發(fā)布時(shí)間：2018-03-22 05:21

  本文選題：G-CSF　切入點(diǎn)：膿毒癥　出處：《南昌大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的： 觀察粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）治療后膿毒癥小鼠中性粒細(xì)胞表面抗原CD64表達(dá)率、血清TNF-α、IL-10濃度及小鼠1周生存率的變化，探索G-CSF對(duì)膿毒癥小鼠免疫功能的影響，為G-CSF治療膿毒癥的研究提供理論基礎(chǔ)。 方法： 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：10-12周齡（體重18-25克）健康的雄性昆明小鼠140只。 2、動(dòng)物模型：采用腹腔內(nèi)注射LPS的方法建立膿毒癥小鼠模型。 3、實(shí)驗(yàn)分組及處理：將小鼠隨機(jī)分為四組，每組共35只：A組（健康對(duì)照組）腹腔內(nèi)一次性注射與B組同等劑量的生理鹽水；B組（膿毒癥模型組）腹腔內(nèi)一次性注射10mg/kg劑量的LPS；C組（空白治療組）于腹腔注射LPS后6h、30h皮下注射與D組同等劑量的生理鹽水；D組（G-CSF治療組）于腹腔注射LPS后6h、30h皮下注射50ug/kg劑量的重組人粒細(xì)胞集落刺激因子（rhG-CSF）。每組隨機(jī)抽取10只，觀察各組小鼠的一般情況及1周生存率，并繪制生存率曲線；每組的其余25只，于建模后12h、24h、36h、48h、60h時(shí)間點(diǎn)各取5只小鼠，采集外周血用于檢測(cè)。 4、實(shí)驗(yàn)方法：采用流式細(xì)胞技術(shù)（FCM）檢測(cè)小鼠外周血中性粒細(xì)胞表面抗原CD64的表達(dá)率（%）；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)小鼠血清TNF-α及IL-10的濃度（pg/ml）。 5、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用Excel2003和SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： 1、小鼠注射LPS后均出現(xiàn)了明顯的中毒癥狀，G-CSF治療組小鼠較膿毒癥模型組及空白治療組小鼠癥狀恢復(fù)更快。膿毒癥模型組及空白治療組小鼠1周生存率均為50%，G-CSF治療組小鼠1周生存率為60%，G-CSF治療組小鼠生存率較膿毒癥模型組及空白治療組略有增加，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 2、健康對(duì)照組小鼠各時(shí)間點(diǎn)中性粒細(xì)胞表面抗原CD64僅少量表達(dá)。膿毒癥組小鼠在LPS注射后12h中性粒細(xì)胞表面抗原CD64表達(dá)率即達(dá)到峰值（45.51±3.32）%，相比于健康對(duì)照組（2.69±1.00%）顯著升高（P＜0.05）。24h時(shí)下降至（24.07±3.51%），36h、48h、60h時(shí)中性粒細(xì)胞表面抗原CD64呈低水平表達(dá)，但仍顯著高于健康對(duì)照組（P＜0.05）。給予G-CSF治療后，小鼠各時(shí)間點(diǎn)中性粒細(xì)胞表面抗原CD64均有較高的表達(dá)率，與膿毒癥模型組及空白治療組比較顯著升高（P＜0.05）。 3、膿毒癥模型組小鼠在LPS注射后12h血清TNF-α濃度為（203.38±15.33pg/ml），相比于健康對(duì)照組顯著升高（P＜0.05），24h達(dá)到（348.77±21.12pg/ml）的峰值，48h才出現(xiàn)明顯的下降，60h仍顯著高于健康對(duì)照組（P＜0.05）。給予G-CSF治療后，各時(shí)間點(diǎn)TNF-α濃度較膿毒癥模型組及空白治療組顯著下降（P＜0.05）。 4、膿毒癥組小鼠在LPS注射后12h血清IL-10濃度為（54.35±7.32pg/ml），相比于健康對(duì)照顯著升高（P＜0.05），36h時(shí)達(dá)到（143.04±13.08pg/ml）的峰值，然后逐漸下降，60h仍顯著高于健康對(duì)照組（P＜0.05）。給予G-CSF治療后，其24h、36h、48h時(shí)間點(diǎn)IL-10濃度分別為：160.35±12.41pg/ml、177.74±13.75pg/ml、126.09±9.77pg/ml，較膿毒癥模型組及空白治療組顯著升高（P＜0.05），12h、60h時(shí)間點(diǎn)IL-10濃度較膿毒癥模型組及空白治療組略有升高，，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 結(jié)論： 1、中性粒細(xì)胞表面抗原CD64在健康小鼠中僅少量表達(dá)，給予LPS后中性粒細(xì)胞表面抗原CD64表達(dá)率呈一過(guò)性增高，提示中性粒細(xì)胞表面抗原CD64表達(dá)增加可作為中性粒細(xì)胞活化的標(biāo)志。 2、膿毒癥早期血清TNF-α及IL-10均出現(xiàn)升高，提示膿毒癥同時(shí)存在促炎反應(yīng)及抗炎反應(yīng)過(guò)程；血清IL-10濃度的峰值出現(xiàn)較TNF-α晚，推測(cè)抗炎反應(yīng)可能繼發(fā)于促炎反應(yīng)。 3、G-CSF可以促進(jìn)膿毒癥小鼠中性粒細(xì)胞表面抗原CD64的表達(dá)，提示G-CSF具有增強(qiáng)膿毒癥小鼠中性粒細(xì)胞功能的作用。G-CSF可以降低膿毒癥小鼠血清的TNF-α的濃度，增加其血清IL-10的濃度，提示G-CSF具有抗炎的作用。G-CSF不能改善膿毒癥小鼠的生存率，也不會(huì)增加膿毒癥小鼠的死亡率。
[Abstract]:Objective:
Observation of granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) in sepsis mice neutrophil cell surface antigen expression rate of CD64 after treatment, serum TNF-, change 1 weeks survival rate and IL-10 concentration of mice, and explore the effects of G-CSF on immune function in mice with sepsis, and provide a theoretical basis for the research of G-CSF in the treatment of sepsis.
Method錛

本文編號(hào)：1647247