨勢(shì),說(shuō)明Wnt3a可能通過(guò)經(jīng)典Wnt信號(hào)通路促進(jìn)了神經(jīng)發(fā)生。 結(jié)論: 在蛛網(wǎng)膜下腔出血后的早期腦損傷中Wnt3a可能通過(guò)經(jīng)典Wnt信號(hào)通路促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生,對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的修復(fù)與保護(hù)發(fā)揮積極作用。
[Abstract]:Purpose of study :

In this study , we observed the neurogenesis of hippocampus in the central nervous system of experimental rats , and further examined the expression of Wnt3a and p - catenin in the Wnt signaling pathway , and discussed whether Wnt3a could play a role in promoting neurogenesis and the possible mechanism in the early brain injury following subarachnoid hemorrhage .

Study method :

The rats were randomly divided into sham operation group ( Sham group ) , subarachnoid hemorrhage group ( SAH group ) , intervenient group Wnt3a group 鈪,

本文編號(hào):1693482

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