miR-221在急性心肌梗死大鼠中表達(dá)及其作用
本文關(guān)鍵詞: miR- 急性心肌梗死(AMI) 表達(dá) 作用 出處:《中國(guó)公共衛(wèi)生》2017年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討miR-221在急性心肌梗死(AMI)大鼠中的表達(dá)及其作用。方法在45只SD清潔級(jí)雄性大鼠中隨機(jī)抽取35只通過冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎大鼠建立AMI模型,將其中建模成功的30只大鼠隨機(jī)分為AMI組、對(duì)照組及抑制組,每組各10只;另抽取未建模的10只大鼠設(shè)立假手術(shù)組,采用冠狀動(dòng)脈左前降支穿線不結(jié)扎。其中對(duì)照組用攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的慢病毒空載體miR-221陰性對(duì)照以4×10~7病毒數(shù)量進(jìn)行心肌組織局部注射轉(zhuǎn)染,抑制組用攜帶miR-221 inhibitor慢病毒以4×10~7病毒數(shù)量進(jìn)行心肌組織局部注射轉(zhuǎn)染,AMI組和假手術(shù)組每天給予等量生理鹽水,隔日1次連續(xù)2周;記錄大鼠心臟功能。采用原位末端凋亡法(TUNEL)檢測(cè)心肌凋亡指數(shù)(AI),RT-PCR法檢測(cè)miR-221表達(dá),Western blot法檢測(cè)Bax、Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表達(dá)。結(jié)果與假手術(shù)組大鼠miR-221表達(dá)量(0.18±0.02)比較,AMI組(1.16±0.12)和對(duì)照組(1.18±0.12)大鼠的miR-221表達(dá)量均升高(均P0.01),抑制組大鼠miR-221表達(dá)量(0.30±0.03)均低于AMI組和對(duì)照組大鼠的miR-221表達(dá)量(均P0.01);與假手術(shù)組大鼠Bax(0.13±0.01)、Bcl-2(0.53±0.05)、PI3K(0.45±0.04)和p-AKT(0.87±0.09)蛋白表達(dá)量比較,AMI組和對(duì)照組大鼠的Bax蛋白表達(dá)量均上調(diào)(均P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表達(dá)量均下調(diào)(均P0.01);抑制組大鼠較AMI組和對(duì)照組大鼠Bax表達(dá)量均下調(diào)(P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表達(dá)量均上調(diào)(P0.01)。結(jié)論 miR-221在AMI大鼠心肌組織中高表達(dá),下調(diào)miR-221表達(dá)可通過激活PI3K/AKT信號(hào)通路調(diào)控下游蛋白Bax及Bcl-2的表達(dá)抑制AMI大鼠心肌細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the expression and role of miR-221 in acute myocardial infarction (AMI) rats. Methods 35 SD clean male rats were randomly selected to establish AMI model by left anterior descending coronary artery ligation. Among them, 30 rats were randomly divided into AMI group, control group and inhibition group with 10 rats in each group, and 10 unmodeled rats were selected to set up sham-operation group. The left anterior descending branch of coronary artery was not ligated. The control group was transfected by local injection of 4 脳 10 ~ (7) virus with a lentivirus empty vector miR-221 carrying green fluorescent protein (GFP). The inhibitory group was injected with miR-221 inhibitor lentivirus in 4 脳 10 ~ (7) virus number by local injection of myocardial tissue into AMI group and sham-operation group. The rats in the control group were given the same amount of normal saline once a day for 2 weeks every other day. Cardiac function of rats was recorded. Myocardial apoptosis index was detected by Tunel) and miR-221 expression was detected by RT-PCR. Western blot assay was used to detect the expression of Baxan Bcl-2PI3K and p-AKT protein. Results compared with sham operation group, the expression of miR-221 was 1.16 鹵0.12 in AMI group and 1.16 鹵0.12 in control group. The expression of miR-221 in rats was significantly higher than that in AMI group and control group (P < 0.01). The expression of miR-221 in AMI group and control group was significantly lower than that in AMI group and control group (all P 0.01), and the expression of Bax protein in Bax(0.13 鹵0.01 + Bcl-20.53 鹵0.055-PI3KU 0.45 鹵0.04 and p-AKT _ 3 + 0.87 鹵0.09 in sham operation group was higher than that in sham operation group (P < 0.01), and the expression of p-AKT was 0.87 鹵0.09 in control group and in control group (P < 0.01). The expression of P0.01Bcl-2PI3K and p-AKT were down-regulated (all P0.01A), and the expression of Bax was down-regulated in the inhibitory group than in the AMI group and the control group. Conclusion the expression of miR-221 in the myocardium of AMI rats is higher than that of the control group. Conclusion the expression of miR-221 in the myocardium of the AMI rats is higher than that of the control group, and the expression of P0.01Bcl-2pI3K and p-AKT protein is up-regulated in the myocardium of the AMI rats. Down-regulation of miR-221 expression can inhibit cardiomyocyte apoptosis in AMI rats by activating PI3K/AKT signaling pathway to regulate the expression of downstream proteins Bax and Bcl-2.
【作者單位】: 牡丹江醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【分類號(hào)】:R542.22
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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