本文關(guān)鍵詞：AICAR和Compound C減輕內(nèi)毒素血癥肝臟損傷的作用與機(jī)制

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【摘要】：背景： 內(nèi)毒素血癥具有高死亡率和治愈率低的特點(diǎn)，因而在臨床工作中被認(rèn)為是十分棘手的問(wèn)題。當(dāng)前認(rèn)為感染，外科創(chuàng)傷，燒傷，腸道細(xì)菌移位等是誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)毒素血癥的主要因素。LPS作為細(xì)菌誘導(dǎo)內(nèi)毒素血癥最主要的成分，可激活機(jī)體非特異性免疫細(xì)胞，誘導(dǎo)大量的促炎細(xì)胞因子及趨化因子的產(chǎn)生，造成多器官功能損傷和障礙，尤其是肝臟組織的損傷和功能障礙。近來(lái)，AICAR作為AMPK的特異激活劑應(yīng)用于研究結(jié)腸炎，哮喘等動(dòng)物模型并發(fā)現(xiàn)AMPK通路表現(xiàn)抑制炎癥反應(yīng)的作用。然而，激活或抑制AMPK通路可否抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)紊亂和肝臟損傷還有待闡明。 目標(biāo)： 研究AMPK激活劑AICAR和抑制劑Compound C對(duì)于LPS誘導(dǎo)的小鼠肝臟損傷模型的作用。 方法： (1)體外培養(yǎng)RAW264.7巨噬細(xì)胞，經(jīng)AICAR和/或Compound C刺激后western blot檢測(cè)p-AMPK的表達(dá)。 (2)將RAW264.7巨噬細(xì)胞分為5組，對(duì)照組，LPS組（LPS100ng/ml），LPS+AICAR組（AICAR1mM預(yù)處理RAW264.7巨噬細(xì)胞1h后加入LPS100ng/ml），LPS+Compound C組（Compound C50μM預(yù)處理RAW264.7巨噬細(xì)胞1h后加入LPS100ng/ml），及LPS+AICAR+Compound C組（AICAR1mM與Compound C50μm預(yù)處理RAW264.7巨噬細(xì)胞1h后加入LPS100ng/ml）。1h后western blot檢測(cè)p-NF-κB p65的表達(dá)。 (4) BALB/c小鼠隨機(jī)分為5組：對(duì)照組（腹腔注射生理鹽水）LPS組（腹腔注射LPS2mg/kg)，LPS+AICAR組（腹腔注射AICAR500mg/kg1h后注射LPS2mg/kg)，LPS+Compound C組（腹腔注射Compound C20mg/kg1h后注射LPS2mg/kg)，LPS+AICAR+Compound C組（腹腔注射AICAR500mg/kg及Compound C20mg/kg1h后注射LPS2mg/kg）。LPS注射12h后處死小鼠，取小鼠血清及肝臟組織進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。 (5)小鼠生存率實(shí)驗(yàn)：BALB/c小鼠隨機(jī)分為5組（按之前方法分組，LPS腹腔注射量為20mg/kg，AICAR及Compound C注射量同上），24小時(shí)內(nèi)觀察各組小鼠的生存情況。 結(jié)果： (1) AICAR可促進(jìn)巨噬細(xì)胞AMPK磷酸化，Compound C可阻斷AICAR激活A(yù)MPK磷酸化。AICAR及Compound C均可抑制LPS誘導(dǎo)RAW264.7巨噬細(xì)胞NF-κB活化。 (2) LPS可誘導(dǎo)小鼠肝臟功能損傷，包括血清ALT、AST升高，，血清TNF-a含量升高，肝臟組織病理?yè)p傷，誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，通過(guò)檢測(cè)CD68表達(dá)及肝臟MPO含量反應(yīng)出肝臟巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞活化程度。 (3) AICAR和Compound C治療LPS誘導(dǎo)的內(nèi)毒素血癥模型小鼠，均可以減少血清ALT、AST，及TNF-α含量，降低肝臟組織病理?yè)p傷，抑制誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡及肝臟巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞活化。 (4)在致死實(shí)驗(yàn)中，AICAR和Compound C可明顯提高LPS誘導(dǎo)小鼠的24h生存率。 結(jié)論： AICAR和Compound C分別激活、抑制AMPK活化均可緩解LPS誘導(dǎo)的小鼠肝臟免疫反應(yīng)及組織損傷，AMPK通路可能成為臨床上治療內(nèi)毒素血癥的新選擇。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R459.7

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 姚烽;汲廣巖;張力;;腺苷酸活化蛋白激酶:炎癥調(diào)控新靶點(diǎn)[J];生理學(xué)報(bào);2012年03期

2 郭媛;魏筱華;謝s

本文編號(hào)：1237725