谷胱甘肽對多臟器功能障綜合征患者內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激影響的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-11-12 19:32
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【摘要】:目的探討多器官功能障礙綜合征(MODS)患者血清對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響,研究抗氧化劑谷胱甘肽對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用,闡明外源性谷胱甘肽對內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。 方法納入符合MODS診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者,入科后24h內(nèi)抽取血樣離心后血清-80℃冰箱保存,同時(shí)記錄患者基本資料,評價(jià)生化指標(biāo)、動脈血?dú)夥治、APACHE Ⅱ評分、SOFA評分、28天死亡率等指標(biāo)。培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC),細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分為4組:空白對照組、血清處理組、N-乙酰半胱氨酸(NAC)對照組、GSH治療組(6mg/ml、12mg/ml、18mg/ml)。采用酶化學(xué)法測定細(xì)胞超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化氫酶(GSH-px)、總抗氧化能力(T-AOC)、過氧化氫酶(CAT)、丙二醛(MDA)等水平。以氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(CM2-H2DCFDA)染色后,流式細(xì)胞儀立即檢測CM2-H2DCFDA氧化產(chǎn)物二氯熒光素的平均熒光強(qiáng)度測定細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)強(qiáng)度,MTT法檢測各組細(xì)胞活力。各測量值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示,應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,兩組間的均數(shù)比較采用t檢驗(yàn),多組間均數(shù)的比較采用q檢驗(yàn),以p0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果共納入20位MODS患者,其中存活組12例,死亡組8例。死亡組患者年齡、APACHE Ⅱ評分、SOFA評分明顯高于存活組。存活組患者白蛋白、動脈血氧分壓(PO2)和氧和指數(shù)(PO2/FiO2)高于死亡組,而死亡組患者的肌酐、尿素氮、動脈血乳酸均明顯高于成活組。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),MODS患者血清處理后的內(nèi)皮細(xì)胞SOD、GSH-px、T-AOC、CAT水平均低于空白對照組,給予不同濃度的GSH預(yù)處理后再利用MODS患者血清處理后的內(nèi)皮細(xì)胞的SOD、GSH-px、T-AOC、CAT水平與單純血清處理組相比明顯增高。MODS患者血清處理后的內(nèi)皮細(xì)胞ROS、MDA水平明顯增加,而GSH治療組的ROS、MDA水平低于血清處理組。另外,MTT測定細(xì)胞活性結(jié)果顯示,血清處理組的細(xì)胞活性明顯低于正常對照組,GSH預(yù)處理后細(xì)胞活性增加。 結(jié)論多臟器功能障礙綜合征患者內(nèi)皮細(xì)胞功能受到一定的抑制,谷胱甘肽可通過增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化能力、減少自由基生成、抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)以及增強(qiáng)細(xì)胞活性等機(jī)制起到保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R459.7
【參考文獻(xiàn)】
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1 Q,
本文編號:1177305
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