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高壓電燒傷大鼠血清TSP、vWF變化及烏司他

發(fā)布時間:2018-03-03 02:15

  本文選題:燒傷 切入點: 出處:《河北醫(yī)科大學》2013年碩士論文 論文類型:學位論文


【摘要】:目的:高壓電燒傷是一種特殊原因的燒傷,無論其面積大小,均可在創(chuàng)面局部和(或)全身遠隔組織、器官出現(xiàn)微循環(huán)紊亂。電流通過機體時主要沿電阻較小的血液和神經(jīng)走行,故電流對血管損傷極為明顯。對于微血管,電流可直接損傷其內(nèi)皮細胞,引起血管內(nèi)皮系統(tǒng)釋放血管活性物質(zhì),導致致炎狀態(tài)、高凝狀態(tài)的發(fā)生及微血管通透性增強,血管內(nèi)白細胞與內(nèi)皮細胞黏附增加、紅細胞聚集、微血栓形成以及血液黏度增加等,從而影響微循環(huán)血液流動,導致機體微循環(huán)障礙。已有實驗證明,血小板反應蛋白(TSP)對血管修復及生成有抑制作用,血管性假性血友病因子(vWF)是血管內(nèi)皮細胞受損的重要標志之一。本實驗目的在于通過觀察高壓電流對TSP、vWF的影響,進一步探討高壓電燒傷對內(nèi)皮細胞損傷引起機體微循環(huán)紊亂的機制及烏斯他丁(UTI)、甲基強的松龍(MP)對血清TSP、vWF表達的干預作用,為高壓電燒傷后微循環(huán)障礙的防治提供實驗依據(jù)。 方法: 1實驗動物分組:健康成年SD大鼠(河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供,合格證編號1211057)240只,雌雄不拘,按隨機數(shù)字表法分成四組,即假高壓電燒傷組(簡稱對照組)、高壓電燒傷組(簡稱電傷組)、高壓電燒傷UTI治療組(簡稱治療1組),高壓電燒傷MP治療組(簡稱治療2組),每組各60只,以上四組又分別分為電傷前15min、電傷后5min、1h、2h、4h、8h6個不同的時相,,每時相10只。 2實驗前準備:將大鼠編號、稱重、左上肢、右下肢及前胸脫毛。按所需濃度配制實驗藥品。 3高壓電燒傷模型制作:先檢查輸入電源總開關(guān),保證其處于關(guān)閉狀態(tài),然后正確連接實驗變壓器和調(diào)壓器導線。用1%戊巴比妥鈉溶液腹腔注射麻醉大鼠(40mg/kg),麻醉成功后,將大鼠仰臥于專用電擊實驗臺上,將兩個1cm×1cm電極片分別固定于大鼠的左上肢(電流入口)、右下肢(電流出口)脫毛區(qū)。接通輸入電源總開關(guān),調(diào)整調(diào)壓器使升壓器輸出電壓升至2kV,然后連接升壓器輸出端電源,使高壓電流通過大鼠身體,保持電擊時間持續(xù)3s,流經(jīng)大鼠的電流強度為(1.85±0.25)A。對照組大鼠給予只連導線而不通電的方法,制作假電傷模型。電傷5min內(nèi),治療1組腹腔內(nèi)注射UTI溶液(5×104u/kg,即按7mL/kg給藥),治療2組腹腔內(nèi)注射MP溶液(750mg/kg,即按6mL/kg給藥),對照組及電傷組腹腔內(nèi)注射相等量生理鹽水。 4標本采集與保存:將模型復制成功的大鼠開胸暴露心臟,直視下心臟采血約6mL,靜置30min,待血清析出后上離心機,以3000轉(zhuǎn)/min離心10min,取上清液置于Eppendorf管中在-70℃條件下保存。 5指標檢測:采用ELISA雙夾心抗體法,分別檢測每組大鼠六個時相組血清TSP、vWF含量。 6實驗數(shù)據(jù)處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,行兩因素析因設(shè)計的方差分析,以p<0.05為顯著性檢驗水準。 結(jié)果:1大鼠血清TSP含量變化 電傷組TSP含量總體高于對照組(主效應F=62.54,P<0.001);電傷組TSP含量受傷后時間變量影響(F=3.52,P<0.01),傷后5min~8h各時相均高于本組傷前值(P<0.01),至傷后4h達最高值,為(163.28±38.28)ng/mL,高于傷前的(108.91±25.07)ng/mL,8h后逐漸回落,但仍維持較高水平。 UTI治療組TSP含量總體低于電傷組(主效應F=23.05,P<0.001);治療1組血清TSP含量在傷后5min仍高于電傷前15min水平,其差異有顯著性(P<0.05),傷后4hUTI治療組TSP的含量基本恢復至電傷前15min的水平,無顯著性差異(P>0.05)。 MP治療組TSP含量總體低于電傷組(主效應F=171.49,P<0.001);治療2組受傷后時間變量影響(主效應F=2.76,P<0.05),治療2組傷后5min、1h、2h、4h、8h各時相均明顯低于本組傷前值(P<0.01)。