本文關(guān)鍵詞： 下游調(diào)節(jié)基因2 核轉(zhuǎn)錄因子 kappa B 腸缺血再灌注肺損傷 信號傳導(dǎo)通路　出處：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景： 盡管現(xiàn)代醫(yī)學(xué)科學(xué)發(fā)展迅猛，醫(yī)療方法不斷建立和發(fā)展完善，但是急性肺損傷（Acute lung injury，ALI）仍是一種危重的臨床綜合征，致死率高。腸缺血再灌注（intestinal ischemia/reperfusion，II/R）是導(dǎo)致腸移植、心肺轉(zhuǎn)流、創(chuàng)傷與出血等多種臨床并發(fā)癥造成器官損傷的主要原因[1-4]。研究表明，腸缺血再灌注損傷致使腸粘膜結(jié)構(gòu)和絨毛皺縮以及上皮功能逐漸減退，最終導(dǎo)致腸屏障功能完整性破壞和細(xì)菌遷移[1,5,6]。進一步研究發(fā)現(xiàn)II/R同樣是導(dǎo)致多器官功能障礙綜合征（Multiple OrganDysfunction Syndrome，MODS）尤其是急性呼吸窘迫綜合癥（Acute RespiratoryDistress Syndrome，ARDS）的重要發(fā)病機理[2,3]。然而，II/R導(dǎo)致肺損傷更全面清晰的機制尚未完全研究清楚。 核轉(zhuǎn)錄因子-kappa B（Nuclear factor-kappa B，NF-κB）蛋白能夠介導(dǎo)多種基因在免疫、急性炎癥反應(yīng)、細(xì)胞粘附、分化、氧化應(yīng)激和凋亡的表達(dá)[7,8]。其在II/R引起的局部和全身炎癥反應(yīng)發(fā)揮重要的作用[9,10]。因此，研究NF-κB信號傳導(dǎo)通路的調(diào)控機制是治療II/R肺損傷的新策略[11,12]。 N-myc下游調(diào)節(jié)基因2（N-myc downstream regulated gene2，NDRG2）是NDRG家族基因（包括NDRG1-4）之一，廣泛分布于多種組織和器官中,正常表達(dá)于肺泡間質(zhì)與肺泡上皮細(xì)胞[13]。NDRG2的過表達(dá)可顯著降低Iκκα/β復(fù)合體磷酸化，從而阻斷IκBα磷酸化和p65核移位，抑制NF κB信號傳導(dǎo)通路活化，最終抑制腫瘤細(xì)胞的生長[14]。相關(guān)研究也證實，NDRG2和NF-κB在心肌細(xì)胞、萊氏細(xì)胞中也均有重要的作用[15,16]。 實驗?zāi)康模?通過建立大鼠腸缺血再灌注肺損傷（Intestinal ischemia/reperfusion induced lunginjury，II/RI）模型，檢測NDRG2在肺組織中的表達(dá)，初步分析NDRG2與NF-κB信號傳導(dǎo)通路在腸缺血再灌注肺損傷中的相關(guān)性。進一步為再灌注損傷的臨床診斷、治療等各方面提供新的理論依據(jù)。 實驗方法： 1.采用免疫組織化學(xué)、Western-blot蛋白免疫印跡方法，檢測NDRG2及NF-κB在腸缺血再灌注肺損傷中的蛋白定位及表達(dá)情況。 2.采用RT-PCR法，檢測NDRG2及NF-κB在腸缺血再灌注肺損傷中的mRNA表達(dá)量。 3.分析NF-κB與NDRG2兩者的表達(dá)量是否具有相關(guān)性。 4.TUNEL法檢測再灌注損傷致細(xì)胞凋亡情況，探討缺血再灌注肺損傷是否促進NF-κB傳導(dǎo)通路活化，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 實驗結(jié)果： 1.免疫組化、Western-blot蛋白免疫印跡結(jié)果顯示：NDRG2在腸缺血再灌注肺損傷中表達(dá)減低，與對照組差異性顯著（P0.05）；NF-κB在腸缺血再灌注肺損傷中表達(dá)明顯升高（P0.05），與對照組差異性顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義。 2. RT-PCR法顯示：NDRG2mRNA表達(dá)水平在實驗組中明顯降低（P0.05）；NF-κBmRNA表達(dá)量增加，與對照組差異性顯著（P0.05），有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.NDRG2和NF-κB兩種蛋白表達(dá)的相關(guān)性檢驗，二者呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.814,P0.05），有統(tǒng)計學(xué)意義。 4.TUNEL染色，I/R組凋亡指數(shù)依次分別為（16.21±1.34）%、（37.91±2.15）%、（24.15±2.43）%、（17.15±2.53）%與Control組（1.21±0.71）%相比凋亡細(xì)胞明顯升高，結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 實驗結(jié)論： 腸缺血再灌注肺損傷中明顯存在肺組織NDRG2表達(dá)量降低，而且，NDRG2表達(dá)降低的同時肺組織NF-κB表達(dá)量明顯增強，，提示NDRG2在NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在腸缺血再灌注肺損傷中可能發(fā)揮重要作用。NDRG2可能是調(diào)控缺血再灌注肺損傷的新靶點。
[Abstract]:Background of Study : In spite of the rapid development of modern medical science and the continuous development and improvement of medical methods , acute lung injury ( ALI ) is still a critical clinical syndrome , and the death rate is high . Intestinal ischemia / reperfusion ( II / R ) is the main cause of organ damage due to intestinal ischemia / reperfusion ( intestinal ischemia / reperfusion , II / R ) . Nuclear factor kappa B ( NF - 魏B ) protein can mediate the expression of various genes in immune , acute inflammatory reaction , cell adhesion , differentiation , oxidative stress and apoptosis . The N - myc downstream regulated gene 2 ( NDRG2 ) is one of the NDRG1 - 4 genes ( including NDRG1 - 4 ) , which is widely distributed in various tissues and organs , and is normally expressed in alveolar stroma and alveolar epithelial cells . NDRG2鐨勮繃琛ㄨ揪鍙樉钁楅檷浣嶪魏魏偽/尾澶嶅悎浣撶７閰稿寲,浠庤

本文編號：1544847