發(fā)布時間：2017-11-22 17:08

  本文關鍵詞：休克腸淋巴液對脾樹突狀細胞免疫功能的影響

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【摘要】：背景:免疫功能紊亂是重癥失血性休克患者出現(xiàn)全身炎癥反應綜合征(SIRS)、以及隨之而來的多器官功能障礙綜合征(MODS)、甚至引起死亡的重要原因。機體中一系列的免疫細胞,通過產(chǎn)生大量細胞因子以非特異性方式對抗外來抗原的入侵。其中,樹突狀細胞(DCs)等抗原遞呈細胞可將入侵信息遞呈給T淋巴細胞,啟動長期特異性免疫機制,從而發(fā)揮抗感染的作用。研究表明,失血性休克發(fā)展過程中,先天免疫最先受累,并進一步導致免疫功能抑制、促進炎癥全身擴散,是發(fā)生SIRS、MODS與膿毒癥的重要免疫學基礎。休克腸淋巴液回流是失血性休克后組織損傷、器官功能障礙的重要發(fā)病學基礎;已有的研究也發(fā)現(xiàn),阻斷休克腸淋巴液回流可降低脾臟、胸腺等免疫器官的結(jié)構(gòu)損傷,改善細胞免疫功能。但休克腸淋巴液回流與DCs這一啟動細胞免疫功能的抗原遞呈細胞之間的關系,還不清楚。目的:本研究在建立失血性休克小鼠模型的基礎上,應用脾DCs免疫磁珠分離技術,觀察腸淋巴液引流、腸淋巴液孵育對DCs在脂多糖(LPS)處理前后產(chǎn)生細胞因子能力的影響,初步揭示腸淋巴液對DCs免疫功能的調(diào)節(jié)作用。方法:健康雄性BALB/C小鼠,分為假手術組、休克組、休克+引流組。休克組與休克+引流組動物復制失血性休克模型(40±2 mm Hg維持60 min后行液體復蘇),休克+引流組動物于液體復蘇結(jié)束即刻行腸淋巴液引流,3 h后或假手術組于相應時間點,取脾,應用免疫磁珠法(抗CD11c)分選獲取脾臟DCs;離體培養(yǎng)環(huán)境狀態(tài)下,觀察三組小鼠脾DCs以及在LPS孵育后產(chǎn)生TNF-α、IL-10、IL-12的能力。取健康雄性BALB/C小鼠,復制失血性休克模型,部分引流低血壓60 min期間的休克期腸淋巴液(post-hemorrhagic shock mesenteric lymph during hypotenstion,PHSML-H),部分引流液體復蘇后腸淋巴液(post-hemorrhagic shcok and mesenteric lymph after resuscitation,PHSML-R),取正常小鼠引流正常腸淋巴液(normal mesenteric lymph,NML);然后取正常小鼠脾臟,應用免疫磁珠法分選獲取脾臟DCs;將NML、PHSML-H、PHSML-R分別與正常DCs培養(yǎng),并以LPS做為陽性對照,同時設空白對照,觀察各組DCs在3、6、12、24 h以及再次分別與LPS處理后24 h產(chǎn)生TNF-α、IL-10、IL-12的能力。結(jié)果:急性分離的脾DCs,經(jīng)免疫磁珠分選、流式細胞術檢測,獲得的CD11c+細胞純度均在90%以上。假手術組、休克組和休克+引流組小鼠急性分離的脾DCs,在體外培養(yǎng)24 h后,各組間培養(yǎng)上清液中TNFα、IL-10和IL-12含量未見統(tǒng)計學差異(P0.05);各組脾DCs與LPS共孵育24 h后,假手術組與休克+引流組培養(yǎng)上清液中的TNF-α、IL-10和IL-12含量、以及休克組培養(yǎng)上清液中的TNF-α、IL-10的含量均顯著高于組內(nèi)未經(jīng)LPS處理組(P0.05);更重要的是,結(jié)果發(fā)現(xiàn)休克組TNFα、IL-12以及休克+引流組IL-12的含量均顯著低于假手術組(P0.05);休克+引流組TNFα的含量顯著高于休克組(P0.05)。急性分離的小鼠脾DCs經(jīng)腸淋巴液處理后的結(jié)果顯示,PHSML-H、PHSML-R在多個時間點引起了DCs培養(yǎng)上清液中TNF-α、IL-10的增加,但并未引起IL-12水平的變化,且TNF-α、IL-10均顯著低于LPS陽性對照同一時間點的濃度;已經(jīng)與各種因素孵育后的DCs再次接受LPS刺激,與PHSML-H、PHSML-R孵育后的DCs產(chǎn)生TNF-α、IL-10、IL-12的能力有一定的增強,但仍有多個時間點低于LPS陽性對照組,尤其是PHSML-R孵育組更是遠遠低于LPS陽性對照組。結(jié)論:失血性休克引起了脾DCs分泌細胞因子的功能障礙,這是失血性休克后免疫功能抑制的原因之一;以腸淋巴液引流的方式減少休克腸淋巴液回流,對恢復脾DCs功能具有一定的有利的作用,這是阻斷休克腸淋巴液回流改善機制免疫功能的機制之一。
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R459.7

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉華;邢立強;趙自剛;牛春雨;;腸淋巴液引流減輕失血性休克大鼠脾組織損傷的作用與機制[J];中國病理生理雜志;2013年08期

2 劉星;梁平;周波;張克勤;靳風爍;李彥鋒;;膀胱腫瘤患者外周血源性樹突狀細胞表型及免疫功能變化[J];第三軍醫(yī)大學學報;2013年09期

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本文編號：1215412