2大鼠血清vWF含量變化 電傷組vWF含量總體高于對照組(主效應F=103.52,P<0.001);電傷組vWF含量受傷后時間變量影響(主效應F=5.20,P<0.001),傷后5min~8h各時相均高于本組傷前值(P<0.001),傷后即刻達最高值,后隨時間呈下降趨勢,至傷后8h仍高于對照組水平。 治療1組vWF含量總體低于電傷組(主效應F=4.04,P<0.05),治療1組vWF含量受傷后時間變量影響(主效應F=7.45,P<0.001),傷后5min~8h各時相均高于本組傷前值(P<0.001),隨時間呈逐漸下降趨勢,但傷后8h仍維持較高水平。 治療2組vWF含量總體低于電傷組(主效應F=44.29,P<0.001);治療2組vWF含量受傷后時間變量影響(主效應F=4.73,P<0.01),傷后5min、1h、2h、4h時相均高于本組傷前值(P<0.001),至治療8hvWF基本恢復至電擊前水平。 結(jié)論: 1高壓電燒傷可引起大鼠血清TSP含量升高,且在傷后4h達到最高值。 2高壓電燒傷可引起大鼠血清vWF含量升高,且在傷后8h呈下降趨勢。 3高壓電刺激機體產(chǎn)生TSP、vWF含量增加,導致機體微循環(huán)障礙。 4UTI、MP可抑制大鼠高壓電燒傷后血液TSP、vWF的生成,從而減輕大鼠電傷后內(nèi)皮細胞通透性、減輕損傷處水腫等,從而改善微循環(huán)血流障礙。
[Abstract]:Purpose: high voltage electric burn is a special burn, regardless of their size, can be found in the local wound and (or) body distant tissue, organ microcirculation dysfunction. Current through the body along the small resistance of blood and nerves, so the current of vascular injury is very obvious. The microvascular. The current can directly damage the endothelial cells induced by vascular endothelial system release of vasoactive substances, causing inflammation, occurrence of hypercoagulable state and microvascular permeability and vascular adhesion of leukocytes and endothelial cells increased, erythrocyte aggregation, thrombus formation and increase blood viscosity, thereby affecting the microcirculation blood flow, resulting in microcirculation obstacles. It has been proved that thrombospondin (TSP) inhibits vascular repair and generation, von Willebrand factor (vWF) is the heavy damage to vascular endothelial cells To be one of the signs. The purpose of this experiment is to observe the high voltage current of TSP, the influence of vWF, to further explore the high-voltage electric burn on endothelial cell injury and the mechanism of body'smicrocirculation disorder caused by ulinastatin (UTI), methylprednisolone (MP) on serum TSP, vWF expression in the intervention, to provide experimental basis for prevention and control for high voltage electric burn microcirculation.
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本文編號:1559106

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