本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)急性肝損傷的治療作用與NF-κB和CUGBP1的表達(dá)

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【摘要】：目的觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone morrow stem cells,BMSCs)移植對(duì)急性肝損傷小鼠的治療作用,研究通過(guò)靜脈移植的BMSCs在急性肝損傷小鼠肝組織內(nèi)的分布和遷移特點(diǎn),并探討其促修復(fù)作用的轉(zhuǎn)錄激活和m RNA剪接機(jī)制。方法雌性昆明種小鼠42只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、損傷模型組和干細(xì)胞移植組。分離同種小鼠BMSCs,體外擴(kuò)增、Brd U標(biāo)記后經(jīng)尾靜脈注入以40%CCl4一次性灌胃制備的急性肝損傷小鼠體內(nèi)。于灌胃后第5天、第10天、第15天分別取損傷模型組和干細(xì)胞移植組小鼠的肝臟,正常對(duì)照組不做處理,直接取肝臟,各組均制備石蠟切片和冷凍切片,并留取新鮮組織,蘇木精-伊紅(HE)染色觀察肝組織的結(jié)構(gòu)變化,免疫組織化學(xué)染色追蹤Brd U陽(yáng)性標(biāo)記干細(xì)胞在肝組織內(nèi)的遷移和分布情況,免疫組織化學(xué)染色及Western Blot技術(shù)檢測(cè)肝組織中轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、RNA結(jié)合蛋白CUGBP1的表達(dá)情況。結(jié)果(1)HE染色結(jié)果顯示,干細(xì)胞移植組第5、第10、第15天肝組織的修復(fù)狀態(tài)明顯好于損傷天數(shù)相同的損傷模型組小鼠;干細(xì)胞移植組第15天時(shí)肝組織已接近正常。(2)免疫組化結(jié)果可見(jiàn)干細(xì)胞移植組小鼠在CCl4灌胃后第5天時(shí)肝組織內(nèi)散在分布著大量的黃色或褐色的Brd U陽(yáng)性細(xì)胞胞核。干細(xì)胞移植組第10天Brd U陽(yáng)性細(xì)胞核的數(shù)量較同組第5天時(shí)少。干細(xì)胞移植組第15天受體鼠肝組織內(nèi)Brd U陽(yáng)性細(xì)胞胞核數(shù)明顯減少。(3)NF-κB和CUGBP1蛋白的檢測(cè),免疫組化結(jié)果顯示:正常對(duì)照組小鼠NF-κB和CUGBP1在胞漿淺表達(dá)或不表達(dá),損傷模型組和干細(xì)胞移植組NF-κB和CUGBP1蛋白的表達(dá)均較正常對(duì)照組增高;干細(xì)胞移植組小鼠NF-κB和CUGBP1蛋白的表達(dá)強(qiáng)度均較同時(shí)間點(diǎn)的肝損傷模型組要弱,差異均有顯著性(P0.05)。同時(shí)間點(diǎn)損傷模型組和干細(xì)胞移植組NF-κB蛋白的表達(dá)均較CUGBP1強(qiáng)。Western blot結(jié)果顯示:與正常對(duì)照組相比,損傷模型組和干細(xì)胞移植組小鼠肝組織中NF-κB、CUGBP1蛋白的表達(dá)水平均增高,與同時(shí)間點(diǎn)的損傷模型組相比,干細(xì)胞移植組小鼠肝組織中NF-κB、CUGBP1蛋白的表達(dá)水平均降低,干細(xì)胞移植組與損傷模型組同時(shí)間點(diǎn)之間差異均具有顯著性(P0.05)。結(jié)論經(jīng)靜脈移植的BMSCs可以遷移至急性肝損傷小鼠肝臟,并對(duì)損傷肝臟有修復(fù)作用,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)單位面積內(nèi)BMSCs的數(shù)量有減少。干細(xì)胞移植對(duì)急性肝損傷的治療作用可能與下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和RNA結(jié)合蛋白CUGBP1的表達(dá)有關(guān),推測(cè)干細(xì)胞移植可能通過(guò)抑制NF-κB的核轉(zhuǎn)錄激活和RNA結(jié)合蛋白CUGBP1的表達(dá),減輕炎癥反應(yīng)和穩(wěn)定m RNA而發(fā)揮對(duì)損傷肝臟的促修復(fù)作用的。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R657.3

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本文編號(hào)：1214320