本文選題：血小板　切入點：膿毒癥　出處：《第二軍醫(yī)大學》2013年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的 1.利用膿毒癥的經典盲腸結扎穿孔術(cecal ligation puncture，CLP)探討丙酮酸乙酯（ethyl pyruvate EP）對于膿毒癥凝血功能紊亂中的保護作用。 2.動態(tài)觀察CLP模型小鼠血液中高遷移率族蛋白Bl(high mobility group boxlportein，HMGBl)的含量變化及小鼠肺組織蛋白表達水平，探討丙酮酸乙酯（ethylpyruvate EP）對膿毒癥凝血功能紊亂中的作用機制，為臨床膿毒癥器官功能保護提供新的理論研究依據。 方法 將選擇的SPF級昆明（KM）雄性小鼠共135只隨機分為假手術組（sham組）、手術組（CLP組）、治療組（EP組），每組45只，然后觀察小鼠術后各時間點反應、個體活動、睡眠、進食、嘔吐、眼球凹陷、呼吸，分泌物、豎毛、腹瀉、糞便、尿量等生存情況，應用夾心酶聯免疫吸附測定法(ELISA)檢測技術術后即刻、4小時、8小時、12小時、24小時、48小時、72小時總共7個時間點的外周血中肌酐（Cr）指標、血小板(PLT)計數指標、凝血酶原時間(PT)指標、谷丙轉氨酶（ALT）指標、活化部分凝血酶時間(APTT)指標、纖維蛋白原(FIB)指標、高遷移率族蛋白Bl（HMGB1）指標、D-二聚體指標、蛋白C（PC）指標，在活殺前進行膿毒癥評分，并觀察膿毒癥小鼠嚴重程度的評分、生存的時間，應用Western blot法檢測肺組織中高遷移率族蛋白Bl（HMGB1）的表達水平，隨后進行肺組織病理切片HE后觀察結果。 結果 1.觀察術后72h小鼠假手術組（sham組）存活率均為100%，丙酮酸乙酯治療組（EP組）存活率約為60%，手術組（CLP組）存活率約為10%（其P0.05）。與假手術組（sham組）相比，丙酮酸乙酯治療組（EP組）和手術組（CLP組）的小鼠在8小時后血小板(PLT)逐漸下降，但丙酮酸乙酯治療組（EP組）顯著高于同時間點手術組（CLP組）（P0.05）；與假手術組（sham組）相比活化部分凝血酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)延長，但丙酮酸乙酯治療組（EP組）較手術組（CLP組）明顯延長時間較短（其P0.05）；與假手術組（sham組）相比谷丙轉氨酶（ALT）、肌酐（Cr）明顯升高，但丙酮酸乙酯治療組（EP組）顯著低于同時間點手術組（CLP組）（其P0.05）。光鏡下手術組（CLP組）、丙酮酸乙酯治療組（EP組）肺組織可見明顯急性肺損傷改變表現：水腫、充血、炎癥細胞浸潤、間質變窄、大小不同程度形成微血栓，丙酮酸乙酯治療組（EP組）較手術組（CLP組）病理損傷明顯減輕，且肺組織損傷病理的評分明顯降低(其P0.05)。 2.丙酮酸乙酯治療組（EP組）和手術組（CLP組）觀察8小時后纖維蛋白原(FIB)明顯下降，，到24小時時達到峰值，但EP組顯著高于同時間點CLP組（其P0.05）。EP組和CLP組觀察8小時后D-Dimer明顯升高，到12小時時達到峰值，隨后逐漸降低，但丙酮酸乙酯治療組顯著低于同時間點手術組（其P0.05）。CLP組術后12小時血清PC開始明顯升高，48小時達到峰值并持續(xù)至72小時，而EP組在12小時PC明顯升高，且顯著高于同時間點手術組（其P0.05）。CLP組在血清中發(fā)現HMGB1在觀察8小時后顯著升高，12小時出現峰值，隨后開始降低，效應可持續(xù)超過72小時，但EP組顯著低于同時間點CLP組（P0.05）。sham組不同時間點小鼠HMGBl蛋白均有微量表達，而CLP組、EP組HMGBl蛋白從8小時開始表達明顯增多，以12~24小時為顯著，48小時開始下降但仍高于假手術組，丙酮酸乙酯治療組同時間點蛋白水平顯著低于手術組(其P0.05)，但仍高于假手術組且有顯著性差異(其P0.05)。 結論 1. EP能夠顯著減輕CLP誘導的膿毒癥凝血功能障礙程度，提高膿毒癥凝血功能紊亂小鼠的生存率。 2.EP能夠顯著抑制膿毒癥小鼠HMGBl水平，通過抑制HMGBl來調節(jié)纖溶和凝血系統從而有效減輕CLP誘導的膿毒癥凝血功能紊亂。
[Abstract]:objective
1. to explore the protective effect of ethyl pyruvate EP on sepsis coagulation function disorder by cecal ligation puncture (CLP).
2. dynamic observation of high mobility group protein Bl in mouse model of blood CLP (high mobility group boxlportein, HMGBl) expression in lung tissue of mice and to explore the changes of protein content, ethyl pyruvate (ethylpyruvate EP) on the mechanism of sepsis coagulation disorders, and provide new theoretical basis for the clinical study of sepsis with organ the function of protection.
Method
灝嗛

本文編號：1632497