發(fā)布時間：2018-03-19 03:00

  本文選題：血小板　切入點(diǎn)：膿毒癥　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的 1.利用膿毒癥的經(jīng)典盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(cecal ligation puncture，CLP)探討丙酮酸乙酯（ethyl pyruvate EP）對于膿毒癥凝血功能紊亂中的保護(hù)作用。 2.動態(tài)觀察CLP模型小鼠血液中高遷移率族蛋白Bl(high mobility group boxlportein，HMGBl)的含量變化及小鼠肺組織蛋白表達(dá)水平，探討丙酮酸乙酯（ethylpyruvate EP）對膿毒癥凝血功能紊亂中的作用機(jī)制，為臨床膿毒癥器官功能保護(hù)提供新的理論研究依據(jù)。 方法 將選擇的SPF級昆明（KM）雄性小鼠共135只隨機(jī)分為假手術(shù)組（sham組）、手術(shù)組（CLP組）、治療組（EP組），每組45只，然后觀察小鼠術(shù)后各時間點(diǎn)反應(yīng)、個體活動、睡眠、進(jìn)食、嘔吐、眼球凹陷、呼吸，分泌物、豎毛、腹瀉、糞便、尿量等生存情況，應(yīng)用夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測技術(shù)術(shù)后即刻、4小時、8小時、12小時、24小時、48小時、72小時總共7個時間點(diǎn)的外周血中肌酐（Cr）指標(biāo)、血小板(PLT)計數(shù)指標(biāo)、凝血酶原時間(PT)指標(biāo)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）指標(biāo)、活化部分凝血酶時間(APTT)指標(biāo)、纖維蛋白原(FIB)指標(biāo)、高遷移率族蛋白Bl（HMGB1）指標(biāo)、D-二聚體指標(biāo)、蛋白C（PC）指標(biāo)，在活殺前進(jìn)行膿毒癥評分，并觀察膿毒癥小鼠嚴(yán)重程度的評分、生存的時間，應(yīng)用Western blot法檢測肺組織中高遷移率族蛋白Bl（HMGB1）的表達(dá)水平，隨后進(jìn)行肺組織病理切片HE后觀察結(jié)果。 結(jié)果 1.觀察術(shù)后72h小鼠假手術(shù)組（sham組）存活率均為100%，丙酮酸乙酯治療組（EP組）存活率約為60%，手術(shù)組（CLP組）存活率約為10%（其P0.05）。與假手術(shù)組（sham組）相比，丙酮酸乙酯治療組（EP組）和手術(shù)組（CLP組）的小鼠在8小時后血小板(PLT)逐漸下降，但丙酮酸乙酯治療組（EP組）顯著高于同時間點(diǎn)手術(shù)組（CLP組）（P0.05）；與假手術(shù)組（sham組）相比活化部分凝血酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)延長，但丙酮酸乙酯治療組（EP組）較手術(shù)組（CLP組）明顯延長時間較短（其P0.05）；與假手術(shù)組（sham組）相比谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、肌酐（Cr）明顯升高，但丙酮酸乙酯治療組（EP組）顯著低于同時間點(diǎn)手術(shù)組（CLP組）（其P0.05）。光鏡下手術(shù)組（CLP組）、丙酮酸乙酯治療組（EP組）肺組織可見明顯急性肺損傷改變表現(xiàn)：水腫、充血、炎癥細(xì)胞浸潤、間質(zhì)變窄、大小不同程度形成微血栓，丙酮酸乙酯治療組（EP組）較手術(shù)組（CLP組）病理損傷明顯減輕，且肺組織損傷病理的評分明顯降低(其P0.05)。 2.丙酮酸乙酯治療組（EP組）和手術(shù)組（CLP組）觀察8小時后纖維蛋白原(FIB)明顯下降，，到24小時時達(dá)到峰值，但EP組顯著高于同時間點(diǎn)CLP組（其P0.05）。EP組和CLP組觀察8小時后D-Dimer明顯升高，到12小時時達(dá)到峰值，隨后逐漸降低，但丙酮酸乙酯治療組顯著低于同時間點(diǎn)手術(shù)組（其P0.05）。CLP組術(shù)后12小時血清PC開始明顯升高，48小時達(dá)到峰值并持續(xù)至72小時，而EP組在12小時PC明顯升高，且顯著高于同時間點(diǎn)手術(shù)組（其P0.05）。CLP組在血清中發(fā)現(xiàn)HMGB1在觀察8小時后顯著升高，12小時出現(xiàn)峰值，隨后開始降低，效應(yīng)可持續(xù)超過72小時，但EP組顯著低于同時間點(diǎn)CLP組（P0.05）。sham組不同時間點(diǎn)小鼠HMGBl蛋白均有微量表達(dá)，而CLP組、EP組HMGBl蛋白從8小時開始表達(dá)明顯增多，以12~24小時為顯著，48小時開始下降但仍高于假手術(shù)組，丙酮酸乙酯治療組同時間點(diǎn)蛋白水平顯著低于手術(shù)組(其P0.05)，但仍高于假手術(shù)組且有顯著性差異(其P0.05)。 結(jié)論 1. EP能夠顯著減輕CLP誘導(dǎo)的膿毒癥凝血功能障礙程度，提高膿毒癥凝血功能紊亂小鼠的生存率。 2.EP能夠顯著抑制膿毒癥小鼠HMGBl水平，通過抑制HMGBl來調(diào)節(jié)纖溶和凝血系統(tǒng)從而有效減輕CLP誘導(dǎo)的膿毒癥凝血功能紊亂。
[Abstract]:objective
1. to explore the protective effect of ethyl pyruvate EP on sepsis coagulation function disorder by cecal ligation puncture (CLP).
2. dynamic observation of high mobility group protein Bl in mouse model of blood CLP (high mobility group boxlportein, HMGBl) expression in lung tissue of mice and to explore the changes of protein content, ethyl pyruvate (ethylpyruvate EP) on the mechanism of sepsis coagulation disorders, and provide new theoretical basis for the clinical study of sepsis with organ the function of protection.
Method
灝嗛

本文編號：1632497